中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
前言 | 第14-16页 |
第一部分 MiR-330-3p在ccRCC中差异表达及临床相关性分析 | 第16-25页 |
材料方法 | 第16-19页 |
1.材料 | 第16-17页 |
1.1 ccRCC样本的收集 | 第16页 |
1.2 主要仪器与试剂 | 第16-17页 |
1.3 引物设计 | 第17页 |
2.方法 | 第17-19页 |
2.1 ccRCC组织样本中总RNA的提取 | 第17-18页 |
2.2 RT-PCR | 第18页 |
2.3 实时荧光定量PCR反应 | 第18-19页 |
2.4 统计学分析 | 第19页 |
结果 | 第19-21页 |
1.miR-330-3p在ccRCC癌组织中高表达 | 第19页 |
2.miR-330-3p表达水平与Fuhrman分级相关 | 第19-21页 |
讨论 | 第21-22页 |
小结 | 第22-23页 |
参考文献 | 第23-25页 |
第二部分 MiR-330-3p低/过表达对786-O/ACHN恶性行为影响 | 第25-42页 |
材料方法 | 第25-31页 |
1.材料 | 第25-26页 |
1.1 细胞株 | 第25页 |
1.2 主要试剂及仪器 | 第25-26页 |
1.3 主要溶剂配制 | 第26页 |
2.方法 | 第26-31页 |
2.1 细胞中瞬时转染miR-330-3pmimic/inhibitor | 第26-28页 |
2.2 miR-330-3p 表达水平对 786-O 细胞增殖的影响 | 第28页 |
2.3 miR-330-3p 表达水平对 786-O 细胞迁移能力影响 | 第28-29页 |
2.4 miR-330-3p水平变化对 786-O 细胞侵袭能力影响 | 第29页 |
2.5 miR-330-3p水平变化对 786-O 迁袭和运动能力的影响 | 第29-30页 |
2.6 miR-330-3p水平变化对 ACHN 细胞增殖的影响 | 第30页 |
2.7 miR-330-3p水平变化对 ACHN 迁移能力影响 | 第30-31页 |
2.8 miR-330-3p水平变化对 ACHN 侵袭能力影响 | 第31页 |
2.9 miR-330-3p水平变化对 ACHN 迁袭和运动能力影响 | 第31页 |
结果 | 第31-39页 |
1.瞬时转染法在 786-O 和 ACHN 中高/低表达 miR-330-3p | 第31-32页 |
2.miR-330-3p过表达促进786-O、ACHN体外增殖能力,低表达抑制786-O、ACHN体外增殖能力 | 第32-33页 |
3.miR-330-3p过表达促进786-O、ACHN体外迁移能力,低表达抑制786-O、ACHN体外迁移能力 | 第33-35页 |
4.miR-330-3p过表达促进786-O、ACHN体外侵袭能力,低表达抑制786-O、ACHN体外侵袭能力 | 第35-37页 |
5.miR-330-3p过表达促进786-O、ACHN体外运动能力,低表达抑制786-O、ACHN体外运动能力 | 第37-39页 |
讨论 | 第39-40页 |
小结 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-42页 |
第三部分 MiR-330-3p影响ccRCC细胞恶性行为的分子机制研究 | 第42-51页 |
材料与方法 | 第42-44页 |
1.材料 | 第42-43页 |
1.1 细胞株 | 第42页 |
1.2 主要试剂及仪器 | 第42-43页 |
2.方法 | 第43-44页 |
2.1 在786-O细胞中高/低表达miR-330-3p | 第43页 |
2.2 Westernblot法检测miR-330-3p水平变化对786-O细胞中p-Akt、p-Mek、MMP2、P53蛋白表达水平影响 | 第43-44页 |
2.3 Westernblot法检测ccRCC组织样本中的p-Akt、p-Mek、MMP2、P53蛋白表达水平 | 第44页 |
2.4 统计学分析 | 第44页 |
结果 | 第44-47页 |
1.786 -O细胞中miR-330-3p表达水平变化与p-Akt、p-Mek、MMP2正相关,与P53表达水平负相关 | 第44-45页 |
2.ccRCC患者组织样本中 p-Akt、P53 、p-Mek、MMP2 的表达水平 | 第45-47页 |
讨论 | 第47-48页 |
小结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-51页 |
综述 | 第51-63页 |
参考文献 | 第60-63页 |
致谢 | 第63-64页 |