中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
1 前言 | 第12-26页 |
1.1 有机磷农药残留现状 | 第12页 |
1.2 有机磷农药残留的危害 | 第12-14页 |
1.2.1 有机磷农药对人身体健康的影响 | 第12-14页 |
1.2.1.1 有机磷农药导致急性中毒 | 第13页 |
1.2.1.2 有机磷农药导致慢性中毒 | 第13页 |
1.2.1.3 有机磷农药致突变、致畸和致癌 | 第13-14页 |
1.2.2 有机磷农药残留对进出口贸易的影响 | 第14页 |
1.2.3 有机磷农药残留对农产品品质的影响 | 第14页 |
1.3 有机磷农药残留检测技术应用现状 | 第14-17页 |
1.3.1 酶抑制法 | 第14-15页 |
1.3.2 仪器分析法 | 第15-16页 |
1.3.2.1 气相色谱 | 第15页 |
1.3.2.2 高效液相色谱 | 第15-16页 |
1.3.2.3 气相或液相色谱-质谱联用 | 第16页 |
1.3.3 酶联免疫分析 | 第16-17页 |
1.4 有机磷农药残留ELISA分析的国内外研究进展 | 第17-19页 |
1.5 噬菌体展示技术 | 第19-22页 |
1.5.1 噬菌体展示系统的类型 | 第19-20页 |
1.5.1.1 丝状噬菌体展示系统 | 第19-20页 |
1.5.1.2 T4噬菌体展示系统 | 第20页 |
1.5.1.3 T7噬菌体展示系统 | 第20页 |
1.5.1.4 λ 噬菌体展示系统 | 第20页 |
1.5.2 噬菌体展示肽库 | 第20页 |
1.5.3 噬菌体展示肽库在小分子化合物免疫分析中的应用 | 第20-22页 |
1.5.3.1 筛选模拟表位 | 第20-21页 |
1.5.3.2 筛选抗免疫复合体 | 第21-22页 |
1.6 农药残留的提取净化技术 | 第22-24页 |
1.6.1 固相萃取 | 第22-23页 |
1.6.2 QuEChERS技术 | 第23-24页 |
1.7 研究目的及意义 | 第24-25页 |
1.8 研究内容 | 第25-26页 |
2 材料与方法 | 第26-36页 |
2.1 实验材料 | 第26-28页 |
2.1.1 噬菌体展示肽库及宿主菌 | 第26页 |
2.1.2 抗体 | 第26页 |
2.1.3 培养基和缓冲溶液 | 第26-27页 |
2.1.4 实验仪器 | 第27-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-36页 |
2.2.1 宿主菌液的制备 | 第28页 |
2.2.2 噬菌体随机展示库的生物淘选 | 第28-31页 |
2.2.3 噬菌体多克隆的检测 | 第31-32页 |
2.2.4 噬菌体单克隆的检测 | 第32-33页 |
2.2.5 噬菌体DNA的提取 | 第33页 |
2.2.6 噬菌体酶联免疫分析条件的优化 | 第33-34页 |
2.2.6.1 噬菌体的选择 | 第33-34页 |
2.2.6.2 甲醇浓度对P-ELISA检测灵敏度的影响 | 第34页 |
2.2.6.3 脱脂奶粉对P-ELISA检测灵敏度的影响 | 第34页 |
2.2.6.4 离子强度对P-ELISA检测灵敏度的影响 | 第34页 |
2.2.6.5 pH对P-ELISA检测灵敏度的影响 | 第34页 |
2.2.7 P-ELISA对20种有机磷农药的交叉反应 | 第34页 |
2.2.8 添加回收试验 | 第34-36页 |
2.2.8.1 样品的前处理 | 第35页 |
2.2.8.2 添加回收率测定 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-51页 |
3.1 噬菌体肽库的淘选结果 | 第36-37页 |
3.2 噬菌体多克隆的检测 | 第37页 |
3.3 噬菌体单克隆的检测 | 第37-39页 |
3.4 噬菌体DNA的测序及序列分析 | 第39-40页 |
3.5 噬菌体酶联免疫分析条件的优化 | 第40-43页 |
3.5.1 噬菌体的选择 | 第40-41页 |
3.5.2 甲醇浓度对P-ELISA检测灵敏度的影响 | 第41页 |
3.5.3 脱脂奶粉对P-ELISA检测灵敏度的影响 | 第41-42页 |
3.5.4 离子强度对P-ELISA检测灵敏度的影响 | 第42-43页 |
3.5.5 pH对P-ELISA检测灵敏度的影响 | 第43页 |
3.6 P-ELISA对20种有机磷农药的交叉反应 | 第43-48页 |
3.7 添加回收率测定 | 第48-51页 |
3.7.1 样品基质对检测体系的影响 | 第48-49页 |
3.7.2 添加回收率测定结果 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-53页 |
5 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第63页 |