| 摘要 | 第5-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 Ran和其相互作用蛋白Mog1的结构与功能 | 第14-32页 |
| 1.1 引言 | 第14页 |
| 1.2 Ran的循环 | 第14-16页 |
| 1.3 Ran的功能 | 第16-21页 |
| 1.3.1 Ran在核质转运过程中的功能 | 第16-18页 |
| 1.3.2 Ran在有丝分裂过程中的功能 | 第18-20页 |
| 1.3.3 Ran在核膜形成过程中的功能 | 第20-21页 |
| 1.4 Ran等G蛋白在结构上的柔性区域 | 第21-23页 |
| 1.4.1 小G蛋白的结构的特点 | 第21-22页 |
| 1.4.2 GEF作用机理 | 第22-23页 |
| 1.4.3 GAP的作用机理 | 第23页 |
| 1.5 Ran的结构特征 | 第23-25页 |
| 1.6 Mog1的功能研究背景 | 第25-27页 |
| 1.7 Ran体系的各个成员在有丝分裂中的功能研究 | 第27-32页 |
| 1.7.1 Ran突变体对有丝分裂的影响 | 第27-28页 |
| 1.7.2 RCC1对对有丝分裂的作用 | 第28-29页 |
| 1.7.3 RanBP1蛋白调控有丝分裂纺锤体的组装 | 第29-30页 |
| 1.7.4 Ran体系的功能研究实验对研究Mog1在有丝分裂中的功能的启发 | 第30-32页 |
| 第二章 Mog1/Ran复合物的结构和功能研究 | 第32-76页 |
| 2.1 引言 | 第32-33页 |
| 2.2 Ran的switch Ⅰ,switch Ⅱ和C端尾巴区域的构象研究 | 第33-41页 |
| 2.2.1 背景与实验原理 | 第33-36页 |
| 2.2.2 实验方法 | 第36-39页 |
| 2.2.3 实验结果 | 第39-41页 |
| 2.3 在XPLOR-NIH软件中利用RDC数据修正Mog1的Leu,Val侧链结构及复合物模中Mog1的结构修正 | 第41-47页 |
| 2.3.1 背景 | 第41-42页 |
| 2.3.2 计算结果 | 第42-47页 |
| 2.4 使用超高效液相色谱(UPLC)鉴定Mog1是Ran的核苷酸释放因子 | 第47-48页 |
| 2.4.1 实验方法 | 第47页 |
| 2.4.2 实验结果 | 第47-48页 |
| 2.5 荧光双分子互补(BIFC)实验证明Mog1与Ran在细胞内相互作用 | 第48-54页 |
| 2.5.1 背景和实验原理 | 第48-50页 |
| 2.5.2 实验方法 | 第50-52页 |
| 2.5.3 实验结果 | 第52-54页 |
| 2.6 siRNA干扰和过表达Mog1对有丝分裂的影响 | 第54-68页 |
| 2.6.1 背景和实验原理 | 第54-55页 |
| 2.6.2 实验方法 | 第55-63页 |
| 2.6.3 实验结果 | 第63-68页 |
| 2.7 利用Rango2 sensor证明Mog1能调控RanGTP浓度 | 第68-74页 |
| 2.7.1 背景和实验原理 | 第68-71页 |
| 2.7.2 实验方法 | 第71-72页 |
| 2.7.3 实验结果 | 第72-74页 |
| 2.8 小结与讨论 | 第74-76页 |
| 第三章 Mog1/Ran/RanBP1复合物的结构和功能初步研究 | 第76-90页 |
| 3.1 引言 | 第76-78页 |
| 3.2 RanBP1的Ran结合结构域(RanBD)的边界选择 | 第78-79页 |
| 3.2.1 RanBP1的边界选择 | 第78页 |
| 3.2.2 RanBP1的载体克隆 | 第78页 |
| 3.2.3 RanBP1蛋白的表达纯化 | 第78-79页 |
| 3.3 RanBP1,Ran和Mog1的相互作用研究 | 第79-80页 |
| 3.4 用电子显微镜(EM)研究Ran/RanBP1/Mog1三元复合物的结构 | 第80-84页 |
| 3.4.1 背景介绍 | 第80-82页 |
| 3.4.2 实验方法 | 第82页 |
| 3.4.3 实验结果 | 第82-84页 |
| 3.5 利用BiFC-FRET初步探索Ran/RanBP1/Mog1三元复合物的功能 | 第84-88页 |
| 3.5.1 背景介绍 | 第84-85页 |
| 3.5.2 实验方法 | 第85-87页 |
| 3.5.3 实验结果 | 第87页 |
| 3.5.4 展望 | 第87-88页 |
| 3.6 小结与讨论 | 第88-90页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-103页 |
| 附录 | 第103-112页 |
| 致谢 | 第112-114页 |
| 在读期间发表的学术论文与参加的学术会议 | 第114页 |
