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人Mog1/Ran复合物在有丝分裂中的功能研究及Mog1/Ran/RanBP1复合物的结构和功能的初步研究

摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 Ran和其相互作用蛋白Mog1的结构与功能第14-32页
    1.1 引言第14页
    1.2 Ran的循环第14-16页
    1.3 Ran的功能第16-21页
        1.3.1 Ran在核质转运过程中的功能第16-18页
        1.3.2 Ran在有丝分裂过程中的功能第18-20页
        1.3.3 Ran在核膜形成过程中的功能第20-21页
    1.4 Ran等G蛋白在结构上的柔性区域第21-23页
        1.4.1 小G蛋白的结构的特点第21-22页
        1.4.2 GEF作用机理第22-23页
        1.4.3 GAP的作用机理第23页
    1.5 Ran的结构特征第23-25页
    1.6 Mog1的功能研究背景第25-27页
    1.7 Ran体系的各个成员在有丝分裂中的功能研究第27-32页
        1.7.1 Ran突变体对有丝分裂的影响第27-28页
        1.7.2 RCC1对对有丝分裂的作用第28-29页
        1.7.3 RanBP1蛋白调控有丝分裂纺锤体的组装第29-30页
        1.7.4 Ran体系的功能研究实验对研究Mog1在有丝分裂中的功能的启发第30-32页
第二章 Mog1/Ran复合物的结构和功能研究第32-76页
    2.1 引言第32-33页
    2.2 Ran的switch Ⅰ,switch Ⅱ和C端尾巴区域的构象研究第33-41页
        2.2.1 背景与实验原理第33-36页
        2.2.2 实验方法第36-39页
        2.2.3 实验结果第39-41页
    2.3 在XPLOR-NIH软件中利用RDC数据修正Mog1的Leu,Val侧链结构及复合物模中Mog1的结构修正第41-47页
        2.3.1 背景第41-42页
        2.3.2 计算结果第42-47页
    2.4 使用超高效液相色谱(UPLC)鉴定Mog1是Ran的核苷酸释放因子第47-48页
        2.4.1 实验方法第47页
        2.4.2 实验结果第47-48页
    2.5 荧光双分子互补(BIFC)实验证明Mog1与Ran在细胞内相互作用第48-54页
        2.5.1 背景和实验原理第48-50页
        2.5.2 实验方法第50-52页
        2.5.3 实验结果第52-54页
    2.6 siRNA干扰和过表达Mog1对有丝分裂的影响第54-68页
        2.6.1 背景和实验原理第54-55页
        2.6.2 实验方法第55-63页
        2.6.3 实验结果第63-68页
    2.7 利用Rango2 sensor证明Mog1能调控RanGTP浓度第68-74页
        2.7.1 背景和实验原理第68-71页
        2.7.2 实验方法第71-72页
        2.7.3 实验结果第72-74页
    2.8 小结与讨论第74-76页
第三章 Mog1/Ran/RanBP1复合物的结构和功能初步研究第76-90页
    3.1 引言第76-78页
    3.2 RanBP1的Ran结合结构域(RanBD)的边界选择第78-79页
        3.2.1 RanBP1的边界选择第78页
        3.2.2 RanBP1的载体克隆第78页
        3.2.3 RanBP1蛋白的表达纯化第78-79页
    3.3 RanBP1,Ran和Mog1的相互作用研究第79-80页
    3.4 用电子显微镜(EM)研究Ran/RanBP1/Mog1三元复合物的结构第80-84页
        3.4.1 背景介绍第80-82页
        3.4.2 实验方法第82页
        3.4.3 实验结果第82-84页
    3.5 利用BiFC-FRET初步探索Ran/RanBP1/Mog1三元复合物的功能第84-88页
        3.5.1 背景介绍第84-85页
        3.5.2 实验方法第85-87页
        3.5.3 实验结果第87页
        3.5.4 展望第87-88页
    3.6 小结与讨论第88-90页
第四章 总结与讨论第90-92页
参考文献第92-103页
附录第103-112页
致谢第112-114页
在读期间发表的学术论文与参加的学术会议第114页

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