| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| ABBREVIATIONS | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-39页 |
| 1.1 拟南芥雌雄配子体的结构特点 | 第11-13页 |
| 1.2 拟南芥雄配子体的发育过程及其遗传调控机制 | 第13-30页 |
| 1.2.1 拟南芥雄配子体的发生与发育过程 | 第13-15页 |
| 1.2.2 拟南芥花药早期发育的遗传调控机制 | 第15-16页 |
| 1.2.3 拟南芥雄配子体遗传发育中减数分裂过程的基因调控机制 | 第16-20页 |
| 1.2.4 拟南芥雄配子体遗传发育中有丝分裂过程的基因调控机制 | 第20-23页 |
| 1.2.5 拟南芥雄配子体遗传发育中表观遗传的调控机制 | 第23-30页 |
| 1.3 拟南芥雌配子体的遗传发育过程及其基因调控机制 | 第30-36页 |
| 1.3.1 拟南芥雌配子体的遗传发育过程 | 第30-32页 |
| 1.3.2 拟南芥雌配子体遗传发育中减数分裂过程的基因调控机制 | 第32-33页 |
| 1.3.3 拟南芥雌配子体遗传发育中有丝分裂过程的基因调控机制 | 第33-36页 |
| 1.4 拟南芥双受精过程 | 第36-38页 |
| 1.5 立题依据和研究意义 | 第38-39页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第39-64页 |
| 2.1 实验材料 | 第39页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第39页 |
| 2.1.2 菌株 | 第39页 |
| 2.1.3 质粒载体 | 第39页 |
| 2.1.4 工具酶、试剂盒和常用试剂 | 第39页 |
| 2.2 实验仪器 | 第39-40页 |
| 2.3 常用培养基及溶液的配制 | 第40-46页 |
| 2.3.1 常用培养基配制 | 第40-42页 |
| 2.3.2 常用溶液配制 | 第42-46页 |
| 2.4 实验方法 | 第46-64页 |
| 2.4.1 拟南芥的种植与管理 | 第46-47页 |
| 2.4.2 植物基因组DNA提取(Edwards法) | 第47页 |
| 2.4.3 TRIzol法小量提取拟南芥组织总RNA | 第47-48页 |
| 2.4.4 CTAB法小量提取拟南芥角果总RNA | 第48页 |
| 2.4.5 反转录cDNA的合成 | 第48-50页 |
| 2.4.6 目的基因的克隆 | 第50页 |
| 2.4.7 从琼脂糖凝胶中回收DNA | 第50-51页 |
| 2.4.8 DNA片段的连接 | 第51页 |
| 2.4.9 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第51-52页 |
| 2.4.10 大肠杆菌热激转化 | 第52页 |
| 2.4.11 重组质粒的鉴定 | 第52页 |
| 2.4.12 碱裂解法少量提取质粒DNA | 第52-53页 |
| 2.4.13 小提试剂盒提取质粒DNA | 第53页 |
| 2.4.14 农杆菌感受态细胞的制备 | 第53-54页 |
| 2.4.15 农杆菌的电击转化及鉴定 | 第54页 |
| 2.4.16 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第54-55页 |
| 2.4.17 GUS染色 | 第55页 |
| 2.4.18 Alexander染色(Alexander,1969) | 第55页 |
| 2.4.19 DAPI染色 | 第55页 |
| 2.4.20 扫描电子显微镜观察拟南芥花粉 | 第55页 |
| 2.4.21 透射电子显微镜观察拟南芥花粉 | 第55-56页 |
| 2.4.22 拟南芥野生型与突变体的正反交实验 | 第56页 |
