| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstracts | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-22页 |
| 1.1 油菜素甾醇的研究进展 | 第13页 |
| 1.2 BRs信号转导通路及通路元件 | 第13-17页 |
| 1.2.1 BRs信号转导通路 | 第13-14页 |
| 1.2.2 BRs信号转导通路中的元件 | 第14-17页 |
| 1.3 BRs与植物生长发育研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3.1 BRs对抗逆性的影响 | 第17页 |
| 1.3.2 BRs对光形态建成的影响 | 第17页 |
| 1.3.3 BRs对根系生长的影响 | 第17-18页 |
| 1.3.4 BRs对花期的影响 | 第18页 |
| 1.3.5 BRs对衰老进程的影响 | 第18页 |
| 1.3.6 BRs对细胞伸长的影响 | 第18-19页 |
| 1.3.7 BRs对果实发育成熟的影响 | 第19页 |
| 1.4 乙烯对果实发育成熟的作用 | 第19-20页 |
| 1.5 BRs与其他激素间的关联 | 第20页 |
| 1.6 酵母双杂交技术原理 | 第20-21页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-34页 |
| 2.1 试验材料与试剂 | 第22-24页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 菌种及载体 | 第22页 |
| 2.1.4 主要培养基及试剂配制方法 | 第22-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-34页 |
| 2.2.1 ‘南果梨’果实EBR处理 | 第24页 |
| 2.2.2 ‘南果梨’果实1-MCP处理 | 第24页 |
| 2.2.3 ‘南果梨’果实乙烯利处理 | 第24页 |
| 2.2.4 ‘南果梨’果实硬度测定 | 第24页 |
| 2.2.5 ‘南果梨’果实乙烯生成量测定 | 第24-25页 |
| 2.2.6 ‘南果梨’果实总RNA提取 | 第25页 |
| 2.2.7 RNA反转录 | 第25页 |
| 2.2.8 半定量PCR | 第25-26页 |
| 2.2.9 qRT-PCR | 第26页 |
| 2.2.10 BZR1基因克隆 | 第26-27页 |
| 2.2.11 pGBKT_7-BZR1载体构建及自激活检验 | 第27-29页 |
| 2.2.12 ‘南果梨’酵母cDNA文库构建 | 第29-31页 |
| 2.2.13 文库质量计算 | 第31页 |
| 2.2.14 ‘南果梨’酵母双杂交及共转化验证 | 第31-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-47页 |
| 3.1 诱饵BZR1基因确定 | 第34-39页 |
| 3.1.1 EBR处理后果实乙烯生成量变化 | 第34页 |
| 3.1.2 乙烯利、1-MCP处理‘南果梨’果实后乙烯生成量及硬度变化 | 第34-35页 |
| 3.1.3 BRs合成及信号转导通路重要基因表达分析 | 第35-37页 |
| 3.1.4 pGBKT_7-BZR1载体自激活检验 | 第37-39页 |
| 3.2 ‘南果梨’果实cDNA文库构建 | 第39-42页 |
| 3.2.1 ‘南果梨’果实各时期总RNA提取 | 第39页 |
| 3.2.2 双链cDNA合成与纯化 | 第39-40页 |
| 3.2.3 cDNA文库构建及库质量计算 | 第40-41页 |
| 3.2.4 cDNA文库插入片段大小检测 | 第41-42页 |
| 3.3 ‘南果梨’酵母双杂交筛选 | 第42-47页 |
| 3.3.1 杂交效率计算 | 第42页 |
| 3.3.2 阳性克隆的筛选 | 第42-44页 |
| 3.3.3 BZR1互作蛋白的共转化验证 | 第44-45页 |
| 3.3.4 EBR处理后果实贮藏过程中ACO1相对表达量 | 第45-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 EBR处理对果实成熟的影响 | 第47页 |
| 4.2 乙烯利、1-MCP处理‘南果梨’果实后BZR1表达分析 | 第47-48页 |
| 4.3 ‘南果梨’酵母cDNA文库构建 | 第48-49页 |
| 4.4 酵母双杂交筛选 | 第49-50页 |
| 5 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 附录 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
