| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第1章 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 新城疫概述 | 第13-16页 |
| 1.1.1 新城疫病毒 | 第13-14页 |
| 1.1.2 新城疫的流行特点与防控措施 | 第14-15页 |
| 1.1.3 新城疫疫苗研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2 基因递送载体 | 第16-19页 |
| 1.2.1 病毒基因递送载体 | 第16-17页 |
| 1.2.2 非病毒基因递送载体 | 第17-19页 |
| 1.3 黏膜免疫 | 第19-22页 |
| 1.3.1 黏膜免疫的机理和意义 | 第20-21页 |
| 1.3.2 黏膜免疫的功能 | 第21页 |
| 1.3.3 疫苗黏膜免疫途径 | 第21页 |
| 1.3.4 疫苗黏膜免疫递送系统的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.4 本试验研究的目的意义及主要内容 | 第22-25页 |
| 1.4.1 目的意义 | 第22-23页 |
| 1.4.2 本试验研究的的主要内容 | 第23-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-43页 |
| 2.1 试验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 质粒、细胞、细菌与毒株 | 第25页 |
| 2.1.2 试验动物 | 第25页 |
| 2.1.3 生化与分子生物学试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.1.5 常用溶液的配制 | 第27-28页 |
| 2.2 LDH@SiO_2壳-核纳米复合材料的制备 | 第28-29页 |
| 2.2.1 LDH制备 | 第28-29页 |
| 2.2.2 SiO_2制备 | 第29页 |
| 2.2.3 LDH@SiO_2壳-核纳米复合材料的制备 | 第29页 |
| 2.3 LDH@SiO_2壳-核纳米复合材料的表征 | 第29-30页 |
| 2.3.1 形态、粒径和Zeta电位测定 | 第29-30页 |
| 2.3.2 FTIR测试 | 第30页 |
| 2.3.3 XRD测试 | 第30页 |
| 2.4 抑菌试验 | 第30-31页 |
| 2.4.1 体外抑菌试验 | 第30页 |
| 2.4.2 最低抑菌浓度(MIC)的测定 | 第30-31页 |
| 2.5 新城疫DNA疫苗LDH@SiO_2壳-核纳米粒的制备 | 第31-36页 |
| 2.5.1 构建真核表达载体pVAX1-F(o) | 第31-32页 |
| 2.5.2 新城疫DNA疫苗的大量制备与纯化 | 第32-34页 |
| 2.5.3 新城疫DNA疫苗LDH@SiO_2纳米粒(pFDNA-LDH@SiO_2-NPs)的制备 | 第34-36页 |
| 2.6 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs的表征 | 第36页 |
| 2.6.1 形态、粒径和Zeta电位 | 第36页 |
| 2.6.2 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs包封率和载药量的测定 | 第36页 |
| 2.7 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs体外释放特性 | 第36页 |
| 2.8 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs贮藏稳定性测试 | 第36-37页 |
| 2.8.1 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs对不同pH和离子浓度稳定性的测试 | 第36-37页 |
| 2.8.2 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs对不同温度稳定性的测试 | 第37页 |
| 2.9 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs体外表达检测 | 第37-38页 |
| 2.9.1 细胞转染试验 | 第37页 |
| 2.9.2 间接免疫荧光法检测转染细胞中F蛋白的表达 | 第37-38页 |
| 2.10 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs安全性评价 | 第38-39页 |
| 2.10.1 细胞毒性检测 | 第38-39页 |
| 2.10.2 安全检验 | 第39页 |
| 2.11 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs免疫效果评价 | 第39-43页 |
| 2.11.1 SPF鸡免疫 | 第39-40页 |
| 2.11.2 免疫鸡血清IgG抗体检测 | 第40页 |
| 2.11.3 免疫鸡黏膜提取液中IgA抗体检测 | 第40-41页 |
| 2.11.4 免疫鸡脾淋巴细胞增殖试验 | 第41页 |
| 2.11.5 鸡γ干扰素(IFN-γ)检测 | 第41-42页 |
| 2.11.6 鸡白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)检测 | 第42页 |
| 2.11.7 攻毒试验 | 第42页 |
| 2.11.8 统计学分析 | 第42-43页 |
| 第3章 结果 | 第43-83页 |
| 3.1 LDH@SiO_2壳-核纳米复合材料的表征 | 第43-47页 |
| 3.1.1 形态、粒径分布和Zeta电位 | 第43-46页 |
| 3.1.2 FTIR检测 | 第46页 |
| 3.1.3 XRD测试 | 第46-47页 |
| 3.2 抑菌试验 | 第47-49页 |
| 3.3 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs制备 | 第49-60页 |
| 3.3.1 质粒pVAX1-F(o)的鉴定 | 第49-50页 |
| 3.3.2 氨基化SiO_2与质粒DNA的结合及抗DNase Ⅰ降解试验分析 | 第50-52页 |
| 3.3.3 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs制备工艺的优化 | 第52-60页 |
| 3.4 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs的表征 | 第60-62页 |
| 3.4.1 形态、粒径和Zeta电位 | 第60-62页 |
| 3.4.2 包封率、载药量的测定 | 第62页 |
| 3.5 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs体外释放特性 | 第62页 |
| 3.6 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs贮藏稳定性测试 | 第62-65页 |
| 3.6.1 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs对不同pH和离子浓度稳定性测试 | 第62-63页 |
| 3.6.2 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs对不同温度稳定性测试 | 第63-65页 |
| 3.7 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs体外表达 | 第65-66页 |
| 3.8 安全性评价 | 第66-67页 |
| 3.8.1 细胞毒性检测 | 第66页 |
| 3.8.2 安全检验 | 第66-67页 |
| 3.9 pFDNA-LDH@SiO_2-NPs免疫效果评价 | 第67-83页 |
| 3.9.1 免疫鸡血清IgG抗体检测 | 第67-69页 |
| 3.9.2 免疫鸡黏膜提取液IgA抗体检测 | 第69-72页 |
| 3.9.3 免疫鸡淋巴细胞增殖试验 | 第72-74页 |
| 3.9.4 鸡γ干扰素(IFN-γ)检测 | 第74-75页 |
| 3.9.5 鸡白介素2(IL-2)检测 | 第75-76页 |
| 3.9.6 鸡白介素4(IL-4)检测 | 第76-77页 |
| 3.9.7 攻毒试验 | 第77-83页 |
| 第4章 讨论 | 第83-89页 |
| 第5章 结论 | 第89-91页 |
| 本论文的主要创新点 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-101页 |
| 致谢 | 第101-102页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第102-103页 |
| 攻读硕士学位期间参与研究课题情况 | 第103-104页 |
