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洛铂联合紫杉醇对人胃癌SGC-7901细胞作用机制及细胞周期相关蛋白在卵巢癌组织中表达的研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
前言第12-14页
第一部分 洛铂和紫杉醇对胃癌SGC-7901细胞联合作用机制研究第14-30页
    1.1 引言第14页
    1.2 实验材料第14-16页
        1.2.1 实验细胞株第14页
        1.2.2 主要试剂及耗材第14-16页
    1.3 主要溶液配制第16-18页
        1.3.1 细胞培养相关溶液配制第16-17页
        1.3.2 Western blot相关溶液的配制第17-18页
        1.3.3 MTT溶液配制第18页
        1.3.4 PI染液配制第18页
    1.4 试验方法第18-21页
        1.4.1 细胞复苏第18页
        1.4.2 细胞培养及冻存第18-19页
        1.4.3 细胞总蛋白提取第19页
        1.4.4 细胞蛋白浓度测定第19页
        1.4.5 SDS-PAGE第19-20页
        1.4.6 Western blot实验第20-21页
    1.5 实验结果第21-28页
        1.5.1 洛铂和紫杉醇抑制细胞增殖的检测第21-22页
        1.5.2 洛铂联合紫杉醇在胃癌SGC-7901细胞中具有更强的细胞毒性第22页
        1.5.3 洛铂促进胃癌SGC-7901细胞G1/S期转换,却导致S期阻滞第22-24页
        1.5.4 紫杉醇导致人胃癌SGC-7901细胞G2/M期阻滞第24-26页
        1.5.5 洛铂联合紫杉醇导致人胃癌SGC-7901细胞S期和G2/M期阻滞第26-28页
    1.6 讨论第28-30页
第二部分 卵巢癌组织中AKAP95和Cx43在G1/S期作用的研究第30-44页
    2.1 引言第30页
    2.2 实验材料第30-31页
        2.2.1 组织来源第30页
        2.2.2 主要试剂及耗材第30-31页
        2.2.3 主要仪器及设备第31页
    2.3 主要溶液的配置第31-32页
    2.4 实验方法第32-33页
        2.4.1 免疫组织化学S-P法第32-33页
        2.4.2 对照的设立第33页
        2.4.3 结果判断标准第33页
        2.4.4 统计分析第33页
        2.4.5 伦理第33页
    2.5 结果第33-42页
        2.5.1 AKAP95、Cx43、CyclinD1和CyclinE1蛋白在卵巢癌组织的表达第33-34页
        2.5.2 蛋白表达与临床病理学指标的关系第34页
        2.5.3 四种蛋白表达的关联性分析第34-42页
    2.6 讨论第42-44页
第三部分 cyclin E2和LMW-cyclinE2的鉴定第44-57页
    3.1 引言第44页
    3.2 实验材料第44-46页
        3.2.1 实验细胞株第44页
        3.2.2 主要试剂及耗材第44-45页
        3.2.3 主要仪器及设备第45-46页
    3.3 主要溶液的配置第46页
        3.3.1 TAE缓冲液的配置第46页
        3.3.2 银染溶液配制第46页
    3.4 实验方法第46-49页
        3.4.1 PCR第46页
        3.4.2 酶切第46页
        3.4.3 连接第46-47页
        3.4.4 转化第47页
        3.4.5 回收第47页
        3.4.6 细胞浆、核蛋白分离第47-48页
        3.4.7 免疫荧光实验第48页
        3.4.8 银染第48-49页
    3.5 实验结果第49-56页
        3.5.1 CCNE2过表达质粒及沉默质粒的构建第49页
        3.5.2 cyclinE2的定位第49-51页
        3.5.3 两者蛋白对CCNE2基因的特异性第51-54页
        3.5.4 cyclinE2的Co-IP和MS/MS第54-56页
    3.6 结论第56-57页
综述 低分子量的cyclinE: cyclinE的高效率形式第57-62页
    LMW-cyclinE的形成第57-58页
    LMW-cyclinE具有更高的效率第58-59页
    LMW-cyclinE的调控机制第59-60页
        LMW-cyclinE抵抗p21和p27的抑制作用第59页
        LMW-cyclinE抵抗抗雌激素药物作用第59页
        LMW-cyclinE诱导染色体不稳定第59-60页
        LMW-cyclinE与AKAP95第60页
        LMW-cyclinE其他调控机制第60页
    肿瘤组织中LMW-cyclinE的表达第60-61页
    展望第61-62页
参考文献第62-65页
附录:缩略词表第65-66页
攻读硕士学位期间发表学术论文情况第66-67页
致谢第67页

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