| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 英文缩略表 | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-31页 |
| 1.1 流感与流感病毒 | 第11-25页 |
| 1.1.1 流感病毒及其复制 | 第11-19页 |
| 1.1.2 宿主细胞对于流感病毒感染的应答反应 | 第19-21页 |
| 1.1.3 流感病毒的变异与进化 | 第21-22页 |
| 1.1.4 流感的流行与危害 | 第22-25页 |
| 1.2 流感病毒非编码区研究进展 | 第25-31页 |
| 1.2.1 流感病毒非编码区的序列特征 | 第25页 |
| 1.2.2 流感病毒非编码区内的病毒启动子 | 第25-27页 |
| 1.2.3 非编码区作为顺式作用元件调节病毒基因的表达 | 第27页 |
| 1.2.4 非编码区是病毒基因包装信号的重要组成部分 | 第27-28页 |
| 1.2.5 流感病毒非编码区与病毒宿主适应性 | 第28-29页 |
| 1.2.6 流感病毒非编码区的进化 | 第29页 |
| 1.2.7 总结与展望 | 第29-31页 |
| 第二章 A型流感病毒节段特异性非编码区调节病毒RNA合成与蛋白表达研究 | 第31-54页 |
| 2.1 引言 | 第31-32页 |
| 2.2 材料与方法 | 第32-39页 |
| 2.2.1 细胞、质粒和抗体 | 第32页 |
| 2.2.2 质粒构建 | 第32-34页 |
| 2.2.3 A型流感病毒非编码区序列的生物信息学分析 | 第34-35页 |
| 2.2.4 流感病毒小型复制子的构建 | 第35页 |
| 2.2.5 Primer extension和Western blot分析 | 第35-36页 |
| 2.2.6 间接免疫荧光 | 第36页 |
| 2.2.7 病毒拯救 | 第36-37页 |
| 2.2.8 病毒生长曲线测定 | 第37页 |
| 2.2.9 噬斑技术测定流感病毒滴度 | 第37-38页 |
| 2.2.10 荧光素酶报告基因检测INF-β启动子活性 | 第38-39页 |
| 2.3 结果 | 第39-51页 |
| 2.3.1 A型流感病毒非编码区序列特征的生物信息学分析 | 第39-40页 |
| 2.3.2 流感病毒能够在转录和翻译水平介导基因的差异性表达 | 第40-42页 |
| 2.3.3 PB1基因高度保守的非优势Kozak序列介导基因的低水平表达 | 第42-45页 |
| 2.3.4 优化PB1基因Kozak序列使病毒致弱 | 第45-46页 |
| 2.3.5 WSN-PB1(-3A)与WSN-WT在感染过程中蛋白表达差异 | 第46-48页 |
| 2.3.6 PB1的过表达导致病毒感染过程中RNA合成动力学的改变 | 第48-49页 |
| 2.3.7 WSN-PB1(-3A)诱导宿主细胞产生较多的IFN-β | 第49-51页 |
| 2.4 讨论 | 第51-54页 |
| 第三章 A型流感病毒RNA节段特异性非编码区内毗邻启动子保守碱基功能研究 | 第54-71页 |
| 3.1 引言 | 第54-55页 |
| 3.2 材料与方法 | 第55-57页 |
| 3.2.1 细胞、质粒和抗体 | 第55页 |
| 3.2.2 质粒构建 | 第55-56页 |
| 3.2.3 A型流感病毒各亚型HA和NA基因非编码区序列的生物信息学分析 | 第56页 |
| 3.2.4 流感病毒小型复制子的构建 | 第56页 |
| 3.2.5 Primer extension和Western blot分析 | 第56页 |
| 3.2.6 病毒的拯救 | 第56页 |
| 3.2.7 病毒生长曲线测定 | 第56-57页 |
| 3.3 结果 | 第57-68页 |
| 3.3.1 A型流感病毒基因组RNA 3’端13-14位碱基与5’端14’-16’位碱基高度保守 | 第57-62页 |
| 3.3.2 HA基因3’端13位与5’端14’位碱基的突变分析 | 第62-64页 |
| 3.3.3 HA基因3’端14位与5’端1 5’位碱基的突变分析 | 第64-65页 |
| 3.3.4 HA基因3’端15位与5’端16’位碱基的突变分析 | 第65-66页 |
| 3.3.5 HA基因3’端13-15位与5’端14’-16’位保守碱基突变对病毒复制的影响 | 第66-68页 |
| 3.4 讨论 | 第68-71页 |
| 第四章 全文总结 | 第71-73页 |
| 4.1 全文结论 | 第71页 |
| 4.2 研究中的不足和有待进一步解决的问题 | 第71-72页 |
| 4.3 前景与展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