| 2.4.23 基因枪转化法 | 第56-57页 |
| 2.4.24 转录激活活性分析 | 第57-58页 |
| 2.4.25 拟南芥雌配子体发育进程观察 | 第58-59页 |
| 2.4.26 石蜡切片 | 第59-60页 |
| 2.4.27 荧光素酶双分子互补实验(LCI) | 第60-61页 |
| 2.4.28 热不对称交错聚合酶链反应(TAIL-PCR) | 第61-64页 |
| 第三章 ataog1突变体的鉴定及AtAOG1基因的功能分析 | 第64-88页 |
| 3.1 ataog1突变体的鉴定和遗传分析 | 第64-65页 |
| 3.2 ataog1突变体的表型观察 | 第65-75页 |
| 3.2.1 ataog1纯合突变体植株的生长形态观察 | 第65-67页 |
| 3.2.2 ataog1突变体成熟花粉的形态观察 | 第67-68页 |
| 3.2.3 ataog1突变体异型花粉出现时期的确定 | 第68-71页 |
| 3.2.4 ataog1突变体花粉核型发育观察 | 第71-73页 |
| 3.2.5 ataog1突变体雌配子体发育进程的观察 | 第73-75页 |
| 3.3 AtAOG1基因的克隆和ataog1突变体的互补实验 | 第75-78页 |
| 3.3.1 TAIL-PCR确定ataog1突变体的Ds插入位点 | 第75-76页 |
| 3.3.2 ataog1突变体中AtAOG1基因表达量的确定 | 第76页 |
| 3.3.3 ataog1突变体的互补实验 | 第76-78页 |
| 3.4 AtAOG1基因的表达模式分析 | 第78-81页 |
| 3.5 GFP-AtAOG1融合蛋白的亚细胞定位分析 | 第81-83页 |
| 3.5.1 GFP-AtAOG1融合蛋白的瞬时表达定位 | 第81-82页 |
| 3.5.2 GFP-AtAOG1融合蛋白的稳定表达定位 | 第82-83页 |
| 3.6 AtAOG1基因的转录激活活性分析 | 第83-84页 |
| 3.7 ataog1突变体的花丝长度分析 | 第84-85页 |
| 3.8 AtAOG1基因突变对配子体发育所需基因表达量影响的分析 | 第85-88页 |
| 第四章 拟南芥MBD3基因的功能分析 | 第88-115页 |
| 4.1 mbd3突变体的生长形态观察 | 第88-89页 |
| 4.2 mbd3突变体的遗传分析 | 第89-90页 |
| 4.3 mbd3突变体成熟花粉的形态观察 | 第90-92页 |
| 4.4 mbd3突变体花粉出现异常时期的确定 | 第92-95页 |
| 4.5 mbd3突变体花药扫描电镜观察 | 第95-96页 |
| 4.6 mbd3突变体成熟花粉的体内萌发与体外萌发实验 | 第96-98页 |
| 4.7 mbd3突变体花丝长度分析 | 第98-99页 |
| 4.8 mbd3突变体的互补实验分析 | 第99-101页 |
| 4.9 MBD蛋白家族的基因分析及其家族成员的表达模式分析 | 第101-106页 |
| 4.9.1 MBD蛋白家族的基因分析 | 第101-102页 |
| 4.9.2 MBD3基因的表达模式分析 | 第102-104页 |
| 4.9.3 MBD蛋白家族基因的表达模式分析 | 第104-106页 |
| 4.10 GFP-MBD3融合蛋白的瞬时表达定位 | 第106-107页 |
| 4.11 GFP-MBD3融合蛋白的分段瞬时表达定位 | 第107-110页 |
| 4.12 在LCI系统中MBD3与该家族其它成员互作 | 第110-111页 |
| 4.13 mbd3突变体基因表达谱的RNA-sequence数据分析 | 第111-115页 |
| 第五章 总结与讨论 | 第115-118页 |
| 5.1 总结 | 第115页 |
| 5.2 讨论 | 第115-118页 |
| 参考文献 | 第118-127页 |
| 附录: 表1.本文所用引物列表 | 第127-131页 |
| 致谢 | 第131-133页 |
| 作者简介 | 第133页 |
