| 致谢 | 第11-12页 |
| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-15页 |
| 缩略语表 | 第16-17页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-24页 |
| 1.1 PHR1调控植物对磷响应的机制 | 第17-20页 |
| 1.1.1 PHR1-IPS1-miR399-PHO2-PT途径 | 第18-19页 |
| 1.1.2 PHR1-miR827途径 | 第19-20页 |
| 1.1.3 PHR1-PT途径 | 第20页 |
| 1.2 PHRs转录活性调控 | 第20-22页 |
| 1.2.1 PHR1的SUMO修饰 | 第21页 |
| 1.2.2 SPXs对PHRs转录功能的调控 | 第21-22页 |
| 1.3 DNA结构对基因表达的调控 | 第22-23页 |
| 1.4 PHF1 | 第23页 |
| 1.5 研究目标 | 第23-24页 |
| 第2章 顺式作用元件P1BS对OsPHR2亲和力的调控 | 第24-36页 |
| 2.1 材料 | 第24-25页 |
| 2.2 方法 | 第25-29页 |
| 2.2.1 水稻溶液培养条件 | 第25-26页 |
| 2.2.2 酵母单杂交实验 | 第26-27页 |
| 2.2.3 凝胶阻滞EMSA实验 | 第27-29页 |
| 2.2.4 P1BS-P1BS-like LOGO分析 | 第29页 |
| 2.3 实验结果 | 第29-35页 |
| 2.3.1 OsPHR2对不同下游调控基因的亲和力差异 | 第29-31页 |
| 2.3.2 P1BS-P1BS-like决定OsPHR2对DNA的识别 | 第31-33页 |
| 2.3.3 P1BS可变碱基对OsPHR2 DNA亲和力进行精细调控 | 第33-35页 |
| 2.4 本章小结 | 第35-36页 |
| 第3章 高亲和顺式作用元件HA-P1BS在作物改良上的运用 | 第36-48页 |
| 3.1 材料 | 第36-37页 |
| 3.2 方法 | 第37-40页 |
| 3.2.1 发展P_(OsPHF1)-GUS(WT)及P_(OsPHF1)-HA-GUS(HA)转基因材料 | 第37页 |
| 3.2.2 发展PHF1-HA-P1BS转基因材料 | 第37-38页 |
| 3.2.3 GUS活性定量测定 | 第38页 |
| 3.2.4 GUS组织染色及切片 | 第38-39页 |
| 3.2.5 转基因水稻有效磷测定 | 第39页 |
| 3.2.6 转基因水稻~(33)P吸收分析 | 第39-40页 |
| 3.2.7 PHF1-HA-P1BS转基因植株盆栽实验 | 第40页 |
| 3.2.8 植物微波消解及ICP-OES总磷测定 | 第40页 |
| 3.3 实验结果 | 第40-47页 |
| 3.3.1 HA-P1BS能有效提高OsPHF1启动子的转录效率 | 第40-44页 |
| 3.3.2 PHF1-HA-P1BS转基因植株能有效提高磷的利用效率 | 第44-46页 |
| 3.3.3 PHF1-HA-P1BS转基因植株具有耐低磷的特性 | 第46-47页 |
| 3.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 第4章 讨论 | 第48-51页 |
| 4.1 P1BS-P1BS-like是PHRs结合DNA必需的结构 | 第48-49页 |
| 4.2 P1BS可变碱基对OsPHR2 DNA亲和力的精细调控 | 第49页 |
| 4.3 HA-P1BS在作物改良方面的运用 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-77页 |
| 附录1 水稻溶液培养营养液配制 | 第57页 |
| 附录2 引物总汇及构建策略 | 第57-60页 |
| 附录3 水稻基因组DNA的提取 | 第60-62页 |
| 附录4 水稻RNA的提取及qRT-RCR | 第62-64页 |
| 附录5 大肠杆菌DH5α/BL21感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第64-65页 |
| 附录6 转化大肠杆菌DH5α/BL21感受态细胞 | 第65页 |
| 附录7 电击法农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第65-66页 |
| 附录8 水稻转基因方法 | 第66-67页 |
| 附录9 GUS染色及GUS活性检测相关试剂配制 | 第67-69页 |
| 附录10 水稻有效磷测定 | 第69-70页 |
| 附录11 ICP-OES总磷测定标准曲线绘制 | 第70页 |
| 附录12 ~(33)P吸收动力学试剂配制 | 第70-71页 |
| 附录13 酵母感受态细胞的制备及转化 | 第71-72页 |
| 附录14 酵母单杂相关试剂配制 | 第72-73页 |
| 附录15 酵母β-半乳糖苷酶活性测定 | 第73-74页 |
| 附录16 GST原核蛋白纯化试剂的配制 | 第74-75页 |
| 附录17 Southern blot | 第75页 |
| 附录18 Overlap PCR方法 | 第75-77页 |
| 作者简历 | 第77页 |
