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蛋氨酸脑啡肽(MENK)对流感病毒PR8感染的免疫调节作用及机制的研究

摘要第8-11页
Abstract第11-14页
英文缩略语Ⅹ第15-17页
第一部分 MENK对流感病毒PR8感染的调节作用第17-36页
    1 前言第17-18页
    2 材料和方法第18-25页
        2.1 实验细胞及病毒第18页
        2.2 主要试剂及仪器第18-20页
            2.2.1 主要试剂第18-19页
            2.2.2 主要试剂的配制第19页
            2.2.3 主要仪器第19-20页
        2.3 实验方法第20-25页
            2.3.1 流感病毒PR8鸡胚培养及滴度检测第20页
            2.3.2 流感病毒TCID50检测第20-21页
            2.3.3 实验分组第21页
            2.3.4 MTS检测MENK最佳作用浓度第21-22页
            2.3.5 细胞形态学观察第22-23页
            2.3.6 流式细胞术检测RAW264.7细胞凋亡第23页
            2.3.7 流式细胞术检测RAW264.7细胞胞内InfluenzaNP和NF-κBp65的表达第23页
            2.3.8 qPCR法检测Virus、TLR4、TLR7、NF-κBp65、MORmRNA水平第23-25页
            2.3.9 统计学分析第25页
    3 结果第25-34页
        3.1 鸡胚培养PR8的滴度第25页
        3.2 流感病毒TCID第25-26页
        3.3 MENK对RAW264.7最佳作用浓度第26-27页
        3.4 细胞形态学改变第27-28页
        3.5 MENK对感染PR8的RAW264.7细胞凋亡的影响第28-29页
        3.6 MENK对RAW264.7细胞中病毒PR8复制的影响第29-30页
        3.7 MENK对RAW264.7细胞Toll样受体及NF-κBp65的影响第30-32页
        3.8 MENK对RAW264.7细胞MOR的调节作用第32-34页
    4 讨论第34-35页
    5 结论第35-36页
第二部分 MENK调控感染流感病毒PR8小鼠固有免疫应答作用第36-56页
    1 前言第36页
    2 材料和方法第36-44页
        2.1 实验动物与细胞第36-37页
        2.2 主要试剂及仪器第37-38页
            2.2.1 主要试剂第37页
            2.2.2 主要试剂的配制第37-38页
            2.2.3 主要仪器第38页
        2.3 实验方法第38-44页
            2.3.1 实验动物分组及模型的建立第38-39页
            2.3.2 MENK对小鼠流感急性肺损伤的保护作用第39-40页
            2.3.3 肺组织病毒滴度(HA)第40页
            2.3.4 qPCR法检测肺组织炎症因子和Tol样受体通路相关因子mRNA水平第40-41页
            2.3.5 Westernblot法检测肺组织Toll样受体通路蛋白表达第41-42页
            2.3.6 免疫组化法检测阿片受体及Toll样受体通路蛋白表达第42-43页
            2.3.7 免疫荧光方法对流感病毒NP定位第43页
            2.3.8 统计学分析第43-44页
    3 结果第44-53页
        3.1 感染流感病毒PR8小鼠的体重及生存率第44-45页
        3.2 MENK缓解流感病毒PR8所致的急性肺损伤第45-46页
        3.3 MENK降低感染流感病毒PR8小鼠肺组织病毒滴度第46-47页
        3.4 MENK降低感染流感病毒PR8小鼠肺组织的炎症反应第47-48页
        3.5 MENK上调阿片受体MOR、DOR的表达水平第48-50页
        3.6 MENK下调TLR7-MyD88-TRAF6-NF-κBp65信号通路第50-53页
    4 讨论第53-55页
    5 结论第55-56页
第三部分 MENK调控感染流感病毒PR8小鼠适应性免疫应答作用第56-74页
    1 前言第56-57页
    2 材料和方法第57-61页
        2.1 实验动物第57页
        2.2 主要试剂及仪器第57-58页
            2.2.1 主要试剂第57页
            2.2.2 主要试剂的配制第57-58页
            2.2.3 主要仪器第58页
        2.3 实验方法第58-61页
            2.3.1 实验动物分组及模型的建立第58-59页
            2.3.2 小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)提取第59页
            2.3.3 小鼠肺组织淋巴细胞提取第59页
            2.3.4 小鼠淋巴细胞提取第59页
            2.3.5 细胞染色第59-60页
            2.3.6 统计学分析第60-61页
    3 结果第61-71页
        3.1 MENK上调感染流感病毒PR8小鼠CD4+、CD8+T细胞第61-62页
        3.2 MENK对感染流感病毒PR8小鼠效应T细胞的调节第62-63页
        3.3 MENK对感染流感病毒PR8小鼠记忆性T细胞的调节第63-65页
        3.4 MENK对感染流感病毒PR8小鼠效应性记忆T细胞的调节第65-71页
    4 讨论第71-73页
    5 结论第73-74页
本研究创新性的自我评价第74-75页
参考文献第75-82页
文献综述第82-97页
    参考文献第90-97页
攻读学位期间取得的研究成果第97-98页
致谢第98-99页
个人简介第99页

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