| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 呼吸道病毒感染肺泡Ⅱ型上皮细胞研究进展 | 第12-17页 |
| 1.1 肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、纯化与鉴定研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 AECⅡ形态特征 | 第12页 |
| 1.1.2 AECⅡ分离与纯化 | 第12-13页 |
| 1.1.3 AECⅡ鉴定 | 第13-14页 |
| 1.2 呼吸道病毒感染肺泡Ⅱ型上皮细胞研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 研究目的及意义 | 第15-17页 |
| 第二章 猪肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离与纯化 | 第17-27页 |
| 2.1 材料与方法 | 第17-19页 |
| 2.1.1 样品来源 | 第17页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要试剂与耗材 | 第18页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第18-19页 |
| 2.2 方法 | 第19-22页 |
| 2.2.1 PAECⅡ的分离 | 第19页 |
| 2.2.2 PAM 分离 | 第19页 |
| 2.2.3 多聚赖氨酸包被六孔板 | 第19-20页 |
| 2.2.4 PAECⅡ纯化 | 第20页 |
| 2.2.5 细胞计数与活性测定 | 第20页 |
| 2.2.6 PAECⅡ的鉴定 | 第20-22页 |
| 2.3 结果 | 第22-25页 |
| 2.3.1 原代培养 PAECⅡ型细胞观察 | 第22页 |
| 2.3.2 PAECⅡ型细胞培养活力及碱性磷酸酶染色结果 | 第22页 |
| 2.3.3 PAECⅡ纯化前后细胞观察对比 | 第22-23页 |
| 2.3.4 PAECⅡ原代培养透射电镜观察 | 第23-25页 |
| 2.4 讨论 | 第25-26页 |
| 2.5 小结 | 第26-27页 |
| 第三章 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪肺泡Ⅱ型上皮细胞 | 第27-38页 |
| 3.1 材料 | 第27-28页 |
| 3.1.1 细胞和病毒 | 第27-28页 |
| 3.1.2 主要仪器与设备 | 第28页 |
| 3.1.3 主要试剂和耗材 | 第28页 |
| 3.1.4 配置试剂 | 第28页 |
| 3.2 方法 | 第28-32页 |
| 3.2.1 猪肺泡巨噬细胞扩增 HuN4 株 HPPRRSV | 第28-29页 |
| 3.2.2 PRRSV HuN4 株病毒液 TCID50的测定 | 第29页 |
| 3.2.3 HuN 株 HPPRRSV 感染猪肺泡Ⅱ上皮细胞 | 第29页 |
| 3.2.4 PRRSV 感染 PAECⅡ后间接免疫荧光检测 | 第29页 |
| 3.2.5 感染细胞总 RNA 提取 | 第29-30页 |
| 3.2.6 RT-PCR 法得到细胞总 cDNA | 第30页 |
| 3.2.7 特异性 PCR 扩增目的片段 HP-PRRSV | 第30-31页 |
| 3.2.8 检测细胞 CD163 受体 | 第31页 |
| 3.2.9 检测细胞波形蛋白受体 | 第31-32页 |
| 3.3 结果 | 第32-36页 |
| 3.3.1 HuN4 株 PRRSV 病毒的扩增 | 第32页 |
| 3.3.2 PRRS 病毒滴度的确定 | 第32页 |
| 3.3.3 PRRSV 感染 PAECⅡ后细胞形态特征的变化 | 第32-33页 |
| 3.3.4 PRRSV 感染 PAECⅡ后间接免疫荧光结果 | 第33页 |
| 3.3.5 PRRSV 感染 PAECⅡ后总 RNA 提取 | 第33-34页 |
| 3.3.6 PRRSV 感染 PAECⅡ后 PCR 结果鉴定结果 | 第34-35页 |
| 3.3.7 PRRSV 感染 PAECⅡ后 CD163 基因 PCR 鉴定结果 | 第35页 |
| 3.3.8 PRRSV 感染 PAECⅡ后 Vimentin 基因 PCR 鉴定结果 | 第35-36页 |
| 3.4 讨论 | 第36-37页 |
| 3.5 小结 | 第37-38页 |
| 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-45页 |
| 附录 | 第45-46页 |
| 缩略词 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 个人简介 | 第48页 |
