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耐辐射奇球菌全局调控因子cyclic AMP受体蛋白的功能研究

致谢第6-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-11页
缩略词第12-16页
第一章 文献综述第16-49页
    1.1 耐辐射奇球菌的研究进展第16-29页
        1.1.1 耐辐射奇球菌的分类第16-17页
        1.1.2 耐辐射奇球菌的形态结构与生长特性第17-19页
        1.1.3 耐辐射奇球菌的基因组结构第19-21页
        1.1.4 耐辐射奇球菌的抗性机制第21-29页
    1.2 cAMP受体蛋白的研究进展第29-40页
        1.2.1 cAMP受体蛋白的发现第30页
        1.2.2 cAMP受体蛋白转录因子的组分第30-34页
        1.2.3 cAMP受体蛋白的作用机制第34-38页
        1.2.4 cAMP受体蛋白调控的多样性与广泛性第38-39页
        1.2.5 CRP的研究意义第39-40页
    参考文献第40-49页
第二章 耐辐射奇球菌CRP基因突变株的构建及突变株遗传学分析第49-75页
    2.1 引言第49-50页
    2.2 实验材料与仪器第50-52页
        2.2.1 菌株第50-51页
        2.2.2 仪器与设备第51-52页
    2.3 实验方法第52-59页
        2.3.1 CRP同源蛋白的生物信息学分析第52页
        2.3.2 耐辐射奇球菌总RNA的提取及RT-PCR第52-53页
        2.3.3 氧化压力胁迫下crp基因的转录表达变化第53页
        2.3.4 基因缺失突变菌株及其补偿株的构建第53-55页
        2.3.5 耐辐射奇球菌生长曲线的测定实验第55页
        2.3.6 突变株H_2O_2表型实验第55-56页
        2.3.7 突变株UV表型实验第56-57页
        2.3.8 突变株Mitomycin C表型实验第57页
        2.3.9 突变株电离辐射表型实验第57页
        2.3.10 过氧化氢酶和总抗氧化活性检测实验第57-59页
    2.4 实验结果与分析第59-70页
        2.4.0 同源序列比对分析第59页
        2.4.1 氧化压力下crp基因的转录水平第59-60页
        2.4.2 CRP突变株鉴定第60-61页
        2.4.3 CRP突变株的生长曲线第61-63页
        2.4.4 CRP突变株H_2O_2抗性第63-64页
        2.4.5 CRP突变株HClO抗性第64-65页
        2.4.6 CRP突变株UV抗性第65-66页
        2.4.7 CRP突变株Mitomycin C抗性第66-67页
        2.4.8 CRP突变株电离辐射抗性第67-68页
        2.4.9 突变影响细胞过氧化氢酶活性与总抗氧化活性第68-70页
    2.5 讨论第70-72页
    参考文献第72-75页
第三章 耐辐射奇球菌CRP家族蛋白DR0997调控概况研究第75-105页
    3.1 引言第75页
    3.2 实验菌种,试剂及仪器第75-77页
    3.3 实验方法第77-81页
        3.3.1 DR0997同源性及保守位点分析第77页
        3.3.2 Dr0997基因及dr0615基因的克隆第77页
        3.3.3 DR0615与DR0997表达菌株的构建第77-78页
        3.3.4 DR0997蛋白的表达与纯化第78-79页
        3.3.5 DR0615蛋白的诱导与纯化第79页
        3.3.6 凝胶迁移率实验第79-80页
        3.3.7 耐辐射奇球菌总RNA的提取及RT-PCR第80-81页
    3.4 结果与分析第81-101页
        3.4.1 DR0997序列矫正第81-83页
        3.4.2 DR0997与DR0615的表达与纯化第83-84页
        3.4.3 DR0997与启动子DNA结合第84-87页
        3.4.4 DR0997结合CRP保守结合位点调控基因表达第87-94页
        3.4.5 DR0997调控途径分类第94-101页
    3.5 讨论第101-103页
    参考文献第103-105页
第四章 耐精射奇球菌CRP调控Ter抗性基因的表达研究第105-122页
    4.1 引言第105-106页
    4.2 实验材料与仪器第106-107页
        4.2.1 菌株与质粒第106页
        4.2.2 实验试剂第106-107页
        4.2.3 实验仪器第107页
    4.3 实验方法第107-111页
        4.3.1 碲抗性基因的生物信息学分析第107页
        4.3.2 凝胶迁移率试验第107-108页
        4.3.3 β-半乳糖苷酶活性检测第108页
        4.3.4 Ter相关性基因敲除第108-109页
        4.3.5 Ter敲除菌株H_2O_2抗性试验第109页
        4.3.6 Ter敲除菌株的过氧化氢酶活性与总抗氧化活性检测第109页
        4.3.7 dr0997突变株的亚碲酸钾抗性试验第109-110页
        4.3.8 耐辐射奇球菌总RNA的提取及qRT-PCR第110-111页
    4.4 结果与分析第111-118页
        4.4.1 Ter resistance protein的生物信息学分析第111-112页
        4.4.2 凝胶迁移率检测DR0997结合碲抗性基因的启动子序列第112-113页
        4.4.3 β-半乳糖苷酶检测DR0997调控碲抗性基因的启动子序列第113-114页
        4.4.4 碲抗性相关基因的敲除与鉴定第114-115页
        4.4.5 Ter敲除菌株H_2O_2抗性第115页
        4.4.6 Ter敲除菌株的过氧化氢酶活性与总抗氧化活性分析第115-116页
        4.4.7 dr0997突变株的碲盐抗性第116-117页
        4.4.8 Ter相关性基因RT-PCR分析第117-118页
    4.5 讨论第118-120页
    参考文献第120-122页
总结与展望第122-125页
附录1 实验中用到的引物列表第125-131页

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