摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-14页 |
英文缩略语Ⅹ | 第15-17页 |
第一部分 MENK对流感病毒PR8感染的调节作用 | 第17-36页 |
1 前言 | 第17-18页 |
2 材料和方法 | 第18-25页 |
2.1 实验细胞及病毒 | 第18页 |
2.2 主要试剂及仪器 | 第18-20页 |
2.2.1 主要试剂 | 第18-19页 |
2.2.2 主要试剂的配制 | 第19页 |
2.2.3 主要仪器 | 第19-20页 |
2.3 实验方法 | 第20-25页 |
2.3.1 流感病毒PR8鸡胚培养及滴度检测 | 第20页 |
2.3.2 流感病毒TCID50检测 | 第20-21页 |
2.3.3 实验分组 | 第21页 |
2.3.4 MTS检测MENK最佳作用浓度 | 第21-22页 |
2.3.5 细胞形态学观察 | 第22-23页 |
2.3.6 流式细胞术检测RAW264.7细胞凋亡 | 第23页 |
2.3.7 流式细胞术检测RAW264.7细胞胞内InfluenzaNP和NF-κBp65的表达 | 第23页 |
2.3.8 qPCR法检测Virus、TLR4、TLR7、NF-κBp65、MORmRNA水平 | 第23-25页 |
2.3.9 统计学分析 | 第25页 |
3 结果 | 第25-34页 |
3.1 鸡胚培养PR8的滴度 | 第25页 |
3.2 流感病毒TCID | 第25-26页 |
3.3 MENK对RAW264.7最佳作用浓度 | 第26-27页 |
3.4 细胞形态学改变 | 第27-28页 |
3.5 MENK对感染PR8的RAW264.7细胞凋亡的影响 | 第28-29页 |
3.6 MENK对RAW264.7细胞中病毒PR8复制的影响 | 第29-30页 |
3.7 MENK对RAW264.7细胞Toll样受体及NF-κBp65的影响 | 第30-32页 |
3.8 MENK对RAW264.7细胞MOR的调节作用 | 第32-34页 |
4 讨论 | 第34-35页 |
5 结论 | 第35-36页 |
第二部分 MENK调控感染流感病毒PR8小鼠固有免疫应答作用 | 第36-56页 |
1 前言 | 第36页 |
2 材料和方法 | 第36-44页 |
2.1 实验动物与细胞 | 第36-37页 |
2.2 主要试剂及仪器 | 第37-38页 |
2.2.1 主要试剂 | 第37页 |
2.2.2 主要试剂的配制 | 第37-38页 |
2.2.3 主要仪器 | 第38页 |
2.3 实验方法 | 第38-44页 |
2.3.1 实验动物分组及模型的建立 | 第38-39页 |
2.3.2 MENK对小鼠流感急性肺损伤的保护作用 | 第39-40页 |
2.3.3 肺组织病毒滴度(HA) | 第40页 |
2.3.4 qPCR法检测肺组织炎症因子和Tol样受体通路相关因子mRNA水平 | 第40-41页 |
2.3.5 Westernblot法检测肺组织Toll样受体通路蛋白表达 | 第41-42页 |
2.3.6 免疫组化法检测阿片受体及Toll样受体通路蛋白表达 | 第42-43页 |
2.3.7 免疫荧光方法对流感病毒NP定位 | 第43页 |
2.3.8 统计学分析 | 第43-44页 |
3 结果 | 第44-53页 |
3.1 感染流感病毒PR8小鼠的体重及生存率 | 第44-45页 |
3.2 MENK缓解流感病毒PR8所致的急性肺损伤 | 第45-46页 |
3.3 MENK降低感染流感病毒PR8小鼠肺组织病毒滴度 | 第46-47页 |
3.4 MENK降低感染流感病毒PR8小鼠肺组织的炎症反应 | 第47-48页 |
3.5 MENK上调阿片受体MOR、DOR的表达水平 | 第48-50页 |
3.6 MENK下调TLR7-MyD88-TRAF6-NF-κBp65信号通路 | 第50-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
5 结论 | 第55-56页 |
第三部分 MENK调控感染流感病毒PR8小鼠适应性免疫应答作用 | 第56-74页 |
1 前言 | 第56-57页 |
2 材料和方法 | 第57-61页 |
2.1 实验动物 | 第57页 |
2.2 主要试剂及仪器 | 第57-58页 |
2.2.1 主要试剂 | 第57页 |
2.2.2 主要试剂的配制 | 第57-58页 |
2.2.3 主要仪器 | 第58页 |
2.3 实验方法 | 第58-61页 |
2.3.1 实验动物分组及模型的建立 | 第58-59页 |
2.3.2 小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)提取 | 第59页 |
2.3.3 小鼠肺组织淋巴细胞提取 | 第59页 |
2.3.4 小鼠淋巴细胞提取 | 第59页 |
2.3.5 细胞染色 | 第59-60页 |
2.3.6 统计学分析 | 第60-61页 |
3 结果 | 第61-71页 |
3.1 MENK上调感染流感病毒PR8小鼠CD4+、CD8+T细胞 | 第61-62页 |
3.2 MENK对感染流感病毒PR8小鼠效应T细胞的调节 | 第62-63页 |
3.3 MENK对感染流感病毒PR8小鼠记忆性T细胞的调节 | 第63-65页 |
3.4 MENK对感染流感病毒PR8小鼠效应性记忆T细胞的调节 | 第65-71页 |
4 讨论 | 第71-73页 |
5 结论 | 第73-74页 |
本研究创新性的自我评价 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-82页 |
文献综述 | 第82-97页 |
参考文献 | 第90-97页 |
攻读学位期间取得的研究成果 | 第97-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
个人简介 | 第99页 |