| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1.1 油菜的研究概况 | 第12-15页 |
| 1.1.1 甘蓝型油菜的研究背景 | 第12-13页 |
| 1.1.2 甘蓝型油菜的起源及重复基因的形成 | 第13-15页 |
| 1.2 植物中 TAG 及其合成机理 | 第15-19页 |
| 1.2.1 三酰甘油（TAG）的合成 | 第16-19页 |
| 1.2.2 TAG 的积累 | 第19页 |
| 1.3 植物 DGAT1 的研究进展 | 第19-22页 |
| 1.3.1 DGAT 的发现及种类 | 第19-20页 |
| 1.3.2 油菜 DGAT1 基因的研究进展 | 第20页 |
| 1.3.3 植物 DGAT1 底物的特异性 | 第20-21页 |
| 1.3.4 植物 DGAT1 基因的表达 | 第21页 |
| 1.3.5 DGAT1 对种子幼苗发育的影响 | 第21-22页 |
| 1.4 论文的主要内容 | 第22-24页 |
| 第二章 甘蓝型油菜 DGAT1 重复基因的克隆与表达分析 | 第24-50页 |
| 2.1 材料与设备 | 第24-25页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.2 试剂及仪器 | 第25页 |
| 2.2 试验方法 | 第25-33页 |
| 2.2.1 总 RNA 的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.2 cDNA 第一链的合成及检测 | 第26-27页 |
| 2.2.3 PCR 引物的设计与合成 | 第27页 |
| 2.2.4 甘蓝型油菜 DGAT1 全长基因的克隆 | 第27-28页 |
| 2.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第28页 |
| 2.2.6 PCR 产物的回收 | 第28-29页 |
| 2.2.7 含有目的片段的 T-A 克隆及转化 | 第29-32页 |
| 2.2.8 质粒的提取 | 第32页 |
| 2.2.9 生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 2.2.10 半定量 RT-PCR 分析 | 第33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-48页 |
| 2.3.1 甘蓝型油菜 DGAT1 序列的查找 | 第33-35页 |
| 2.3.2 甘蓝型油菜总 RNA 的提取 | 第35页 |
| 2.3.3 甘蓝型油菜 DGAT1 重复基因全长 cDNA 的克隆 | 第35-36页 |
| 2.3.4 甘蓝型油菜 DGAT1 重复基因阳性克隆的鉴定 | 第36-37页 |
| 2.3.5 甘蓝型油菜 DGAT1 基因的分析 | 第37-44页 |
| 2.3.6 甘蓝型油菜 DGAT1 基因的生物信息学分析 | 第44-48页 |
| 2.3.7 含油量不同各种甘蓝型油菜种子中 DGAT1 的表达分析 | 第48页 |
| 2.4 小结 | 第48-50页 |
| 第三章 拟南芥过表达载体的构建 | 第50-61页 |
| 3.1 材料与设备 | 第50-51页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第50页 |
| 3.1.2 试剂及仪器 | 第50-51页 |
| 3.2 实验方法 | 第51-57页 |
| 3.2.1 植物过表达载体的构建 | 第51-54页 |
| 3.2.2 根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备 | 第54页 |
| 3.2.3 根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的转化 | 第54-55页 |
| 3.2.4 根癌农杆菌 GV3101 转化后的表达载体单克隆的筛选 | 第55-56页 |
| 3.2.5 拟南芥的种植 | 第56页 |
| 3.2.6 拟南芥 AS11 突变体纯合体的鉴定 | 第56-57页 |
| 3.3 实验结果 | 第57-60页 |
| 3.3.1 过表达载体的大肠杆菌 DH5α菌液 PCR 结果 | 第57-58页 |
| 3.3.2 过表达载体的大肠杆菌 DH5α质粒酶切分析结果 | 第58-59页 |
| 3.3.3 过表达载体的农杆菌 GV3101 转化后的菌体 PCR 结果 | 第59页 |
| 3.3.4 突变体 AS11 的 PCR 鉴定结果 | 第59-60页 |
| 3.4 小结 | 第60-61页 |
| 第四章 拟南芥转化及含油量与脂肪酸组成分析 | 第61-69页 |
| 4.1 材料与设备 | 第61页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第61页 |
| 4.1.2 试剂及仪器 | 第61页 |
| 4.2 实验方法 | 第61-64页 |
| 4.2.1 农杆菌介导浸花法的转化拟南芥（Clough and Bent，1998） | 第61-62页 |
| 4.2.2 拟南芥转化苗的筛选 | 第62页 |
| 4.2.3 转基因拟南芥植株的 PCR 检测 | 第62-63页 |
| 4.2.4 转基因植株种子的含油量与脂肪酸分析 | 第63-64页 |
| 4.3 实验结果 | 第64-68页 |
| 4.3.1 转基因拟南芥后代的鉴定 | 第64-65页 |
| 4.3.2 转基因拟南芥 T2代种子含油量与脂肪酸分析 | 第65-68页 |
| 4.4 小结 | 第68-69页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第69-72页 |
| 5.1 结论 | 第69页 |
| 5.2 讨论 | 第69-71页 |
| 5.3 展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简介 | 第79页 |
