| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略符号说明 | 第10-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-25页 |
| 1.1 β-淀粉样蛋白 | 第13-16页 |
| 1.1.1 Aβ寡聚体的结构与毒性 | 第13-14页 |
| 1.1.2 Aβ原处纤维和原纤维的形成及结构 | 第14-15页 |
| 1.1.3 治疗AD的药物 | 第15-16页 |
| 1.2 糖胺聚糖 | 第16-18页 |
| 1.3 糖胺聚糖与β-淀粉样蛋白相互作用的研究 | 第18-20页 |
| 1.4 糖胺聚糖与蛋白相互作用的分析方法 | 第20-23页 |
| 1.4.1 凝胶迁移电泳 | 第20-21页 |
| 1.4.2 核磁共振波谱 | 第21-22页 |
| 1.4.3 基于质谱的氢氘交换反应 | 第22-23页 |
| 1.4.3.1 蛋白质的氢氘交换反应 | 第22-23页 |
| 1.4.3.2 蛋白质与配体相互作用的氢氘交换反应 | 第23页 |
| 1.5 本课题的创新点和研究意义 | 第23-25页 |
| 第二章 肝素四糖的制备及结构表征 | 第25-47页 |
| 2.1 引言 | 第25-26页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第26页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第26页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第26页 |
| 2.3 实验方法 | 第26-29页 |
| 2.3.1 肝素寡糖的制备 | 第27页 |
| 2.3.1.1 肝素酶解与肝素寡糖纯化 | 第27页 |
| 2.3.1.2 阴离子交换方法分离肝素寡糖 | 第27页 |
| 2.3.1.3 脱盐 | 第27页 |
| 2.3.2 肝素四糖结构鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3.2.1 NMR方法 | 第27-28页 |
| 2.3.2.2 MS方法 | 第28页 |
| 2.3.3 淀粉样蛋白结构鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.3.1 MS方法 | 第28-29页 |
| 2.3.3.2 NMR方法 | 第29页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第29-47页 |
| 2.4.1 肝素四糖的制备 | 第29-31页 |
| 2.4.2 NMR鉴定dp4s结构 | 第31-39页 |
| 2.4.2.1 dp4s氢谱 | 第31-32页 |
| 2.4.2.2 dp4-1的NMR解析 | 第32-34页 |
| 2.4.2.3 dp4-3的NMR解析 | 第34-37页 |
| 2.4.2.4 dp4-4的NMR解析 | 第37-39页 |
| 2.4.3 质谱解析dp4s结构 | 第39-43页 |
| 2.4.3.1 dp4-1的质谱解析 | 第39-41页 |
| 2.4.3.2 dp4-3的质谱解析 | 第41-42页 |
| 2.4.3.2 dp4-4的质谱解析 | 第42-43页 |
| 2.4.4 鉴定Aβ40结构 | 第43-47页 |
| 2.4.4.1 质谱鉴定Aβ40结构 | 第44-45页 |
| 2.4.4.2 NMR鉴定Aβ40结构 | 第45-47页 |
| 第三章 淀粉样蛋白与肝素四糖相互作用的研究 | 第47-60页 |
| 3.1 引言 | 第47页 |
| 3.2 实验仪器与材料 | 第47-48页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第47-48页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第48页 |
| 3.3 实验方法 | 第48-51页 |
| 3.3.1 凝胶迁移电泳 | 第48-49页 |
| 3.3.1.1 GMSA反应体系的配制 | 第48页 |
| 3.3.1.2 肝素寡糖与AMAC反应 | 第48页 |
| 3.3.1.3 分离胶、浓缩胶及电泳缓冲液的配制 | 第48-49页 |
| 3.3.2 氢氘交换 | 第49-51页 |
| 3.3.2.1 Aβ40多肽的前处理 | 第49页 |
| 3.3.2.2 Aβ0氢氘交换方法 | 第49-50页 |
| 3.3.2.3 胃蛋白酶柱的填充 | 第50页 |
| 3.3.2.4 质谱采集的方法 | 第50-51页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第51-60页 |
| 3.4.1 肝素四糖与Aβ40的GMSA研究 | 第51-53页 |
| 3.4.2 dp4-4与Aβ40的氢氘交换质谱研究 | 第53-58页 |
| 3.4.3 对接计算模拟dp4-4与Aβ40的相互作用 | 第58-60页 |
| 第四章 结论 | 第60-62页 |
| 附表 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第74-75页 |
| 学术论文评阅及答辩情况表 | 第75页 |
