摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-17页 |
1.1 扁蓿豆简介 | 第10页 |
1.2 DREB转录因子 | 第10-12页 |
1.3 DREB转录因子调控的下游靶基因 | 第12-14页 |
1.4 与扁蓿豆DREB转录因子调控相关的抗逆基因 | 第14页 |
1.5 胁迫应答基因的胁迫信号途径及转录应答 | 第14-16页 |
1.5.1 胁迫基因信号途径 | 第14-15页 |
1.5.2 顺式作用元件和转录因子在非生物胁迫中的应答 | 第15-16页 |
1.6 本研究目的与意义 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-29页 |
2.1 实验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第17页 |
2.1.2 菌种与质粒 | 第17页 |
2.1.3 试剂 | 第17-18页 |
2.1.4 所用引物序列 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-29页 |
2.2.1 扁蓿豆无菌幼苗的培育 | 第19页 |
2.2.2 RACE技术克隆扁蓿豆DREB基因 | 第19-22页 |
2.2.3 扁蓿豆MrDREB1基因全长cDNA的克隆 | 第22页 |
2.2.4 利用Gateway技术构建MrDREB1基因表达载体 | 第22-25页 |
2.2.5 转基因扁蓿豆幼苗抗逆性检测 | 第25-26页 |
2.2.6 转基因扁蓿豆MrDREB1基因表达检测 | 第26-29页 |
3 结果与分析 | 第29-44页 |
3.1 扁蓿豆总RNA的提取 | 第29页 |
3.2 MrDREB1基因的克隆 | 第29-36页 |
3.2.1 MrDREB1基因保守区片段的克隆 | 第29-30页 |
3.2.2 MrDREB1基因3’-RACE结果 | 第30-31页 |
3.2.3 MrDREB1基因5’-RACE结果 | 第31-32页 |
3.2.4 MrDREB1基因全长cDNA的克隆 | 第32-34页 |
3.2.5 MrDREB1蛋白相似性分析 | 第34页 |
3.2.6 MrDREB1基因表达模式分析 | 第34-35页 |
3.2.7 MrDREB1基因超表达载体的构建 | 第35页 |
3.2.8 MrDREB1基因tasiRNA介导基因沉默载体的构建 | 第35-36页 |
3.3 MrDREB1基因生物信息学分析 | 第36-40页 |
3.3.1 MrDREB1基因编码蛋白数量分析 | 第36-37页 |
3.3.2 MrDREB1蛋白进化树分析 | 第37页 |
3.3.3 亲水性和疏水性分析 | 第37-38页 |
3.3.4 跨膜结构 | 第38页 |
3.3.5 信号肽预测 | 第38-39页 |
3.3.6 MrDREB1蛋白磷酸化位点分析 | 第39-40页 |
3.3.7 MrDREB1蛋白亚细胞定位预测 | 第40页 |
3.4 转基因扁蓿豆MrDREB1基因抗逆分析 | 第40-42页 |
3.5 转基因扁蓿豆MrDREB1下游基因表达量分析 | 第42-44页 |
4 结论与讨论 | 第44-47页 |
4.1 结论 | 第44-45页 |
4.2 讨论 | 第45-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
致谢 | 第52页 |