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基于代谢工程构建大肠杆菌L-赖氨酸高产菌

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
1 绪论第10-19页
    1.1 L-赖氨酸的应用第10-11页
        1.1.1 医学应用第10-11页
        1.1.2 食品应用第11页
        1.1.3 饲料添加剂第11页
    1.2 L-赖氨酸的生产方法第11-13页
        1.2.1 蛋白水解法第11页
        1.2.2 酶法第11-12页
        1.2.3 化学合成法第12页
        1.2.4 发酵法第12-13页
    1.3 L-赖氨酸的生物合成途径第13-14页
    1.4 L-赖氨酸生物合成途径中的关键酶第14-16页
        1.4.1 天冬氨酸激酶第14-15页
        1.4.2 二氢吡啶二羧酸合成酶第15页
        1.4.3 果糖-1,6-二磷酸酶第15页
        1.4.4 内消旋二氨基庚二酸脱氢酶第15-16页
    1.5 L-赖氨酸的国内外研究现状第16-17页
        1.5.1 L-赖氨酸的生产现状第16页
        1.5.2 L-赖氨酸的菌株选育现状第16-17页
    1.6 研究意义和主要研究内容第17-19页
        1.6.1 研究意义第17页
        1.6.2 主要研究内容第17-19页
2 材料和方法第19-32页
    2.1 材料第19-23页
        2.1.1 菌株和质粒第19-20页
        2.1.2 引物序列第20页
        2.1.3 分子生物学中常用的酶第20页
        2.1.4 基因工程常用试剂盒第20-21页
        2.1.5 常用试剂及药品第21页
        2.1.6 主要仪器第21-22页
        2.1.7 实验室常用培养基的配置第22页
        2.1.8 常用实验室抗生素及其他药品的配制第22-23页
    2.2 实验方法第23-32页
        2.2.1 菌种保藏的方法第23页
        2.2.2 细菌总DNA的提取第23-24页
        2.2.3 质粒提取第24-25页
        2.2.4 PCR扩增基因第25页
        2.2.5 DNA酶切和连接体系第25-26页
        2.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒转化第26-27页
        2.2.7 酶切鉴定有效克隆第27页
        2.2.8 琼脂糖凝胶电泳第27页
        2.2.9 DNA片段回收纯化第27-28页
        2.2.10 工程菌的培养和发酵第28页
        2.2.11 发酵液中细菌生长情况的检测第28页
        2.2.12 L-赖氨酸检测方法第28-32页
3 结果与讨论第32-55页
    3.1 单基因表达对大肠杆菌生产L-赖氨酸的影响第32-46页
        3.1.1 过表达天冬氨酸激酶基因第32-37页
        3.1.2 异源表达二氨基庚二酸脱氢酶基因第37-41页
        3.1.3 过表达果糖-1,6-二磷酸酶基因第41-46页
    3.2 多基因表达对大肠杆菌生产L-赖氨酸的影响第46-55页
        3.2.1 共表达天冬氨酸激酶基因和二氢吡啶二羧酸合成酶基因第46-51页
        3.2.2 共表达天冬氨酸激酶基因和二氨基庚二酸脱氢酶基因第51-52页
        3.2.3 共表达二氢吡啶二羧酸合成酶基因和二氨基庚二酸脱氢酶基因第52-53页
        3.2.4 共表达天冬氨酸激酶基因,二氢吡啶二羧酸合成酶基因和二氨基庚二酸脱氢酶基因第53-55页
4 结论与展望第55-57页
    4.1 结论第55-56页
    4.2 展望第56-57页
致谢第57-58页
参考文献第58-62页
附录第62-69页
    A 作者在攻读学位期间发表和已完成的论文及专利第62页
    B 部分序列信息第62-69页

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