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基于噬菌体模拟表位的有机磷农药多残留免疫检测方法的研究

中文摘要第8-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-26页
    1.1 有机磷农药残留现状第12页
    1.2 有机磷农药残留的危害第12-14页
        1.2.1 有机磷农药对人身体健康的影响第12-14页
            1.2.1.1 有机磷农药导致急性中毒第13页
            1.2.1.2 有机磷农药导致慢性中毒第13页
            1.2.1.3 有机磷农药致突变、致畸和致癌第13-14页
        1.2.2 有机磷农药残留对进出口贸易的影响第14页
        1.2.3 有机磷农药残留对农产品品质的影响第14页
    1.3 有机磷农药残留检测技术应用现状第14-17页
        1.3.1 酶抑制法第14-15页
        1.3.2 仪器分析法第15-16页
            1.3.2.1 气相色谱第15页
            1.3.2.2 高效液相色谱第15-16页
            1.3.2.3 气相或液相色谱-质谱联用第16页
        1.3.3 酶联免疫分析第16-17页
    1.4 有机磷农药残留ELISA分析的国内外研究进展第17-19页
    1.5 噬菌体展示技术第19-22页
        1.5.1 噬菌体展示系统的类型第19-20页
            1.5.1.1 丝状噬菌体展示系统第19-20页
            1.5.1.2 T4噬菌体展示系统第20页
            1.5.1.3 T7噬菌体展示系统第20页
            1.5.1.4 λ 噬菌体展示系统第20页
        1.5.2 噬菌体展示肽库第20页
        1.5.3 噬菌体展示肽库在小分子化合物免疫分析中的应用第20-22页
            1.5.3.1 筛选模拟表位第20-21页
            1.5.3.2 筛选抗免疫复合体第21-22页
    1.6 农药残留的提取净化技术第22-24页
        1.6.1 固相萃取第22-23页
        1.6.2 QuEChERS技术第23-24页
    1.7 研究目的及意义第24-25页
    1.8 研究内容第25-26页
2 材料与方法第26-36页
    2.1 实验材料第26-28页
        2.1.1 噬菌体展示肽库及宿主菌第26页
        2.1.2 抗体第26页
        2.1.3 培养基和缓冲溶液第26-27页
        2.1.4 实验仪器第27-28页
    2.2 实验方法第28-36页
        2.2.1 宿主菌液的制备第28页
        2.2.2 噬菌体随机展示库的生物淘选第28-31页
        2.2.3 噬菌体多克隆的检测第31-32页
        2.2.4 噬菌体单克隆的检测第32-33页
        2.2.5 噬菌体DNA的提取第33页
        2.2.6 噬菌体酶联免疫分析条件的优化第33-34页
            2.2.6.1 噬菌体的选择第33-34页
            2.2.6.2 甲醇浓度对P-ELISA检测灵敏度的影响第34页
            2.2.6.3 脱脂奶粉对P-ELISA检测灵敏度的影响第34页
            2.2.6.4 离子强度对P-ELISA检测灵敏度的影响第34页
            2.2.6.5 pH对P-ELISA检测灵敏度的影响第34页
        2.2.7 P-ELISA对20种有机磷农药的交叉反应第34页
        2.2.8 添加回收试验第34-36页
            2.2.8.1 样品的前处理第35页
            2.2.8.2 添加回收率测定第35-36页
3 结果与分析第36-51页
    3.1 噬菌体肽库的淘选结果第36-37页
    3.2 噬菌体多克隆的检测第37页
    3.3 噬菌体单克隆的检测第37-39页
    3.4 噬菌体DNA的测序及序列分析第39-40页
    3.5 噬菌体酶联免疫分析条件的优化第40-43页
        3.5.1 噬菌体的选择第40-41页
        3.5.2 甲醇浓度对P-ELISA检测灵敏度的影响第41页
        3.5.3 脱脂奶粉对P-ELISA检测灵敏度的影响第41-42页
        3.5.4 离子强度对P-ELISA检测灵敏度的影响第42-43页
        3.5.5 pH对P-ELISA检测灵敏度的影响第43页
    3.6 P-ELISA对20种有机磷农药的交叉反应第43-48页
    3.7 添加回收率测定第48-51页
        3.7.1 样品基质对检测体系的影响第48-49页
        3.7.2 添加回收率测定结果第49-51页
4 讨论第51-53页
5 结论第53-54页
参考文献第54-62页
致谢第62-63页
攻读学位期间发表论文情况第63页

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