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扁蓿豆DREB转录因子家族同源基因MrDREB1的克隆和功能鉴定

摘要第4-6页
abstract第6-7页
1 引言第10-17页
    1.1 扁蓿豆简介第10页
    1.2 DREB转录因子第10-12页
    1.3 DREB转录因子调控的下游靶基因第12-14页
    1.4 与扁蓿豆DREB转录因子调控相关的抗逆基因第14页
    1.5 胁迫应答基因的胁迫信号途径及转录应答第14-16页
        1.5.1 胁迫基因信号途径第14-15页
        1.5.2 顺式作用元件和转录因子在非生物胁迫中的应答第15-16页
    1.6 本研究目的与意义第16-17页
2 材料与方法第17-29页
    2.1 实验材料第17-19页
        2.1.1 植物材料第17页
        2.1.2 菌种与质粒第17页
        2.1.3 试剂第17-18页
        2.1.4 所用引物序列第18-19页
    2.2 实验方法第19-29页
        2.2.1 扁蓿豆无菌幼苗的培育第19页
        2.2.2 RACE技术克隆扁蓿豆DREB基因第19-22页
        2.2.3 扁蓿豆MrDREB1基因全长cDNA的克隆第22页
        2.2.4 利用Gateway技术构建MrDREB1基因表达载体第22-25页
        2.2.5 转基因扁蓿豆幼苗抗逆性检测第25-26页
        2.2.6 转基因扁蓿豆MrDREB1基因表达检测第26-29页
3 结果与分析第29-44页
    3.1 扁蓿豆总RNA的提取第29页
    3.2 MrDREB1基因的克隆第29-36页
        3.2.1 MrDREB1基因保守区片段的克隆第29-30页
        3.2.2 MrDREB1基因3’-RACE结果第30-31页
        3.2.3 MrDREB1基因5’-RACE结果第31-32页
        3.2.4 MrDREB1基因全长cDNA的克隆第32-34页
        3.2.5 MrDREB1蛋白相似性分析第34页
        3.2.6 MrDREB1基因表达模式分析第34-35页
        3.2.7 MrDREB1基因超表达载体的构建第35页
        3.2.8 MrDREB1基因tasiRNA介导基因沉默载体的构建第35-36页
    3.3 MrDREB1基因生物信息学分析第36-40页
        3.3.1 MrDREB1基因编码蛋白数量分析第36-37页
        3.3.2 MrDREB1蛋白进化树分析第37页
        3.3.3 亲水性和疏水性分析第37-38页
        3.3.4 跨膜结构第38页
        3.3.5 信号肽预测第38-39页
        3.3.6 MrDREB1蛋白磷酸化位点分析第39-40页
        3.3.7 MrDREB1蛋白亚细胞定位预测第40页
    3.4 转基因扁蓿豆MrDREB1基因抗逆分析第40-42页
    3.5 转基因扁蓿豆MrDREB1下游基因表达量分析第42-44页
4 结论与讨论第44-47页
    4.1 结论第44-45页
    4.2 讨论第45-47页
参考文献第47-52页
致谢第52页

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