| 目录 | 第4-7页 |
| Contents | 第7-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 縮略词 | 第15-16页 |
| 第一章 前言 | 第16-32页 |
| 1.1 铁对海洋硅藻分布的影响 | 第16-17页 |
| 1.2 铁限制对硅藻细胞的作用 | 第17-20页 |
| 1.2.1 铁限制影响硅藻的光合作用 | 第17页 |
| 1.2.2 铁限制影响硅藻的呼吸作用 | 第17页 |
| 1.2.3 铁限制影响硅藻对营养元素吸收和利用 | 第17页 |
| 1.2.4 铁限制影响硅藻的抗氧化作用 | 第17-18页 |
| 1.2.5 硅藻对铁限制的细胞反应的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3 浮游植物细胞程序性死亡 | 第20-26页 |
| 1.3.1 浮游植物细胞程序性死亡的一般特征 | 第20-21页 |
| 1.3.2 浮游植物细胞程序性死亡的检测 | 第21-24页 |
| 1.3.3 浮游植物细胞程序性死亡研究进展 | 第24-26页 |
| 1.4 蛋白质组学在藻类研究中的应用 | 第26-30页 |
| 1.4.1 蛋白质组学简述 | 第26-27页 |
| 1.4.2 基于iTRAQ的定量蛋白质组学 | 第27-29页 |
| 1.4.3 iTRAQ技术在浮游藻类中的应用 | 第29-30页 |
| 1.5 本论文的研究目的和意义 | 第30-32页 |
| 第二章 材料与方法 | 第32-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-38页 |
| 2.1.1 藻种 | 第32页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第32-33页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.4 常用溶液配制 | 第34-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-48页 |
| 2.2.1 藻生长过程中细胞数变化的测定 | 第38页 |
| 2.2.2 光合系统Ⅱ最大光化学量子产量(Fv/Fm)检测 | 第38页 |
| 2.2.3 培养基参数测定 | 第38-39页 |
| 2.2.4 透射电镜制片观察(此部分李彩霞完成) | 第39-40页 |
| 2.2.5 假微型海链藻细胞活性氧含量检测 | 第40页 |
| 2.2.6 假微型海链藻细胞磷脂酰丝氨酸外翻率检测 | 第40-41页 |
| 2.2.7 CaspACE测定假微型海链藻Caspase活性 | 第41页 |
| 2.2.8 SYTOX~(?) Green法检测假微型海链藻死细胞 | 第41页 |
| 2.2.9 假微型海链藻总蛋白提取 | 第41-42页 |
| 2.2.10 iTRAQ实验流程 | 第42-43页 |
| 2.2.11 蛋白组数据分析和注释 | 第43-44页 |
| 2.2.12 RNA的提取及质量检测 | 第44-45页 |
| 2.2.13 qPCR检测验证蛋白质组数据 | 第45-48页 |
| 第三章 结果 | 第48-81页 |
| 3.1 铁限制和完全培养假微型海链藻细胞的生理反应 | 第48-53页 |
| 3.1.1 假微型海链藻生长曲线光合系统Ⅱ的光合效率(Fv/Fm)变化曲线 | 第48-49页 |
| 3.1.2 培养基营养元素分析 | 第49-51页 |
| 3.1.3 假微型海链藻透射电镜(TEM)图像(李彩霞完成) | 第51-53页 |
| 3.2 铁限制和完全培养条件下细胞的生化检测 | 第53-63页 |
| 3.2.1 CM-H2DCFDA染色 | 第53-55页 |
| 3.2.2 Annexin V染色 | 第55-58页 |
| 3.2.3 CaspACE染色 | 第58-60页 |
| 3.2.4 SYTOX Green染色 | 第60-63页 |
| 3.3 蛋白质组学数据结果 | 第63-81页 |
| 3.3.1 iTRAQ LC-MS/MS蛋白定量分析检测 | 第63-66页 |
| 3.3.2 RT-PCR validation of the proteomics analysis | 第66-67页 |
| 3.3.3 铁限制条件下的光合作用和ROS的积累 | 第67-71页 |
| 3.3.4 铁限制条件下的呼吸作用和ROS的积累 | 第71-74页 |
| 3.3.5 氧化应激相关蛋白 | 第74-77页 |
| 3.3.6 细胞程序性死亡蛋白 | 第77-78页 |
| 3.3.7 氮代谢相关的蛋白 | 第78-80页 |
| 3.3.8 假微型海链藻铁转运相关的蛋白 | 第80-81页 |
| 第四章 讨论 | 第81-89页 |
| 4.1 实验材料的选择和蛋白质提取时间点的确定 | 第81-82页 |
| 4.2 铁限制下T.pseudonana细胞的生理生化反应 | 第82-83页 |
| 4.3 细胞内ROS的产生 | 第83-85页 |
| 4.3.1 叶绿体中ROS的产生 | 第83-84页 |
| 4.3.2 线粒体中ROS的产生 | 第84-85页 |
| 4.4 假微型海链藻抗氧化应激和抗程序性死亡相关的蛋白 | 第85-87页 |
| 4.5 铁限制条件下其它代谢活动 | 第87-89页 |
| 4.5.1 铁限制条件下细胞内的氮代谢 | 第87-88页 |
| 4.5.2 铁限制条件下细胞内的铁代谢 | 第88页 |
| 4.5.3 铁限制条件下细胞内的硅代谢 | 第88-89页 |
| 第五章 总结与展望 | 第89-91页 |
| 5.1 研究总结 | 第89页 |
| 5.2 本论文的创新点 | 第89-90页 |
| 5.3 展望 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-102页 |
| 在学期间参与的课题和发表的论文 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
