摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
前言 | 第12-14页 |
第一部分 洛铂和紫杉醇对胃癌SGC-7901细胞联合作用机制研究 | 第14-30页 |
1.1 引言 | 第14页 |
1.2 实验材料 | 第14-16页 |
1.2.1 实验细胞株 | 第14页 |
1.2.2 主要试剂及耗材 | 第14-16页 |
1.3 主要溶液配制 | 第16-18页 |
1.3.1 细胞培养相关溶液配制 | 第16-17页 |
1.3.2 Western blot相关溶液的配制 | 第17-18页 |
1.3.3 MTT溶液配制 | 第18页 |
1.3.4 PI染液配制 | 第18页 |
1.4 试验方法 | 第18-21页 |
1.4.1 细胞复苏 | 第18页 |
1.4.2 细胞培养及冻存 | 第18-19页 |
1.4.3 细胞总蛋白提取 | 第19页 |
1.4.4 细胞蛋白浓度测定 | 第19页 |
1.4.5 SDS-PAGE | 第19-20页 |
1.4.6 Western blot实验 | 第20-21页 |
1.5 实验结果 | 第21-28页 |
1.5.1 洛铂和紫杉醇抑制细胞增殖的检测 | 第21-22页 |
1.5.2 洛铂联合紫杉醇在胃癌SGC-7901细胞中具有更强的细胞毒性 | 第22页 |
1.5.3 洛铂促进胃癌SGC-7901细胞G1/S期转换,却导致S期阻滞 | 第22-24页 |
1.5.4 紫杉醇导致人胃癌SGC-7901细胞G2/M期阻滞 | 第24-26页 |
1.5.5 洛铂联合紫杉醇导致人胃癌SGC-7901细胞S期和G2/M期阻滞 | 第26-28页 |
1.6 讨论 | 第28-30页 |
第二部分 卵巢癌组织中AKAP95和Cx43在G1/S期作用的研究 | 第30-44页 |
2.1 引言 | 第30页 |
2.2 实验材料 | 第30-31页 |
2.2.1 组织来源 | 第30页 |
2.2.2 主要试剂及耗材 | 第30-31页 |
2.2.3 主要仪器及设备 | 第31页 |
2.3 主要溶液的配置 | 第31-32页 |
2.4 实验方法 | 第32-33页 |
2.4.1 免疫组织化学S-P法 | 第32-33页 |
2.4.2 对照的设立 | 第33页 |
2.4.3 结果判断标准 | 第33页 |
2.4.4 统计分析 | 第33页 |
2.4.5 伦理 | 第33页 |
2.5 结果 | 第33-42页 |
2.5.1 AKAP95、Cx43、CyclinD1和CyclinE1蛋白在卵巢癌组织的表达 | 第33-34页 |
2.5.2 蛋白表达与临床病理学指标的关系 | 第34页 |
2.5.3 四种蛋白表达的关联性分析 | 第34-42页 |
2.6 讨论 | 第42-44页 |
第三部分 cyclin E2和LMW-cyclinE2的鉴定 | 第44-57页 |
3.1 引言 | 第44页 |
3.2 实验材料 | 第44-46页 |
3.2.1 实验细胞株 | 第44页 |
3.2.2 主要试剂及耗材 | 第44-45页 |
3.2.3 主要仪器及设备 | 第45-46页 |
3.3 主要溶液的配置 | 第46页 |
3.3.1 TAE缓冲液的配置 | 第46页 |
3.3.2 银染溶液配制 | 第46页 |
3.4 实验方法 | 第46-49页 |
3.4.1 PCR | 第46页 |
3.4.2 酶切 | 第46页 |
3.4.3 连接 | 第46-47页 |
3.4.4 转化 | 第47页 |
3.4.5 回收 | 第47页 |
3.4.6 细胞浆、核蛋白分离 | 第47-48页 |
3.4.7 免疫荧光实验 | 第48页 |
3.4.8 银染 | 第48-49页 |
3.5 实验结果 | 第49-56页 |
3.5.1 CCNE2过表达质粒及沉默质粒的构建 | 第49页 |
3.5.2 cyclinE2的定位 | 第49-51页 |
3.5.3 两者蛋白对CCNE2基因的特异性 | 第51-54页 |
3.5.4 cyclinE2的Co-IP和MS/MS | 第54-56页 |
3.6 结论 | 第56-57页 |
综述 低分子量的cyclinE: cyclinE的高效率形式 | 第57-62页 |
LMW-cyclinE的形成 | 第57-58页 |
LMW-cyclinE具有更高的效率 | 第58-59页 |
LMW-cyclinE的调控机制 | 第59-60页 |
LMW-cyclinE抵抗p21和p27的抑制作用 | 第59页 |
LMW-cyclinE抵抗抗雌激素药物作用 | 第59页 |
LMW-cyclinE诱导染色体不稳定 | 第59-60页 |
LMW-cyclinE与AKAP95 | 第60页 |
LMW-cyclinE其他调控机制 | 第60页 |
肿瘤组织中LMW-cyclinE的表达 | 第60-61页 |
展望 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
附录:缩略词表 | 第65-66页 |
攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |