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弓形虫毒力因子ROP18促进神经细胞凋亡的机制研究

英文缩略词表(Abbreviation)第7-9页
中文摘要第9-12页
英文摘要第12-14页
1 前言第15-17页
2 实验材料第17-22页
    2.1 细胞株、菌株、虫株第17-18页
    2.2 质粒第18页
    2.3 实验动物第18页
    2.4 抗体第18页
    2.5 主要试剂第18-19页
    2.6 主要试剂溶液的配制第19-21页
    2.7 主要仪器与设备第21-22页
3 实验方法第22-34页
    3.1 弓形虫株的复苏与保种第22-23页
    3.2 重组质粒的构建及提取第23-29页
        3.2.1 引物设计及合成第23页
        3.2.2 RH虫株速殖子总RNA的提取及cDNA的合成第23-24页
        3.2.3 PCR扩增目的基因第24页
        3.2.4 凝胶回收第24-25页
        3.2.5 酶切第25-26页
        3.2.6 连接第26页
        3.2.7 TOP10感受态细胞的制备与质粒转化第26-27页
        3.2.8 重组质粒的小量提取第27-28页
        3.2.9 重组质粒的鉴定第28页
        3.2.10 质粒的中量提取第28-29页
        3.2.11 质粒的无菌化处理第29页
    3.3 细胞培养与转染第29-31页
        3.3.1 细胞培养第29-30页
        3.3.2 转染第30-31页
    3.4 免疫印迹(Immunoblotting,IB)第31-33页
        3.4.1 蛋白样品的制备第31页
        3.4.2 SDS-PAGE胶的配制第31-32页
        3.4.3 上样电泳第32页
        3.4.4 转膜第32页
        3.4.5 IB检测第32-33页
    3.5 脑组织免疫荧光第33-34页
        3.5.1 脑组织提取及组织切片第33页
        3.5.2 免疫荧光第33-34页
    3.6 流式细胞术第34页
4 结果第34-49页
    4.1 ROP18质粒的构建及在N2a神经细胞中的表达第34-36页
    4.2 高表达ROP18转基因弓形虫促进小鼠脑神经元的凋亡第36-39页
    4.3 ROP18促进N2a神经细胞的凋亡第39-42页
    4.4 ROP18通过内质网应激途径促进N2a神经细胞的凋亡第42-49页
        4.4.1 Caspase-12抑制剂预处理对ROP18诱导的神经细胞凋亡的影响第42-45页
        4.4.2 Caspase-12抑制剂预处理对ROP18引起的凋亡相关蛋白表达的影响第45-49页
5 讨论第49-50页
6 结论第50页
7 创新点第50页
8 参考文献第50-55页
附录第55-57页
致谢第57-58页
综述第58-67页
    参考文献第64-67页

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