| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-12页 |
| 1. 表观遗传学 | 第8页 |
| 2. DNA 甲基化的研究进展 | 第8-9页 |
| ·DNA 甲基化概述 | 第8页 |
| ·DNA甲基化的作用机制 | 第8-9页 |
| 3. 酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae） | 第9-10页 |
| 4.毕赤酵母（Pichia pastoris） | 第10页 |
| 5. 本研究的目的和意义 | 第10-12页 |
| 第一部分应用酿酒酵母对水稻DNA 甲基转移酶的生物学功能研究 | 第12-34页 |
| 材料和方法 | 第12-25页 |
| 1. 实验材料 | 第12页 |
| 2. 实验方法 | 第12-25页 |
| ·酵母单杂交质粒载体的构建 | 第12-18页 |
| ·转化酿酒酵母 | 第18-20页 |
| ·EGFP 表达荧光定位 | 第20页 |
| ·表达及点板 | 第20页 |
| ·MSAP 检测预测的水稻甲基转移酶对酵母基因组甲基化的影响 | 第20-25页 |
| 结果与分析 | 第25-32页 |
| 1. 重组质粒构建 | 第25-28页 |
| ·pEGFP-N1 和pBridge 载体鉴定 | 第25页 |
| ·阳性对照pBridge_hDNMT3A、pBridge_hDNMT3B2 表达载体的构建 | 第25-26页 |
| ·OsDMT（DMT706CDS、DMT710-1CDS、DMT710-3CDS）表达载体的构建 | 第26-28页 |
| 2. 重组质粒在酿酒酵母AH109 中的表达 | 第28-32页 |
| ·转化酿酒酵母AH109 | 第28页 |
| ·检测融合蛋白EGFP 的表达 | 第28页 |
| ·外转hDNMT 和OsDMT 的表达对酵母AH109 生长的影响 | 第28-29页 |
| ·外转重组质粒对酿酒酵母AH109 甲基化变异模式的影响 | 第29-32页 |
| 讨论 | 第32-34页 |
| 第二部分应用毕赤酵母对水稻DNA 甲基转移酶的生物学功能研究 | 第34-41页 |
| 材料和方法 | 第34-39页 |
| 1.实验材料 | 第34页 |
| 2.实验方法 | 第34-39页 |
| ·毕赤酵母pPIZBα_DMT706CDS 表达质粒的构建 | 第34-35页 |
| ·转化毕赤酵母 | 第35-36页 |
| ·质粒DNA 线性化 | 第35页 |
| ·制备毕赤酵母原生质细胞 | 第35页 |
| ·EasyComp~(TM) 转化 | 第35-36页 |
| ·筛选Mut~+转化子 | 第36页 |
| ·Mut~+分泌表达 | 第36-37页 |
| ·提取毕赤酵母DNA和RNA | 第37页 |
| ·毕赤酵母RNA的反转录 | 第37-38页 |
| ·RT PCR | 第38-39页 |
| 结果与分析 | 第39-41页 |
| 1.筛选Mut~+转化子 | 第39页 |
| 2.Mut~+分泌表达 | 第39页 |
| 3.RT PCR | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 致谢 | 第45页 |
