| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4-5页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-24页 |
| 1.1 木质纤维素及其利用 | 第9-10页 |
| 1.2 微生物木糖利用的研究现状 | 第10-15页 |
| 1.2.1 微生物利用木糖的途径 | 第10-12页 |
| 1.2.2 木糖代谢工程菌的构建 | 第12-15页 |
| 1.2.2.1 异源木糖利用基因的表达 | 第12-13页 |
| 1.2.2.2 木糖运输途径的改造 | 第13-14页 |
| 1.2.2.3 磷酸戊糖途径的改造 | 第14-15页 |
| 1.3 谷氨酸棒杆菌的木糖代谢研究 | 第15-17页 |
| 1.3.1 谷氨酸棒杆菌木糖利用的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3.2 谷氨酸棒杆菌发酵木糖产生物基产品 | 第16-17页 |
| 1.4 琥珀酸的代谢研究 | 第17-21页 |
| 1.4.1 琥珀酸的理化性质、功能和市场需求 | 第17-18页 |
| 1.4.2 琥珀酸的生物合成 | 第18-21页 |
| 1.4.2.1 琥珀酸生物合成的最大理论得率 | 第18-19页 |
| 1.4.2.2 谷氨酸棒杆菌发酵生产琥珀酸 | 第19-20页 |
| 1.4.2.3 底物的扩展利用 | 第20-21页 |
| 1.5 选题背景及研究思路 | 第21-24页 |
| 1.5.1 选题背景 | 第21-22页 |
| 1.5.2 研究内容与技术路线图 | 第22-24页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第24-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-33页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第24-27页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第27-29页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第29-30页 |
| 2.1.4 主要溶液的配置 | 第30-31页 |
| 2.1.5 所用主要培养基的组分及配制 | 第31-33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-44页 |
| 2.2.1 设计引物 | 第33页 |
| 2.2.2 PCR 反应 | 第33-34页 |
| 2.2.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第34-35页 |
| 2.2.4 DNA 片段的回收和纯化（PCR 产物回收和切胶回收） | 第35-36页 |
| 2.2.5 酶切体系 | 第36页 |
| 2.2.6 连接体系 | 第36-37页 |
| 2.2.7 大肠杆菌质粒 DNA 的提取（碱法） | 第37页 |
| 2.2.8 大肠杆菌基因组的提取 | 第37-38页 |
| 2.2.9 谷氨酸棒杆菌质粒 DNA 的提取 | 第38页 |
| 2.2.10 谷氨酸棒杆菌基因组 DNA 的提取 | 第38页 |
| 2.2.11 大肠杆菌化学转化感受态细胞的制备（CaCl2法） | 第38-39页 |
| 2.2.12 大肠杆菌感受态细胞的化学转化 | 第39页 |
| 2.2.13 谷氨酸棒杆菌电转化感受态细胞的制备 | 第39-40页 |
| 2.2.14 谷氨酸棒杆菌感受态细胞的电转化 | 第40页 |
| 2.2.15 蛋白质含量的测定及蛋白质电泳 | 第40-42页 |
| 2.2.16 谷氨酸棒杆菌的发酵培养 | 第42-43页 |
| 2.2.17 谷氨酸棒杆菌发酵产物和戊糖的测定 | 第43-44页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第44-75页 |
| 3.1 木糖利用基因的选择 | 第45-53页 |
| 3.1.1 木糖利用基因的筛选 | 第45-46页 |
| 3.1.2 木糖利用载体的构建 | 第46-50页 |
| 3.1.3 木糖利用情况表征 | 第50-53页 |
| 3.1.3.1 不同来源木糖利用途径基因表达对谷氨酸棒杆菌生长的影响 | 第50-51页 |
| 3.1.3.2 蛋白质电泳 | 第51-53页 |
| 3.2 非氧化磷酸戊糖途径代谢工程对木糖利用的影响 | 第53-60页 |
| 3.2.1 sod 强启动子调控 tal 基因表达 | 第53-57页 |
| 3.2.2 sod 强启动子调控 tkt 基因表达 | 第57-59页 |
| 3.2.3 发酵验证 | 第59-60页 |
| 3.3 谷氨酸棒杆菌戊糖运输途径的改造 | 第60-63页 |
| 3.3.1 阿拉伯糖运输基因整合载体的构建 | 第60-63页 |
| 3.3.2 阿拉伯糖运输基因的整合 | 第63页 |
| 3.4 混糖载体的构建 | 第63-65页 |
| 3.5 高效利用戊糖发酵生产琥珀酸 | 第65-75页 |
| 3.5.1 厌氧发酵工程菌株的构建 | 第66-67页 |
| 3.5.2 非氧化磷酸戊糖途径对发酵木糖产琥珀酸的影响 | 第67-68页 |
| 3.5.3 戊糖运输蛋白的过表达对发酵木糖产琥珀酸的影响 | 第68-70页 |
| 3.5.4 高浓度木糖发酵产琥珀酸 | 第70-71页 |
| 3.5.5 葡萄糖和木糖共发酵生产琥珀酸 | 第71-72页 |
| 3.5.6 葡萄糖、木糖和阿拉伯糖共发酵生产琥珀酸 | 第72-75页 |
| 第四章 结论与展望 | 第75-77页 |
| 4.1 结论 | 第75-76页 |
| 4.2 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-84页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
