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载基因微球的制备及其在促进内皮细胞增殖方面的初步应用

中文摘要第3-5页
ABSTRACT第5-6页
前言第12-14页
第一章 文献综述第14-31页
    1.1 心血管疾病及其治疗第14-15页
        1.1.1 心血管疾病第14页
        1.1.2 心血管疾病的预防与治疗第14-15页
    1.2 人工血管第15-17页
        1.2.1 人工血管基材第15页
        1.2.2 人工血管表面改性第15-17页
            1.2.2.1 人工血管表面物理改性第16页
            1.2.2.2 天然生物材料共混改性第16页
            1.2.2.3 人工血管表面化学改性第16-17页
            1.2.2.4 生物工程改性第17页
    1.3 基因和细胞因子修饰人工血管第17-18页
        1.3.1 细胞因子和基因第17页
        1.3.2 基因用于人工血管改性第17-18页
        1.3.3 ZNF580 基因第18页
    1.4 基因治疗及基因载体第18-29页
        1.4.1 基因治疗第18-19页
        1.4.2 基因载体第19-26页
            1.4.2.1 病毒型基因载体第20页
            1.4.2.2 非病毒型基因载体第20-26页
                1.4.2.2.1 阳离子脂质体基因载体第21-22页
                1.4.2.2.2 层层自组装基因传递系统第22页
                1.4.2.2.3 阳离子聚合物基因载体第22-26页
        1.4.3 聚乙烯亚胺(Polyethyleneimine,PEI)基因载体第26-29页
            1.4.3.1 PEI第26-27页
            1.4.3.2 PEI 非病毒基因载体第27-29页
    1.5 本论文的研究目的及内容第29-31页
第二章 以 mPEG-b-P(MMD-co-GA)-g-PEI 为基材的 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物促进 HUVECs 增殖与迁移第31-56页
    2.1 引言第31-32页
    2.2 实验部分第32-40页
        2.2.1 实验原料与仪器第32-35页
            2.2.1.1 实验原料和试剂第32-33页
            2.2.1.2 主要实验仪器第33-35页
        2.2.2 两亲性三嵌段共聚物 mPEG-b-P(MMD-co-GA)-g-PEI 的合成第35页
            2.2.2.1 两嵌段共聚物 mPEG-b-P(MMD-co-GA)的合成第35页
            2.2.2.2 三嵌段共聚物 mPEG-b-P(MMD-co-GA)-g-PEI 的合成第35页
        2.2.3 共聚物的表征第35-36页
        2.2.4 临界胶束浓度(CMC)测定第36页
        2.2.5 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物的制备和表征第36-38页
            2.2.5.1 MPs 的制备第36页
            2.2.5.2 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物的制备第36-37页
            2.2.5.3 粒径分布和 zeta 电位第37页
            2.2.5.4 琼脂糖凝胶电泳阻滞试验第37页
            2.2.5.5 质粒 pEGFP-ZNF580 体外释放试验第37页
            2.2.5.6 MPs 及 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物的形貌观察第37-38页
        2.2.6 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物细胞转染及细胞毒性第38-39页
            2.2.6.1 细胞培养第38页
            2.2.6.2 体外转染试验第38页
            2.2.6.3 细胞毒性试验第38-39页
        2.2.7 蛋白提取及 western blot 分析第39页
        2.2.8 划痕实验第39-40页
    2.3 结果与讨论第40-55页
        2.3.1 两亲性三嵌段 mPEG-b-P(MMD-co-GA)-g-PEI 共聚物的合成第40-43页
        2.3.2 MPs 表征第43-49页
            2.3.2.1 CMC 值测定第43-44页
            2.3.2.2 MPs 和 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物的形貌第44-47页
            2.3.2.3 琼脂糖凝胶电泳阻滞试验第47-48页
            2.3.2.4 体外释放试验第48-49页
        2.3.3 细胞转染和细胞毒性第49-53页
            2.3.3.1 体外转染第49-51页
            2.3.3.2 体外细胞毒性试验第51-53页
        2.3.4 细胞迁移第53-55页
    2.4 本章小结第55-56页
第三章 可降解 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物促进 HUVECs 增殖和迁移第56-85页
    3.1 引言第56页
    3.2 材料和方法第56-61页
        3.2.1 实验原料和仪器第56-58页
            3.2.1.1 实验原料和试剂第56-58页
            3.2.1.2 主要实验仪器第58页
        3.2.2 两亲性三嵌段共聚物的合成第58-59页
            3.2.2.1 两嵌段共聚物第58页
