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IL-33调节中性粒细胞抗金黄色葡萄球菌感染的作用研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
第一章 序言第11-14页
第二章 IL-33 免疫调节MRSA腹腔感染的作用第14-25页
    2.1 前言第14页
    2.2 实验材料第14-16页
        2.2.1 主要实验材料第14页
        2.2.2 主要试剂第14-15页
        2.2.3 主要仪器设备第15页
        2.2.4 主要溶液配制第15-16页
    2.3 实验方法第16-19页
        2.3.1 金黄色葡萄球菌(MRSA)的培养第16页
        2.3.2 腹腔感染模型的建立第16页
        2.3.3 IL-33 处理第16页
        2.3.4 小鼠死亡曲线第16-17页
        2.3.5 感染后小鼠的处理第17-18页
        2.3.6 ELISA检测炎性细胞因子表达第18-19页
        2.3.7 IL-33 在中性粒细胞清除后腹腔感染中的作用第19页
        2.3.8 统计分析第19页
    2.4 实验结果第19-23页
        2.4.1 小鼠存活率变化第19-20页
        2.4.2 血液、腹腔液及脏器细菌负荷量第20-21页
        2.4.3 血液与腹腔液中性粒细胞数目第21页
        2.4.4 外周血及腹腔液中炎性细胞因子的表达第21-22页
        2.4.5 IL-33 免疫调节呈中性粒细胞依赖性第22-23页
    2.5 讨论第23-25页
第三章 IL-33 对中性粒细胞功能的影响第25-38页
    3.1 前言第25页
    3.2 实验材料第25-27页
        3.2.1 主要实验材料第25页
        3.2.2 主要试剂第25-26页
        3.2.3 主要仪器设备第26页
        3.2.4 主要溶液配制第26-27页
    3.3 实验方法第27-32页
        3.3.1 金黄色葡萄球菌(MRSA)的培养(同第二章)第27页
        3.3.2 中性粒细胞分离(不连续的密度梯度骨髓- Percoll离心法)第27-28页
        3.3.3 Transwell检测中性粒细胞趋化功能第28页
        3.3.4 流式细胞术检测中性粒细胞吞噬功能第28-29页
        3.3.5 溶细胞法检测中性粒细胞的杀菌功能第29页
        3.3.6 流式细胞术检测中性粒细胞趋化因子CXCR2 或粘附分子CD11b的表达第29-30页
        3.3.7 流式细胞术检测中性粒细胞的呼吸爆发第30页
        3.3.8 流式细胞术检测p-AKT和p-mTOR表达第30-31页
        3.3.9 mTOR信号对中性粒细胞杀菌功能的影响第31-32页
        3.3.10 统计分析第32页
    3.4 实验结果第32-36页
        3.4.1 IL-33 对中性粒细胞趋化功能的影响第32-33页
        3.4.2 IL-33 对中性粒细胞吞噬功能的影响第33页
        3.4.3 IL-33 对中性粒细胞杀菌功能的影响第33-34页
        3.4.4 流式细胞术检测IL-33 对中性粒细胞呼吸爆发的影响第34页
        3.4.5 流式细胞术检测IL-33 对中性粒细胞粘附分子CD11b表达的影响第34-35页
        3.4.6 mTOR信号调控中性粒细胞杀菌第35-36页
    3.5 讨论第36-38页
第四章 IL-33 参与抗MRSA皮肤感染的作用第38-49页
    4.1 前言第38页
    4.2 实验材料第38-40页
        4.2.1 主要实验材料第38页
        4.2.2 主要试剂第38-39页
        4.2.3 主要仪器设备第39页
        4.2.4 主要溶液配制第39-40页
    4.3 实验方法第40-44页
        4.3.1 皮肤感染模型建立第40页
        4.3.2 给药方法第40页
        4.3.3 组织切片HE染色、革兰氏染色和免疫组织化学第40-42页
        4.3.4 小鼠皮肤脓肿部位IL-33 的表达第42-43页
        4.3.5 统计分析第43-44页
    4.4 实验结果第44-48页
        4.4.1 小鼠皮肤脓肿部位IL-33 的表达第44页
        4.4.2 小鼠背部皮肤脓肿溃烂面积和愈合时间第44-45页
        4.4.3 伤口组织切片HE染色、革兰氏染色第45-47页
        4.4.4 小鼠皮肤感染伤口局部NETs的形成第47-48页
    4.5 讨论第48-49页
第五章 IL-33 调控中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)杀菌作用第49-60页
    5.1 前言第49页
    5.2 实验材料第49-51页
        5.2.1 主要实验材料第49页
        5.2.2 主要试剂第49页
        5.2.3 主要仪器设备第49-50页
        5.2.4 主要溶液配制第50-51页
    5.3 实验方法第51-54页
        5.3.1 金黄色葡萄球菌(MRSA)的培养(同第二章)第51页
        5.3.2 中性粒细胞分离(同第三章)第51页
        5.3.3 MRSA促进中性粒细胞表达IL-33第51页
        5.3.4 不同浓度的IL-33 对MRSA诱导NETs生成和杀菌率的影响第51-52页
        5.3.5 检测无NETs作用下,IL-33 对MRSA诱导NETs生成和杀菌率的影响第52-53页
        5.3.6 检测ROS被抑制时,IL-33 对MRSA诱导NETs生成和杀菌率的影响第53-54页
        5.3.7 NETs免疫荧光染色第54页
        5.3.8 统计分析第54页
    5.4 实验结果第54-58页
        5.4.1 MRSA促进中性粒细胞表达IL-33第54-55页
        5.4.2 IL-33 对MRSA诱导NETs生成和杀菌率的影响第55-56页
        5.4.3 DNA酶(DNaseⅠ)对NETs生成和杀菌率的影响第56-57页
        5.4.4 ROS抑制剂(DPI)对NETs生成和杀菌率的影响第57-58页
    5.5 讨论第58-60页
全文总结第60-61页
参考文献第61-65页
已发表综述第65-74页
    参考文献第71-74页
附录1 英文缩写语中文对照第74-76页
附录2 攻读学位期间发表的论文第76-77页
致谢第77页

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