| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-23页 |
| 1.1 瓜类细菌性果斑病(Bacterial Fruit Blotch,BFB)研究概况 | 第7-8页 |
| 1.1.1 Acidovorax citrulli的分类地位 | 第7页 |
| 1.1.2 Acidovorax citrulli的病原生物学特征 | 第7-8页 |
| 1.1.3 Acidovorax citrulli的致病机理与防治方法 | 第8页 |
| 1.2 病原细菌Ⅲ型分泌系统研究进展 | 第8-18页 |
| 1.2.1 TTSS的发现过程 | 第8-10页 |
| 1.2.2 TTSS的结构 | 第10-12页 |
| 1.2.3 TTSS编码基因的结构及其调控 | 第12-15页 |
| 1.2.4 TTSS的泌出物 | 第15-18页 |
| 1.2.5 TTSS的人工诱导条件研究 | 第18页 |
| 1.3 TTSS抑制剂筛选方法 | 第18-21页 |
| 1.4 研究的目的与意义 | 第21页 |
| 1.5 研究内容与技术路线 | 第21-23页 |
| 1.5.1 研究内容 | 第21-22页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 TTSS抑制剂高通量筛选体系的构建 | 第23-43页 |
| 2.1 材料与方法 | 第23-34页 |
| 2.1.1 供试菌株、质粒及培养条件 | 第23-24页 |
| 2.1.2 试验中用到的培养基和溶液 | 第24-26页 |
| 2.1.3 引物设计 | 第26-27页 |
| 2.1.4 显色底物 | 第27页 |
| 2.1.5 A citrulli MH21基因组的提取 | 第27-28页 |
| 2.1.6 质粒的提取和纯化 | 第28页 |
| 2.1.7 E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
| 2.1.8 质粒的热击转化 | 第29页 |
| 2.1.9 三亲交配 | 第29页 |
| 2.1.10 PCR反应 | 第29-30页 |
| 2.1.11 相关突变体的筛选和表达载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.1.12 A.citrulli MH21中β-内酰胺酶合成基因的克隆 | 第31页 |
| 2.1.13 TTSS效应蛋白N端信号肽合成基因的克隆 | 第31页 |
| 2.1.14 带有表达载体的转化菌株的构建 | 第31-32页 |
| 2.1.15 A.citrulli MH21 TTSS抑制剂筛选体系 | 第32页 |
| 2.1.16 A.citrulli MH21 TTSS最佳诱导条件研究 | 第32页 |
| 2.1.17 Western blotting试验 | 第32-34页 |
| 2.2 结果与分析 | 第34-41页 |
| 2.2.1 A.citrulli MH21中β-内酰胺酶和TTSS信号肽合成基因的克隆和转化 | 第34-35页 |
| 2.2.2 基本培养基和诱导培养基对TTSS的诱导效果 | 第35-36页 |
| 2.2.3 改变培养基离子浓度对TTSS的诱导效果 | 第36页 |
| 2.2.4 酸性环境对TTSS的诱导效果 | 第36-37页 |
| 2.2.5 酸性条件和离子浓度变化对TTSS的协同诱导作用 | 第37-38页 |
| 2.2.6 改变培养时间对TTSS诱导的影响 | 第38-39页 |
| 2.2.7 不同缓冲液对TTSS的诱导效果 | 第39-40页 |
| 2.2.8 最佳诱导条件下TTSS Effector外泌的Western blotting检测 | 第40-41页 |
| 2.3 结论与讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 TTSS抑制剂的高通量筛选 | 第43-51页 |
| 3.1 材料与方法 | 第43-44页 |
| 3.1.1 供试化合物 | 第43页 |
| 3.1.2 化合物筛选浓度设置 | 第43页 |
| 3.1.3 筛选试验方法 | 第43-44页 |
| 3.2 试验结果 | 第44-49页 |
| 3.2.1 筛选结果 | 第44-46页 |
| 3.2.2 对TTSS的最小抑制浓度与构效关系分析 | 第46-49页 |
| 3.3 结论与讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 新化合物对致病性和TTSS编码基因转录表达的影响 | 第51-60页 |
| 4.1 材料与方法 | 第51-54页 |
| 4.1.1 萝卜切片法 | 第51页 |
| 4.1.2 温室试验 | 第51-52页 |
| 4.1.3 丙二腈肟醚类化合物对TTSS相关基因转录表达的影响 | 第52-54页 |
| 4.2 试验结果 | 第54-58页 |
| 4.2.1 丙二腈肟醚类化合物对A citrulli MH21在萝卜切片上的抑制效果 | 第54-55页 |
| 4.2.2 丙二腈肟醚类化合物对A citrulli MH21的温室防效 | 第55-56页 |
| 4.2.3 丙二腈肟醚类化合物对TTSS相关基因转录表达的影响 | 第56-58页 |
| 4.3 结论与讨论 | 第58-60页 |
| 第五章 结论 | 第60-62页 |
| 5.1 A.citrulli MH21中TTSS抑制剂筛选体系的建立和优化 | 第60页 |
| 5.2 TTSS抑制剂的高通量筛选 | 第60页 |
| 5.3 丙二腈肟醚类化合物对A citrulli MH21致病性的影响 | 第60页 |
| 5.4 丙二腈肟醚类化合物对TTSS编码基因簇hrp/hrc转录表达的影响 | 第60-62页 |
| References | 第62-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 附录 | 第75-90页 |
| 作者简历 | 第90页 |
