| 英文缩略词表 | 第8-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 第一部分 NSCLC组织中SEMA4D表达与VM形成的关系 | 第14-29页 |
| 1.1 前言 | 第15-17页 |
| 1.2 材料与方法 | 第17-22页 |
| 1.2.1 实验仪器与材料 | 第17页 |
| 1.2.2 主要试剂 | 第17页 |
| 1.2.3 组织标本收集 | 第17-18页 |
| 1.2.4 免疫组化 | 第18-20页 |
| 1.2.5 结果判读 | 第20页 |
| 1.2.6 统计学分析 | 第20-22页 |
| 1.3 实验结果 | 第22-26页 |
| 1.3.1 NSCLC患者肺癌组织中存在血管生成拟态 | 第22-23页 |
| 1.3.2 NSCLC患者肺癌组织中sema4D高表达 | 第23-24页 |
| 1.3.3 NSCLC患者肺癌组织中sema4D表达与VM的关系 | 第24-26页 |
| 1.4 讨论 | 第26-28页 |
| 1.5 小结 | 第28-29页 |
| 第二部分 体内外实验探讨SEMA4D在NSCLC血管拟态形成中的作用 | 第29-56页 |
| 2.1 前言 | 第30-32页 |
| 2.2 材料与方法 | 第32-44页 |
| 2.2.1 实验仪器与材料 | 第32页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第32-33页 |
| 2.2.3 细胞培养 | 第33-34页 |
| 2.2.4 Western Blot | 第34-37页 |
| 2.2.5 靶向sema4D的慢病毒载体构建及感染 | 第37页 |
| 2.2.6 RT-PCR | 第37-39页 |
| 2.2.7 成管实验 | 第39页 |
| 2.2.8 体外成管PAS染色 | 第39页 |
| 2.2.9 明胶酶谱检测MMP2、MMP9活性 | 第39-40页 |
| 2.2.10 皮下移植瘤模型构建 | 第40-41页 |
| 2.2.11 皮下移植瘤组织CD31/PAS染色 | 第41-42页 |
| 2.2.12 皮下移植瘤组织免疫荧光 | 第42-43页 |
| 2.2.13 原位移植瘤模型构建 | 第43页 |
| 2.2.14 统计学分析 | 第43-44页 |
| 2.3 实验结果 | 第44-53页 |
| 2.3.1 肺癌细胞株中sema4D表达高于正常肺上皮细胞株 | 第44页 |
| 2.3.2 慢病毒介导的shRNA靶向干扰sema4D效率的验证 | 第44页 |
| 2.3.3 Sema4D下调对肺癌细胞H1299、HCC827成管能力的影响 | 第44-45页 |
| 2.3.4 PAS染色观察sema4D下调对肺癌细胞H1299、HCC827成管能力的影响 | 第45-46页 |
| 2.3.5 Sema4D下调对肺癌细胞H1299、HCC827 VM相关蛋白表达及活性的影响 | 第46-47页 |
| 2.3.6 Sema4D促进成管能力弱的肺癌细胞体外形成VM | 第47-48页 |
| 2.3.7 Sema4D下调对肺癌细胞裸鼠皮下移植瘤生长的影响 | 第48-49页 |
| 2.3.8 Sema4D下调对肺癌细胞裸鼠皮下移植瘤中VM数量的影响 | 第49-51页 |
| 2.3.9 Sema4D下调对裸鼠肺原位移植瘤生长和VM形成的影响 | 第51-53页 |
| 2.4 讨论 | 第53-55页 |
| 2.5 小结 | 第55-56页 |
| 第三部分 SEMA4D影响NSCLC血管生成拟态形成的可能机制 | 第56-81页 |
| 3.1 前言 | 第57-59页 |
| 3.2 材料与方法 | 第59-70页 |
| 3.2.1 实验仪器与材料 | 第59页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第59-60页 |
| 3.2.3 细胞培养 | 第60-61页 |
| 3.2.4 SiRNA转染 | 第61-62页 |
| 3.2.5 RT-PCR | 第62-63页 |
| 3.2.6 Western blot | 第63-65页 |
| 3.2.7 成管实验 | 第65-66页 |
| 3.2.8 MTT实验 | 第66页 |
| 3.2.9 RhoA活化实验 | 第66-68页 |
| 3.2.10 罗丹明标记的鬼笔环肽染色 | 第68页 |
| 3.2.11 考马斯亮蓝细胞骨架染色 | 第68-69页 |
| 3.2.12 划痕实验 | 第69页 |
| 3.2.13 Transwell小室迁移实验 | 第69-70页 |
| 3.3 实验结果 | 第70-78页 |
| 3.3.1 SiRNA靶向干扰plexinB1效率的验证 | 第70页 |
| 3.3.2 靶向抑制plexinB1对肺癌细胞H1299、HCC827成管能力的影响 | 第70-71页 |
| 3.3.3 Fasudil对肺癌细胞H1299、HCC827细胞存活的影响 | 第71-72页 |
| 3.3.4 抑制RhoA/ROCK信号通路对肺癌细胞H1299、HCC827成管能力的影响 | 第72-73页 |
| 3.3.5 下调sema4D对肺癌细胞及移植瘤中RhoA/ROCK信号通路的影响 | 第73-74页 |
| 3.3.6 下调sema4D对肺癌细胞H1299、HCC827骨架的影响 | 第74-76页 |
| 3.3.7 下调sema4D对肺癌细胞H1299、HCC827迁移能力的影响 | 第76-78页 |
| 3.4 讨论 | 第78-80页 |
| 3.5 小结 | 第80-81页 |
| 总结与展望 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-88页 |
| 综述 血管生成拟态促进胖瘤浸润及转移的研究进展 | 第88-104页 |
| 参考文献 | 第96-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 附录攻读学位期间发表的论文 | 第106页 |
