中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
1 4-甲基伞形花内酯是伞形花内酯的衍生物 | 第12-13页 |
2 4-甲基伞形花内酯和活性氧的国内外研究进展 | 第13-16页 |
3 家蚕作为模式动物的优点 | 第16-17页 |
4 家蚕体内主要氧化还原酶系 | 第17-22页 |
4.1 过氧化氢酶 | 第17-18页 |
4.2 超氧化物歧化酶 | 第18页 |
4.3 谷氨酰半胱甘酸合成酶 | 第18-19页 |
4.4 NADPH 氧化酶(NADH 氧化酶) | 第19-20页 |
4.5 谷胱甘肽还原酶 | 第20-21页 |
4.6 谷胱甘肽过氧化物酶 | 第21-22页 |
5 家蚕体内几种重要的免疫相关基因 | 第22-24页 |
5.1 家蚕 MAPK 信号通路相关基因 | 第22-23页 |
5.2 家蚕抗菌肽基因 | 第23页 |
5.3 家蚕血淋巴中主要的吞噬相关基因 | 第23-24页 |
6 家蚕体内与药物解毒及免疫相关的主要组织 | 第24-26页 |
6.1 消化管 | 第24页 |
6.2 脂肪体 | 第24-25页 |
6.3 血淋巴和造血器官 | 第25-26页 |
7 研究目的与技术路线 | 第26-28页 |
7.1 研究目的及意义 | 第26页 |
7.2 研究思路与技术路线 | 第26-28页 |
第二章 主要实验条件与实验方法 | 第28-39页 |
1 实验动物 | 第28-29页 |
1.1 家蚕饲养方法 | 第28-29页 |
1.2 饲料处理 | 第29页 |
1.3 4-MU 给药方法 | 第29页 |
2 常用仪器 | 第29-31页 |
3 常用试剂 | 第31-32页 |
4 基本实验方法 | 第32-39页 |
4.1 总 RNA 的提取 | 第32-33页 |
4.2 消化 | 第33-34页 |
4.3 RNA 反转录 | 第34页 |
4.4 Real Time PCR | 第34-35页 |
4.5 BCA 法测定蛋白浓度(碧云天试剂盒) | 第35页 |
4.6 HPLC 测定 | 第35-36页 |
4.7 石蜡切片 | 第36页 |
4.8 DAPI 染色 | 第36-37页 |
4.9 ROS 染色 | 第37-38页 |
4.10 抗菌实验 | 第38-39页 |
第三章 4-MU 对家蚕幼虫组织中活性氧水平和氧化还原系统的影响 | 第39-59页 |
1 材料和方法 | 第39-43页 |
1.1 HPLC 检测 | 第39页 |
1.2 家蚕消化管、脂肪体以及造血器官活性氧染色方法 | 第39页 |
1.3 家蚕氧化还原酶系统相关酶活以及底物和产物的测定 | 第39-43页 |
2 结果与分析 | 第43-57页 |
2.1 4-MU 经口暴露能够快速进入家蚕血淋巴及内脏组织 | 第43-44页 |
2.2 4-MU 暴露诱导消化管中活性氧水平升高 | 第44-45页 |
2.3 4-MU 暴露诱导脂肪体中活性氧水平升高 | 第45-46页 |
2.4 4-MU 暴露诱导家蚕造血器官中活性氧水平升高 | 第46-48页 |
2.5 4-MU 暴露对消化管和脂肪体氧化还原系统的影响 | 第48-57页 |
3 讨论与结论 | 第57-59页 |
第四章 4-MU 对家蚕组织和血细胞的毒性及功能影响 | 第59-72页 |
1 材料与方法 | 第59-62页 |
1.1 实验动物处理 | 第59页 |
1.2 石蜡切片 HE 染色、DAPI 染色方法 | 第59-60页 |
1.3 RT-PCR 方法 | 第60-61页 |
1.4 血球 AO-PI 染色方法 | 第61页 |
1.5 血球计数 | 第61页 |
1.6 造血器官体外培养 | 第61页 |
1.7 家蚕肠液抑菌实验方法 | 第61-62页 |
2 结果与分析 | 第62-70页 |
2.1 4-MU 暴露对家蚕消化管抑菌能力的影响 | 第62-63页 |
2.2 4-MU 暴露未损伤家蚕消化管和脂肪体组织 | 第63-64页 |
2.3 4-MU 暴露未引起组织细胞凋亡 | 第64-66页 |
2.4 4-MU 暴露减少了家蚕造血器官的血球分泌 | 第66-68页 |
2.5 4-MU 对家蚕脂肪体和血淋巴中免疫相关基因表达水平的影响 | 第68-70页 |
3 讨论与结论 | 第70-72页 |
第五章 综合结论 | 第72-75页 |
1 4-MU 可以快速到达家蚕各组织 | 第72页 |
2 4-MU 进入家蚕体内可以提高各组织中活性氧水平 | 第72页 |
3 4-MU 产生活性氧的同时也激发了抗氧化系统 | 第72-73页 |
4 4-MU 对家蚕组织形态不会造成损伤 | 第73页 |
5 4-MU 可以提高脂肪体和血淋巴中的抗菌肽基因水平 | 第73页 |
6 进一步研究方向 | 第73-74页 |
7 创新点 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-87页 |
攻读学位期间主持和参与的科研项目 | 第87-88页 |
研究生期间发表文章 | 第88-90页 |
附录 | 第90-93页 |
致谢 | 第93-95页 |