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免疫磁性微粒的制备及其在人血浆高丰度蛋白去除中的应用研究

中文摘要第1-5页
ABSTRACT第5-11页
第一章 前言第11-25页
   ·血浆蛋白质组学及其特性第11-13页
   ·血浆蛋白质组学的样品预处理技术概述第13-14页
     ·血浆蛋白分部分离第13页
     ·高丰度蛋白去除第13-14页
   ·高丰度蛋白去除技术概述第14-15页
   ·亲和色谱蛋白去除法概述第15-16页
     ·染料亲和法第15页
     ·蛋白配体亲和法第15-16页
     ·多肽亲合法第16页
     ·免疫亲和法第16页
   ·免疫亲和去除法第16-18页
     ·单克隆抗体亲和法第17页
     ·多克隆抗体亲合法第17页
     ·鸡卵黄抗体(IgY)亲和法第17-18页
     ·对亲和色谱去除法的优缺点分析第18页
   ·基于磁性微粒的免疫亲和去除法第18-23页
     ·磁性微粒的特性第19-20页
     ·磁性微粒的合成第20页
     ·磁性微粒的结构第20页
     ·磁性微粒表面抗体的固定化第20-23页
   ·本研究的内容、目的和意义第23-25页
     ·论文的出发点和主要工作第23页
     ·本研究主要工作涉及以下研究内容第23-24页
     ·研究的意义第24-25页
第二章 兔抗人血浆白蛋白抗体的制备第25-33页
   ·用于亲和分离蛋白的抗体概述第25页
   ·实验材料、仪器和方法第25-26页
     ·实验材料第25页
     ·实验用动物第25-26页
     ·实验用仪器第26页
   ·实验方法第26-30页
     ·动物的免疫第26页
     ·抗体效价的测定第26-27页
     ·硫酸铵盐析法制备兔抗人白蛋白抗体第27-28页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳实验检测抗体纯度第28-29页
     ·抗体特异性的检测第29-30页
     ·Bradford法测定抗体浓度第30页
   ·实验结果和讨论第30-32页
     ·抗体效价的测定第30页
     ·凝胶电泳检测结果第30-31页
     ·Western blot实验结果第31页
     ·兔抗人白蛋白抗体浓度测定第31-32页
   ·小结第32-33页
第三章 兔抗免疫磁粒去除白蛋白方法建立第33-46页
   ·影响免疫磁粒去除结果因素的概述第33-35页
     ·免疫磁性微粒制备条件的影响因素第33-34页
     ·免疫磁性微粒对白蛋白去除条件的影响因素第34-35页
   ·实验材料和仪器第35页
     ·实验材料第35页
     ·实验仪器第35页
   ·实验方法第35-39页
     ·免疫磁性微粒去除白蛋白预实验第35-36页
     ·聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳检测实验第36-37页
     ·免疫磁性微粒制备条件优化第37-38页
     ·变性条件对白蛋白去除的影响第38页
     ·白蛋白去除量的确定第38页
     ·去除特异性的分析第38-39页
     ·去除重复性的分析第39页
   ·实验结果和讨论第39-45页
     ·紫外吸收测定IgG与磁粒的偶联效率第39页
     ·不同磁性复合微粒对白蛋白去除实验的结果对比第39-40页
     ·偶联条件优化第40-42页
     ·变性条件对白蛋白去除的影响第42-43页
     ·去除有效性分析-去除量的确定第43-44页
     ·去除特异性的分析第44页
     ·去除重复性的分析第44-45页
   ·小结第45-46页
第四章 高丰度蛋白卵黄抗体制备第46-53页
   ·抗多种高丰度蛋白卵黄抗体的概述第46页
     ·卵黄抗体的初步提取第46页
     ·卵黄抗体的纯化第46页
   ·材料与方法第46-47页
     ·试剂第46-47页
     ·实验动物第47页
     ·主要仪器第47页
   ·实验方法第47-49页
     ·动物免疫第47页
     ·免疫血清效价检测第47-48页
     ·IgY的粗分离提取第48页
     ·IgY的纯化第48页
     ·SDS-PAGE第48-49页
   ·结果及讨论第49-52页
     ·不同免疫原免疫鸡血清效价结果第49页
     ·效价随免疫次数的变化情况第49-50页
     ·免疫原对免疫效果影响第50-51页
     ·免疫剂量对免疫效果影响第51-52页
     ·IgY的纯度检测结果第52页
   ·小结第52-53页
第五章 卵黄抗体免疫磁粒去除高丰度蛋白方法建立第53-63页
   ·多种高丰度蛋白去除的概述第53页
   ·实验材料和仪器第53-54页
     ·实验材料第53页
     ·实验仪器第53-54页
   ·实验方法第54-55页
     ·免疫磁性微粒去除高丰度蛋白预实验第54页
     ·免疫磁性微粒去除高丰度蛋白量的确定第54页
     ·免疫磁性微粒去除高丰度蛋白特异性检验第54-55页
     ·免疫磁性微粒去除高丰度蛋白重复性检验第55页
     ·免疫磁性微粒去除多组分高丰度蛋白预实验第55页
     ·聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳检测实验第55页
   ·实验结果和讨论第55-62页
     ·紫外吸收测定IgY与磁粒的偶联效率第55页
     ·免疫磁性微粒去除白蛋白效率、去除特异性、重复性的确定第55-58页
     ·免疫磁性微粒去除IgG效率、去除特异性、重复性的确定第58-60页
     ·免疫磁性微粒去除转铁蛋白效率、去除特异性、重复性的确定第60-61页
     ·免疫磁性微粒去除高丰度蛋白效果评价第61-62页
   ·小结第62-63页
全文总结第63-65页
参考文献第65-74页
致谢第74-75页

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