| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-15页 |
| 1.1 蓝细菌 | 第9-10页 |
| 1.1.1 集胞藻PCC 6803概述 | 第9页 |
| 1.1.2 以蓝细菌进行抗逆研究的优势 | 第9-10页 |
| 1.2 生物燃料乙醇生产现状 | 第10-12页 |
| 1.2.1 生物燃料乙醇使用现状及存在问题 | 第10-11页 |
| 1.2.2 利用工程改造菌株生产乙醇的现状 | 第11-12页 |
| 1.3 蓝细菌乙醇耐受性的研究 | 第12-13页 |
| 1.3.1 蓝细菌对乙醇的耐受性 | 第12页 |
| 1.3.2 全转录工程法提高菌株乙醇耐受性 | 第12-13页 |
| 1.4 本研究的主要内容 | 第13-15页 |
| 第二章 集胞藻基因敲除突变株的构建及胁迫耐受性分析 | 第15-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第15页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第15-17页 |
| 2.1.3 实验器材 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-24页 |
| 2.2.1 基因敲除突变株的构建 | 第17-23页 |
| 2.2.2 胁迫条件下的耐受性分析 | 第23-24页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第24-29页 |
| 2.3.1 基因同源臂片段及氯霉素抗性基因片段的获得 | 第24页 |
| 2.3.2 融合PCR扩增结果 | 第24-26页 |
| 2.3.3 Colony PCR验证结果 | 第26-27页 |
| 2.3.4 胁迫条件下的生长分析 | 第27-29页 |
| 2.4 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 蛋白质组学技术综合分析乙醇胁迫下集胞藻中Sll0794的调控作用 | 第30-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 实验试剂及耗材 | 第30页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第30-31页 |
| 3.2 实验方法 | 第31-34页 |
| 3.2.1 集胞藻的培养及菌体收集 | 第31-32页 |
| 3.2.2 蛋白质样品的制备和酶解 | 第32页 |
| 3.2.3 iTRAQ标记 | 第32-33页 |
| 3.2.4 LC-MS/MS蛋白质组学分析 | 第33页 |
| 3.2.5 蛋白质组学数据分析 | 第33-34页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第34-37页 |
| 3.3.1 蛋白质组学分析结果概览 | 第34-35页 |
| 3.3.2 Sll0794介导的乙醇耐受调控网络 | 第35-37页 |
| 3.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 第四章 集胞藻中转录调控蛋白Sll0794调控靶点的鉴定 | 第38-59页 |
| 4.1 实验材料 | 第38-40页 |
| 4.1.1 培养基及所用菌株 | 第38页 |
| 4.1.2 实验试剂及耗材 | 第38-39页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第39-40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-52页 |
| 4.2.1 His_6-Sll0794蛋白的过量表达及纯化 | 第40-49页 |
| 4.2.2 His_6-Sll0794蛋白与探针的体外结合实验 | 第49-50页 |
| 4.2.3 启动子分析及motif的鉴定 | 第50-52页 |
| 4.3 实验结果与讨论 | 第52-58页 |
| 4.3.1 PCR扩增获得插入片段 | 第52页 |
| 4.3.2 重组载体的验证 | 第52-53页 |
| 4.3.3 His_6-Sll0794蛋白诱导结果分析 | 第53-54页 |
| 4.3.4 PCR扩增制备荧光探针 | 第54-55页 |
| 4.3.5 凝胶阻滞实验结果与分析 | 第55-57页 |
| 4.3.6 Motif预测结果 | 第57-58页 |
| 4.4 本章小结 | 第58-59页 |
| 第五章 结论与展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-67页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附录 | 第69-75页 |
