| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第13-22页 |
| 1.1 鸽新城疫 | 第13-18页 |
| 1.1.1 流行病学 | 第13-14页 |
| 1.1.2 病原学 | 第14-17页 |
| 1.1.3 鸽新城疫疫苗 | 第17-18页 |
| 1.2 新城疫病毒反向遗传操作应用情况 | 第18-21页 |
| 1.2.1 反向遗传操作平台简介 | 第18-19页 |
| 1.2.2 反向遗传操作在NDV结构蛋白功能研究情况 | 第19-20页 |
| 1.2.3 利用反向遗传学操作系统研制疫苗 | 第20-21页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 PPMV-Ⅰ反向遗传操作平台的建立 | 第22-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 毒株、细胞、SPF鸡胚、鸡红细胞 | 第22页 |
| 2.1.2 质粒、菌株 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-25页 |
| 2.2.1 Pi110822基因组c DNA克隆及鉴定 | 第23页 |
| 2.2.2 将p UC18载体上的Pi110822基因组亚克隆至p OLTV5载体 | 第23-24页 |
| 2.2.3 病毒拯救用辅助质粒的构建 | 第24页 |
| 2.2.4 病毒的拯救与鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.5 病毒主要生物学特性测定 | 第25页 |
| 2.2.6 拯救病毒生长曲线的绘制 | 第25页 |
| 2.3 实验结果 | 第25-30页 |
| 2.3.1 pUC18-0822FL质粒酶切与测序鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3.2 pOLTV5-0822FL质粒酶切与测序鉴定 | 第26-27页 |
| 2.3.3 Pi110822辅助质粒的构建与鉴定 | 第27-29页 |
| 2.3.4 病毒的拯救鉴定 | 第29页 |
| 2.3.5 拯救病毒的主要生物学特性 | 第29-30页 |
| 2.3.6 拯救病毒株的生长动力学曲线 | 第30页 |
| 2.4 讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 PI110822弱毒株的拯救与鉴定 | 第32-37页 |
| 3.1 实验材料 | 第32页 |
| 3.1.1 主要实验材料 | 第32页 |
| 3.1.2 主要试剂与仪器 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-34页 |
| 3.2.1 将Pi110822毒株F蛋白裂解位点突变为La Sota毒株相应部分 | 第32-33页 |
| 3.2.2 Pi110822的F基因替换为La Sota F基因的重组质粒构建 | 第33页 |
| 3.2.3 毒株的拯救与鉴定 | 第33页 |
| 3.2.4 拯救毒株的生物学特性测定 | 第33页 |
| 3.2.5 拯救毒株的遗传稳定性测定 | 第33-34页 |
| 3.3 实验结果 | 第34-35页 |
| 3.3.1 重组质粒酶切及序列鉴定 | 第34页 |
| 3.3.2 重组毒株的拯救及鉴定 | 第34页 |
| 3.3.3 拯救病毒的主要生物学特性 | 第34-35页 |
| 3.3.4 拯救的弱毒株遗传稳定性评价 | 第35页 |
| 3.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 鸽新城疫病毒弱毒株免疫效果初步评价 | 第37-42页 |
| 4.1 实验材料 | 第37页 |
| 4.1.1 主要实验材料 | 第37页 |
| 4.1.2 主要试剂与仪器 | 第37页 |
| 4.2 实验方法 | 第37-38页 |
| 4.2.1 弱毒株安全性评价 | 第37页 |
| 4.2.2 弱毒株攻毒免疫保护性试验 | 第37页 |
| 4.2.3 Pi110822-FCS灭活苗在SPF鸡上初步进行免疫原性评价 | 第37-38页 |
| 4.3 实验结果 | 第38-40页 |
| 4.3.1 弱毒株的安全性评价 | 第38页 |
| 4.3.2 弱毒株攻毒免疫保护性试验 | 第38-40页 |
| 4.3.3 Pi110822-FCS弱毒株作为灭活苗的免疫效果评价 | 第40页 |
| 4.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第五章 全文结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简历 | 第49页 |
