| 中文摘要 | 第10-13页 |
| Abstract | 第13-15页 |
| 符号说明 | 第16-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-27页 |
| 1 内皮抑素的作用 | 第18-20页 |
| 1.1 内皮抑素简介 | 第18页 |
| 1.2 内皮抑素抑制内皮细胞增长和迁移的机制 | 第18-19页 |
| 1.3 内皮抑素在血管生成中的作用 | 第19-20页 |
| 2 重组蛋白的可溶性表达 | 第20-22页 |
| 2.1 可溶性表达与包涵体 | 第20页 |
| 2.2 形成包涵体的原因 | 第20-21页 |
| 2.3 可溶性表达的策略 | 第21-22页 |
| 3 蛋白质的冷冻干燥 | 第22-25页 |
| 3.1 蛋白质冷冻干燥的意义 | 第22页 |
| 3.2 冷冻干燥保护剂对蛋白质类药物的影响 | 第22-23页 |
| 3.3 冷冻干燥保护剂对蛋白质的保护原理 | 第23-24页 |
| 3.4 冷冻干燥保护剂 | 第24-25页 |
| 4 本课题的研究内容、研究目的和设计思路 | 第25-26页 |
| 5 本课题拟解决的关键问题 | 第26-27页 |
| 第二章 重组Tat-PTD-Endostatin-RGD的可溶性表达与纯化 | 第27-40页 |
| 1 材料 | 第27-30页 |
| 1.1 菌株 | 第27页 |
| 1.2 试剂与材料 | 第27-28页 |
| 1.3 培养基及常用溶液的配制 | 第28-30页 |
| 1.4 仪器设备 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-35页 |
| 2.1 Tat-PTD-Endostatin-RGD可溶性表达的E.coli菌种及诱导剂的选择 | 第30-34页 |
| 2.2 Tat-PTD-Endostatin-RGD可溶性表达蛋白的纯化 | 第34-35页 |
| 3 实验结果 | 第35-38页 |
| 3.1 Tat-PTD-Endostatin-RGD可溶性表达的E.coli菌种及诱导剂的选择 | 第35-36页 |
| 3.2 Tat-PTD-Endostatin-RGD可溶性表达蛋白的纯化 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 第三章 Tat-PTD-Endostatin-RGD可溶性表达蛋白的发酵罐制备 | 第40-52页 |
| 1 材料 | 第40-42页 |
| 1.1 菌株与细胞 | 第40页 |
| 1.2 培养基及常用溶液的配制 | 第40-41页 |
| 1.3 试剂与材料 | 第41页 |
| 1.4 仪器设备 | 第41-42页 |
| 2 实验方法 | 第42-47页 |
| 2.1 发酵罐培养诱导剂投放量的确定 | 第42-44页 |
| 2.2 发酵罐培养E.coli诱导时间的确定 | 第44页 |
| 2.3 发酵罐可溶性表达蛋白分离纯化的条件优化 | 第44-45页 |
| 2.4 CCK-8实验测定活性 | 第45-47页 |
| 3 实验结果 | 第47-50页 |
| 3.1 发酵罐培养诱导剂投放量的确定 | 第47-48页 |
| 3.2 发酵罐培养E.coli诱导时间的确定 | 第48页 |
| 3.3 发酵罐可溶性表达蛋白分离纯化的条件优化 | 第48-49页 |
| 3.4 CCK-8实验测定活性 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 第四章 Tat-PTD-Endostatin-RGD冻干保护剂的筛选 | 第52-62页 |
| 1 材料 | 第52-54页 |
| 1.1 常用溶液及配制方法 | 第52页 |
| 1.2 试剂与材料 | 第52-53页 |
| 1.3 仪器设备 | 第53-54页 |
| 2 实验方法 | 第54-56页 |
| 2.1 Tat-PTD-Endostatin-RGD冻干保护剂的单因素实验 | 第54-56页 |
| 3 实验结果 | 第56-59页 |
| 3.1 Tat-PTD-Endostatin-RGD冻干保护剂的单因素实验 | 第56-58页 |
| 3.2 Tat-PTD-Endostatin-RGD冻干保护剂的多因素正交实验 | 第58-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 第五章 Tat-PTD-Endostatin-RGD的稳定性及急性毒性实验 | 第62-65页 |
| 1 材料 | 第62-63页 |
| 1.1 实验动物 | 第62页 |
| 1.2 常用溶液及配制方法 | 第62页 |
| 1.3 主要试剂 | 第62-63页 |
| 1.4 仪器设备 | 第63页 |
| 2 实验方法 | 第63-64页 |
| 2.1 Tat-PTD-Endostatin-RGD的稳定性实验 | 第63页 |
| 2.2 Tat-PTD-Endostatin-RGD的急性毒性实验 | 第63-64页 |
| 3 实验结果 | 第64页 |
| 3.1 Tat-PTD-Endostatin-RGD的稳定性实验 | 第64页 |
| 3.2 Tat-PTD-Endostatin-RGD的急性毒性实验 | 第64页 |
| 4 讨论 | 第64页 |
| 5 结论 | 第64-65页 |
| 总结与展望 | 第65-67页 |
| 1 全文结论 | 第65页 |
| 2 创新点 | 第65-66页 |
| 3 展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第73-74页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第74页 |
