| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 研究背景及文献综述 | 第12-22页 |
| 第一节 mTOR复合体 | 第12-17页 |
| 1. mTOR信号通路概述 | 第12-13页 |
| 2 mTOR复合体的结构组成 | 第13-16页 |
| 3. mTORC1的激活过程 | 第16-17页 |
| 第二节 小G蛋白Rheb的功能 | 第17-19页 |
| 第三节 泛素化的背景 | 第19-21页 |
| 1. 蛋白的泛素化 | 第19-20页 |
| 2. 泛素化参与的细胞信号转导通路 | 第20页 |
| 3. 小G蛋白泛素化对其活性的调控 | 第20-21页 |
| 第四节 泛素连接酶RNF152 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-40页 |
| 第一节 实验材料 | 第22-28页 |
| 1. 细胞株 | 第22页 |
| 2. 质粒 | 第22页 |
| 3. 主要试剂 | 第22-25页 |
| 4. 主要抗体 | 第25页 |
| 5 siRNA序列和RT-PCR引物 | 第25-26页 |
| 6. 实验耗材 | 第26页 |
| 7. 实验仪器和设备 | 第26-28页 |
| 第二节 实验方法 | 第28-40页 |
| 1. 实验所需质粒的构建 | 第28-31页 |
| 2. 细胞株的培养、传代及铺板 | 第31-32页 |
| 3. 细胞转染 | 第32-33页 |
| 4. 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第33-36页 |
| 6. RT-PCR | 第36-37页 |
| 7. 体内泛素化实验 | 第37-40页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第40-53页 |
| 第一节 RNF152与癌症的关系及其在细胞中定位 | 第40-42页 |
| 第二节 RNF152抑制mTORC1复合体的活性 | 第42-47页 |
| 1. 外源过表达RNF152抑制mTORC1的活性 | 第42页 |
| 2. 信号刺激下的RNF152也能抑制mTORC1的活性 | 第42-44页 |
| 3. RNF152能抑制PI3K-AKT/RAS-ERK信号通路对mTORC1的激活 | 第44页 |
| 4. 干扰掉内源的RNF152检测mTORCl的活性 | 第44-47页 |
| 第三节 RNF152促进小G蛋白Rheb的泛素化 | 第47-53页 |
| 1. RNF152能促进小G蛋白Rheb的泛素化但并不促进它降解 | 第47-48页 |
| 2. RNF152能抑制小G蛋白Rheb所促进的S6K的磷酸化 | 第48页 |
| 3. 小G蛋白Rheb泛素化位点的确定 | 第48-50页 |
| 4. RNF152促进小G蛋白Rheb泛素化与其活性的关系 | 第50-52页 |
| 5. RNF152促进小G蛋白Rheb泛素化不完全依赖其RING结构域 | 第52-53页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第53-56页 |
| 附录Ⅰ | 第56-62页 |
| 附录Ⅱ 科研成果 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
