中文摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
缩略语表 | 第8-9页 |
第一章 引言 | 第9-15页 |
1.1 研究背景 | 第9-10页 |
1.2 羽毛形态发生与调控 | 第10-12页 |
1.2.1 羽毛的基本结构 | 第10-11页 |
1.2.2 羽毛分叉的过程 | 第11页 |
1.2.3 羽毛分叉的研究进展 | 第11-12页 |
1.3 Notch信号通路简介 | 第12-13页 |
1.4 羽毛分叉中Notch信号的研究进展 | 第13-14页 |
1.5 研究目的和意义 | 第14-15页 |
第二章 材料与方法 | 第15-34页 |
2.1 材料 | 第15-16页 |
2.1.1 实验动物 | 第15页 |
2.1.2 实验用细胞系和菌种 | 第15页 |
2.1.3 质粒信息 | 第15-16页 |
2.1.4 引物信息 | 第16页 |
2.2 实验仪器和试剂 | 第16-21页 |
2.2.1 实验试剂和耗材 | 第16-17页 |
2.2.2 溶液配制 | 第17-19页 |
2.2.3 抗体来源 | 第19页 |
2.2.3.1 一抗来源 | 第19页 |
2.2.3.2 二抗来源 | 第19页 |
2.2.4 仪器和设备 | 第19-21页 |
2.3 实验方法 | 第21-34页 |
2.3.1 pLL3.7-RNAi载体构建 | 第21-23页 |
2.3.2 细胞培养和慢病毒包装实验 | 第23-25页 |
2.3.2.1 细胞复苏 | 第23页 |
2.3.2.2 细胞培养、传代和冻存 | 第23-24页 |
2.3.2.3 病毒包装和滴度测定 | 第24-25页 |
2.3.3 病毒感染效率及特异性测定 | 第25-27页 |
2.3.3.1 电转步骤 | 第25页 |
2.3.3.2 DF1细胞总RNA提取 | 第25-26页 |
2.3.3.3 RT-PCR测定病毒敲除效率 | 第26-27页 |
2.3.4 动物干扰实验 | 第27-28页 |
2.3.4.1 病毒感染毛囊 | 第27页 |
2.3.4.2 病毒或者蛋白干扰毛管 | 第27-28页 |
2.3.5 石蜡切片及染色 | 第28-29页 |
2.3.5.1 石蜡切片 | 第28页 |
2.3.5.2 石蜡切片HE染色 | 第28页 |
2.3.5.3 石蜡切片免疫染色 | 第28-29页 |
2.3.6 冰冻切片及染色 | 第29页 |
2.3.6.1 冰冻切片 | 第29页 |
2.3.6.2 冰冻切片免疫染色 | 第29页 |
2.3.7 原位杂交 | 第29-33页 |
2.3.7.1 探针的设计 | 第29-31页 |
2.3.7.2 探针的制备 | 第31-32页 |
2.3.7.3 原位杂交 | 第32-33页 |
2.3.8 Notch报告基因体外实验 | 第33-34页 |
第三章 结果与讨论 | 第34-53页 |
3.1 实验结果 | 第34-49页 |
3.1.1 Notch1,Serrate1,Serrate2在毛管再生过程的表达情况 | 第34-36页 |
3.1.2 干扰Notch信号羽毛分叉出现异常 | 第36-45页 |
3.1.2.1 慢病毒感染毛囊 | 第37-39页 |
3.1.2.2 慢病毒感染毛管 | 第39-41页 |
3.1.2.3 表型样品分析 | 第41-45页 |
3.1.3 Notch信号在羽毛分叉的作用机制 | 第45-49页 |
3.2 讨论 | 第49-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
个人简历 | 第60页 |