| 摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 前言 | 第13-22页 |
| 1.1 血脑屏障(BBB)及其结构简介 | 第13-17页 |
| 1.1.1 内皮细胞(EC) | 第14-15页 |
| 1.1.2 神经元 | 第15页 |
| 1.1.3 小胶质细胞 | 第15-16页 |
| 1.1.4 周细胞 | 第16页 |
| 1.1.5 星形胶质细胞 | 第16页 |
| 1.1.6 基底膜 | 第16-17页 |
| 1.2 体外BBB模型的简介 | 第17-19页 |
| 1.3 中枢靶向纳米药物简介 | 第19-20页 |
| 1.4 本论文的研究目的及意义 | 第20-22页 |
| 第一章 脑微血管内皮细胞的分离与培养 | 第22-30页 |
| 1.1 实验动物 | 第22页 |
| 1.2 实验材料 | 第22-23页 |
| 1.2.1 主要试剂与材料 | 第22-23页 |
| 1.3 实验方法 | 第23-25页 |
| 1.3.1 细胞培养瓶的预处理 | 第23页 |
| 1.3.2 脑微血管内皮细胞(BMECs)原代培养 | 第23-24页 |
| 1.3.3 BMECs传代 | 第24页 |
| 1.3.4 倒置相差显微镜观察 | 第24页 |
| 1.3.5 CCK-8法测定BMECs的生长曲线 | 第24页 |
| 1.3.6 VIII因子相关抗原细胞免疫荧光鉴定 | 第24-25页 |
| 1.3.7 透射电镜(TEM)观察 | 第25页 |
| 1.4 实验结果 | 第25-27页 |
| 1.4.1 BMECs的形态学观察 | 第25-26页 |
| 1.4.2 BMECs生长曲线 | 第26页 |
| 1.4.3 VIII因子相关抗原细胞免疫荧光鉴定 | 第26-27页 |
| 1.5 讨论 | 第27-28页 |
| 1.6 结论 | 第28-30页 |
| 第二章 体外血脑屏障模型的建立 | 第30-39页 |
| 2.1 实验动物 | 第30页 |
| 2.2 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.2.1 主要试剂与材料 | 第30-31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-34页 |
| 2.3.1 Transwell的预处理 | 第31页 |
| 2.3.2 体外BBB模型的建立[26,43,44] | 第31页 |
| 2.3.3 甘氨酸细胞银染实验 | 第31-32页 |
| 2.3.4 4h渗漏实验 | 第32页 |
| 2.3.5 TEER实验 | 第32页 |
| 2.3.6 FLU通透性实验 | 第32-33页 |
| 2.3.7 穿透/不穿透BBB对照药物对模型的评价 | 第33页 |
| 2.3.8 激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)成像 | 第33-34页 |
| 2.4 统计学分析 | 第34页 |
| 2.5 实验结果 | 第34-37页 |
| 2.5.1 甘氨酸细胞银染 | 第34页 |
| 2.5.2 4h渗漏实验 | 第34-35页 |
| 2.5.3 TEER实验 | 第35页 |
| 2.5.4 FLU通透性实验 | 第35-36页 |
| 2.5.5 穿透/不穿透BBB对照药物对模型测试 | 第36-37页 |
| 2.6 讨论 | 第37-38页 |
| 2.7 结论 | 第38-39页 |
| 第三章 不同尺寸及表面修饰的硅纳米颗粒对血脑屏障通透性的研究 | 第39-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.1.1 主要试剂与材料 | 第39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-42页 |
| 3.2.1 不同尺寸及带有表面修饰的硅纳米颗粒合成 | 第39-40页 |
| 3.2.2 不同尺寸及表面修饰的硅纳米颗粒对体外BBB模型的通透性评价 | 第40-41页 |
| 3.2.3 LSCM成像 | 第41-42页 |
| 3.2.4 TEM观察 | 第42页 |
| 3.3 实验结果 | 第42-43页 |
| 3.3.1 LSCM成像结果 | 第42-43页 |
| 3.3.2 TEM结果 | 第43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 结论 | 第44-45页 |
| 第四章 中枢靶向纳米颗粒装载高水溶性药物的血脑屏障通透性研究 | 第45-49页 |
| 4.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.1.1 主要试剂与材料 | 第45页 |
| 4.2 实验方法 | 第45-47页 |
| 4.2.1 纳米多孔硅球载体(MSN)的制备 | 第45-46页 |
| 4.2.2 多孔纳米硅球(MSN)吸附并装载HI-6的制备及其靶向修饰 | 第46页 |
| 4.2.3 HI-6和Tf-MSN-HI-6对体外BBB模型的穿透性实验 | 第46-47页 |
| 4.3 统计学分析 | 第47页 |
| 4.4 实验结果 | 第47-48页 |
| 4.4.1 Tf-MSN-HI-6与HI-6对体外BBB模型的穿透性实验 | 第47-48页 |
| 4.5 讨论 | 第48页 |
| 4.6 结论 | 第48-49页 |
| 第五章 高脂溶性纳米药物的血脑屏障的通透性研究 | 第49-57页 |
| 5.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 5.1.1 主要试剂与材料 | 第49-50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 5.2.1 依托泊苷纳米颗粒的制备与表征 | 第50页 |
| 5.2.2 依托泊苷粉末及纳米颗粒悬浊液释放曲线的测定[59] | 第50页 |
| 5.2.3 依托泊苷纳米颗粒等对KB细胞生长的影响 | 第50-51页 |
| 5.2.4 依托泊苷纳米药物穿透体外BBB模型的实验 | 第51页 |
| 5.3 统计学分析 | 第51页 |
| 5.4 实验结果 | 第51-55页 |
| 5.4.1 依托泊苷纳米颗粒的制备与表征 | 第51-52页 |
| 5.4.2 依托泊苷粉末及纳米颗粒悬浊液释放曲线的测定 | 第52-53页 |
| 5.4.3 依托泊苷纳米颗粒等对KB细胞生长的影响 | 第53-54页 |
| 5.4.4 依托泊苷纳米药物穿透体外BBB模型的测定 | 第54-55页 |
| 5.5 讨论 | 第55页 |
| 5.6 结论 | 第55-57页 |
| 第六章 结论与展望 | 第57-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 在学期间取得的学术成果 | 第65-66页 |
| 主要简历 | 第66-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