            3.2.2.2 两亲性三嵌段共聚物第58-59页
        3.2.3 聚合物表征第59页
        3.2.4 三嵌段共聚物的生物降解第59页
        3.2.5 临界胶束浓度第59页
        3.2.6 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物的准备和表征第59-60页
            3.2.6.1 MPs 制备第59-60页
            3.2.6.2 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物的制备第60页
            3.2.6.3 粒径分布和 zeta 电位第60页
            3.2.6.4 琼脂糖凝胶电泳第60页
            3.2.6.5 体外核酸释放第60页
            3.2.6.6 形貌第60页
        3.2.7 细胞转染和细胞毒性第60-61页
            3.2.7.1 细胞培养第60页
            3.2.7.2 体外转染试验第60-61页
            3.2.7.3 蛋白提取和 western blot 分析第61页
            3.2.7.4 体外细胞毒性第61页
        3.2.8 细胞划痕试验第61页
    3.3 结果与讨论第61-84页
        3.3.1 两亲性三嵌段共聚物的合成第61-66页
        3.3.2 共聚物表征第66-75页
            3.3.2.1 两亲性三嵌段共聚物的降解行为第66-67页
            3.3.2.2 三嵌段共聚物的 CMC 值第67-68页
            3.3.2.3 MPs 和 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物的形貌研究第68-73页
            3.3.2.4 琼脂糖凝胶电泳阻滞试验第73-74页
            3.3.2.5 体外释放试验第74-75页
        3.3.3 细胞转染和细胞毒性第75-81页
            3.3.3.1 细胞转染体外试验第75-79页
            3.3.3.2 细胞毒性体外试验第79-81页
        3.3.4 细胞迁移试验第81-84页
    3.4 本章小结第84-85页
第四章 靶向性 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物促进 HUVECs 增殖和迁移第85-117页
    4.1 引言第85-86页
    4.2 材料和方法第86-92页
        4.2.1 材料和仪器第86-88页
            4.2.1.1 主要原料和试剂第86-88页
            4.2.1.2 主要实验仪器第88页
        4.2.2 三嵌段共聚物合成第88-90页
            4.2.2.1 P(LA-co-GA)和 P(LA-co-GA-co-MMD)共聚物第88-89页
            4.2.2.2 三嵌段共聚物第89页
            4.2.2.3 三嵌段共聚物接枝 REDV 多肽第89-90页
        4.2.3 聚合物表征第90页
        4.2.4 接枝多肽表征第90页
        4.2.5 共聚物的降解行为第90页
        4.2.6 MPs/pPEGFP-ZNF580 复合物的制备和表征第90-91页
            4.2.6.1 MPs 制备第90页
            4.2.6.2 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物的制备第90页
            4.2.6.3 粒径分布及 zeta 电位第90页
            4.2.6.4 琼脂糖凝胶电泳阻滞试验第90-91页
            4.2.6.5 核酸体外释放第91页
            4.2.6.6 MPs 和 MPs/pEGFP-ZNF580 形貌第91页
        4.2.7 体外转染和细胞毒性第91页
            4.2.7.1 细胞培养第91页
            4.2.7.2 体外转染试验第91页
            4.2.7.3 蛋白提取及 western blot第91页
            4.2.7.4 体外细胞毒性第91页
        4.2.8 细胞划痕试验第91页
        4.2.9 Transwell 迁移试验第91-92页
        4.2.10 HUVECs 和 HUASMCs 共培养体系的免疫荧光染色第92页
    4.3 结果与讨论第92-116页
        4.3.1 两亲性三嵌段共聚物的合成第92-98页
        4.3.2 共聚物表征第98-106页
            4.3.2.1 两亲性三嵌段共聚物的体外降解第98-100页
            4.3.2.2 MPs 和 MPs/pEGFP-ZNF580 复合物的形貌第100-102页
            4.3.2.3 琼脂糖凝胶电泳阻滞试验第102-104页
            4.3.2.4 体外核酸释放试验第104-106页
        4.3.3 细胞转染和细胞毒性第106-110页
            4.3.3.1 体外细胞转染试验第106-108页
            4.3.3.2 蛋白提取及 western blot 分析第108-109页
            4.3.3.3 体外细胞毒性第109-110页
        4.3.4 细胞迁移试验第110-112页
        4.3.5 Transwell 迁移试验第112-113页
        4.3.6 HUVECs 和 HUASMCs 共培养第113-116页
    4.4 本章小结第116-117页
第五章 结论第117-118页
参考文献第118-136页
发表论文和参加科研情况说明第136-137页
致谢第137页

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