| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-28页 |
| 1.1 航空燃油总述及其可再生替代物的研究 | 第18-19页 |
| 1.1.1 航空燃油简介 | 第18页 |
| 1.1.2 可再生航空燃油生产的现行技术 | 第18-19页 |
| 1.2 生物燃料简介 | 第19-21页 |
| 1.2.1 燃料乙醇 | 第19-20页 |
| 1.2.2 燃料丁醇 | 第20-21页 |
| 1.2.3 生物柴油 | 第21页 |
| 1.3 烷烃生物合成途径的研究 | 第21-25页 |
| 1.4 本课题的研究目的及思路 | 第25-28页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第25页 |
| 1.4.2 研究思路 | 第25-28页 |
| 第二章 烷烃生物合成途径的构建 | 第28-42页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第28-29页 |
| 2.2.1 菌株,质粒和引物 | 第28-29页 |
| 2.2.2 培养基 | 第29页 |
| 2.2.3 试剂和仪器 | 第29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-34页 |
| 2.3.1 不动杆菌中酰基辅酶A还原酶基因acr1的克隆及重组载体的构建 | 第29-31页 |
| 2.3.2 不动杆菌中酰基辅酶A还原酶基因acrM的克隆及重组载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.3.3 念珠藻中醛脱羰基酶基因出的克隆及重组载体的构建 | 第32-33页 |
| 2.3.4 含有acr1/dc以及acrM/dc基因工程大肠杆菌的构建 | 第33页 |
| 2.3.5 工程菌的诱导表达及烷烃的生产和萃取 | 第33页 |
| 2.3.6 产物的GC-MS检测及所用方法 | 第33-34页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第34-41页 |
| 2.4.1 acr1基因的扩增与测序和表达载体pETDuet-acr1的构建 | 第34-36页 |
| 2.4.2 acrM基因的扩增与测序和表达载体pETDuet-acrM的构建 | 第36-37页 |
| 2.4.3 dc基因的扩增与测序和表达载体pETDuet-acr-dc的构建 | 第37-39页 |
| 2.4.4 工程大肠杆菌的摇瓶发酵与产物检测即代谢途径的可行性验证 | 第39-41页 |
| 2.5 小结 | 第41-42页 |
| 第三章 通过基因工程手段调控烷烃链长 | 第42-58页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第42-43页 |
| 3.2.1 菌株,质粒和引物 | 第42页 |
| 3.2.2 培养基 | 第42-43页 |
| 3.2.3 试剂和仪器 | 第43页 |
| 3.3 实验方法 | 第43-45页 |
| 3.3.1 重组载体pETDuet-uc-acrM的构建 | 第43页 |
| 3.3.2 重组载体pETDuet-uc-acrM-dc的构建 | 第43-44页 |
| 3.3.3 含有uc/acrM/dc基因工程大肠杆菌的构建 | 第44页 |
| 3.3.4 工程菌的诱导表达及产物的生产和萃取 | 第44页 |
| 3.3.5 产物的GC-MS检测及定量 | 第44-45页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第45-56页 |
| 3.4.1 pETDuet-uc-acrM表达载体的构建及鉴定 | 第45-46页 |
| 3.4.2 pETDuet-uc-acrM-dc表达载体的构建及鉴定 | 第46-47页 |
| 3.4.3 几种代谢物标准曲线的制作 | 第47-52页 |
| 3.4.4 工程大肠杆菌的摇瓶发酵及中间产物、终产物定量检测 | 第52-56页 |
| 3.5 小结 | 第56-58页 |
| 第四章 中链烷烃的产量优化 | 第58-70页 |
| 4.1 引言 | 第58页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第58-59页 |
| 4.2.1 菌株,质粒和引物 | 第58-59页 |
| 4.2.2 培养基 | 第59页 |
| 4.2.3 试剂和仪器 | 第59页 |
| 4.3 实验方法 | 第59-61页 |
| 4.3.1 大肠杆菌基因组的提取 | 第59页 |
| 4.3.2 大肠杆菌中酰基辅酶A合成酶基因fadD的克隆及重组载体的构建 | 第59-60页 |
| 4.3.3 含有uc/acrM/dc/fadD的基因工程大肠杆菌的构建 | 第60-61页 |
| 4.3.4 工程菌的诱导表达及产物的生产和萃取 | 第61页 |
| 4.3.5 产物的GC-MS检测及定量 | 第61页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第61-68页 |
| 4.4.1 细菌基因组提取实验 | 第61-62页 |
| 4.4.2 fadD基因的扩增与测序和表达载体的构建 | 第62-64页 |
| 4.4.3 双重抗性载体的共表达 | 第64-65页 |
| 4.4.4 工程大肠杆菌的摇瓶发酵及中间产物、终产物定量检测 | 第65-68页 |
| 4.5 小结 | 第68-70页 |
| 第五章 引入植物ACP及FAS以提高烷烃产量的尝试 | 第70-92页 |
| 5.1 引言 | 第70页 |
| 5.2 实验材料与仪器 | 第70-71页 |
| 5.2.1 菌株,质粒和引物 | 第70-71页 |
| 5.2.2 培养基 | 第71页 |
| 5.2.3 试剂和仪器 | 第71页 |
| 5.3 实验方法 | 第71-75页 |
| 5.3.1 重组载体pET28a-JC的构建 | 第71-75页 |
| 5.3.2 lac启动子的克隆与重组载体pET28a-lac的构建 | 第75页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第75-91页 |
| 5.4.1 pET28a-JC重组载体的构建及鉴定 | 第75-89页 |
| 5.4.2 lac启动子的扩增与测序及表达载体的构建 | 第89-91页 |
| 5.5 小结 | 第91-92页 |
| 第六章 结论与展望 | 第92-96页 |
| 参考文献 | 第96-100页 |
| 附录一 本实验所用化学试剂 | 第100-102页 |
| 附录二 本实验所用设备仪器 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第106-108页 |
| 作者及导师简介 | 第108-109页 |
| 附件 | 第109-110页 |
