| 摘要 | 第9-13页 |
| Abstract | 第13-17页 |
| 前言 | 第18-21页 |
| 第一部分 ANXA5高表达通过激活MEK/ERK、DOCK180/CRK1/II/RAC1促进肝癌临床进展 | 第21-55页 |
| 材料和方法 | 第21-32页 |
| 一.材料 | 第21-23页 |
| 1.动物,细胞系和肝癌临床样本 | 第21页 |
| 2.主要仪器及试剂 | 第21-23页 |
| 二.方法 | 第23-32页 |
| 1.细胞复苏与培养 | 第23页 |
| 2.免疫组化法检测肝癌组织芯片中ANXA5,CRKI/II,RAC1的表达 | 第23-24页 |
| 3.建立ANXA5表达稳定下调Hca-P细胞株 | 第24-28页 |
| 4.功能实验 | 第28-30页 |
| 5.ANXA5低表达对Hca-P体内成瘤和淋巴道转移潜能的影响 | 第30-32页 |
| 6.ANXA5低表达对Hca-P细胞CRK/DOCK180/RAC1和pMEK-ERK分子蛋白表达的影响 | 第32页 |
| 7.qRT-PCR法检测ANXA5下调对VEMENTIN和MMP9的影响 | 第32页 |
| 8.统计学分析 | 第32页 |
| 结果 | 第32-46页 |
| 1.ANXA5,CRKI/II,RAC1高表达促进肝癌临床进展,三者表达水平正相关 | 第32-35页 |
| 2.构建ANXA5表达稳定下调Hca-P单克隆细胞株 | 第35-36页 |
| 3.ANXA5低表达降低Hca-P细胞体外增殖能力 | 第36-37页 |
| 4.ANXA5低表达减弱Hca-P细胞体外转移能力 | 第37-39页 |
| 5.ANXA5低表达降低Hca-P细胞体内成瘤和淋巴道转移能力 | 第39-43页 |
| 6.ANXA5低表达降低CRK/DOCK180/RAC1和pMEK-ERK分子蛋白水平 | 第43-46页 |
| 讨论 | 第46-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 第二部分 ANXA5与MYH9直接相互作用通过ERK/RAC1促进肾透明细胞癌发生发展 | 第55-101页 |
| 材料和方法 | 第55-68页 |
| 一.材料 | 第55-57页 |
| 1.动物、细胞系、菌种和肾癌临床样本 | 第55页 |
| 2.主要仪器及试剂 | 第55-57页 |
| 二.方法 | 第57-68页 |
| 1.细胞复苏与培养 | 第57页 |
| 2.WB检测ccRCC临床样本ANXA5、MYH9、RAC1表达 | 第57-58页 |
| 3.构建ANXA5稳定低表达786-O和ACHN单克隆细胞株 | 第58-59页 |
| 4.获得ANXA5高表达786-O和ACHN细胞株 | 第59-64页 |
| 5.功能实验 | 第64-65页 |
| 6.ANXA5和MYH9直接相互作用研究 | 第65-67页 |
| 7.ANXA5和MYH9直接相互作用影响ccRCC细胞恶性表型的功能实验 | 第67页 |
| 9.ANXA5低表达对ACHN细胞体内成瘤和淋巴道转移潜能的影响 | 第67页 |
| 10.统计学分析 | 第67-68页 |
| 结果 | 第68-90页 |
| 1.ANXA5和RAC1在ccRCC患者肿瘤组织中高表达正相关 | 第68-70页 |
| 2.ANXA5对786-O和ACHN细胞生物学行为的影响 | 第70-76页 |
| 3.ANXA5与MYH9直接相互作用研究 | 第76-78页 |
| 4.MYH9促进ccRCC临床进展及作用机制研究 | 第78-82页 |
| 5.MYH9低表达后与其直接结合的ANXA5减少 | 第82-83页 |
| 6.ANXA5-MYH9直接作用影响肾癌细胞增殖和转移能力 | 第83-86页 |
| 7.ANXA5可调控p-AKT、p-ERK1/2、RAC1等分子的蛋白表达 | 第86-87页 |
| 8.ANXA5低表达降低ACHN细胞体内肿瘤形成能力及淋巴结转移潜能 | 第87-90页 |
| 讨论 | 第90-96页 |
| 结论 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-101页 |
| 综述 | 第101-113页 |
| 参考文献 | 第108-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
