| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第1章 文献综述 | 第15-53页 |
| 1.1 生物技术药物 | 第15-17页 |
| 1.1.1 生物技术药物的定义 | 第15页 |
| 1.1.2 生物技术药物发展趋势 | 第15-17页 |
| 1.1.3 重组蛋白质药物 | 第17页 |
| 1.2 高静水压生物技术 | 第17-32页 |
| 1.2.1 高压生物技术原理 | 第17-18页 |
| 1.2.2 高压设备 | 第18-20页 |
| 1.2.3 高压生物有机化学 | 第20-25页 |
| 1.2.4 高压技术在生物医药领域的应用 | 第25-31页 |
| 1.2.5 高压生物技术的未来 | 第31-32页 |
| 1.3 重组蛋白质生产下游过程常用技术 | 第32-48页 |
| 1.3.1 重组蛋白质的体外折叠复性 | 第32-38页 |
| 1.3.2 重组蛋白质的聚乙二醇修饰 | 第38-44页 |
| 1.3.3 铁蛋白作为小分子抗肿瘤药物靶向递送载体 | 第44-48页 |
| 1.4 论文立题依据及研究内容 | 第48-53页 |
| 1.4.1 高压复性重组蛋白包涵体的研究依据及内容 | 第48-49页 |
| 1.4.2 高压辅助重组蛋白质聚乙二醇定点修饰的研究依据及内容 | 第49-50页 |
| 1.4.3 高压用于铁蛋白装载抗肿瘤药物的研究依据及内容 | 第50-53页 |
| 第2章 重组人睫状神经营养因子包涵体的高压复性研究 | 第53-75页 |
| 2.1 研究背景 | 第53-54页 |
| 2.2 材料与设备 | 第54页 |
| 2.3 实验方法 | 第54-61页 |
| 2.3.1 rhCNTF的发酵培养 | 第54-55页 |
| 2.3.2 rhCNTF发酵菌体的收集与破碎 | 第55页 |
| 2.3.3 rhCNTF包涵体的洗涤 | 第55页 |
| 2.3.4 rhCNTF包涵体的稀释复性 | 第55-56页 |
| 2.3.5 rhCNTF包涵体的高压复性 | 第56-57页 |
| 2.3.6 高压复性rhCNTF样品的分离纯化 | 第57页 |
| 2.3.7 高压复性以及纯化rhCNTF结果的分析与表征 | 第57-61页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第61-72页 |
| 2.4.1 rhCNTF的发酵表达与包涵体收集 | 第61-62页 |
| 2.4.2 rhCNTF包涵体的稀释复性 | 第62-65页 |
| 2.4.3 rhCNTF包涵体的高压复性 | 第65-69页 |
| 2.4.4 高压复性rhCNTF样品的纯化与表征 | 第69-72页 |
| 2.5 本章小结 | 第72-75页 |
| 第3章 重组人干扰素β-1b包涵体的高压复性以及层析纯化研究 | 第75-115页 |
| 3.1 研究背景 | 第75页 |
| 3.2 材料与设备 | 第75-76页 |
| 3.3 实验方法 | 第76-82页 |
| 3.3.1 rhIFN β-1b的发酵培养 | 第76-77页 |
| 3.3.2 rhIFN β-1b发酵菌体的收集与破碎 | 第77页 |
| 3.3.3 rhIFN β-1b包涵体的洗涤 | 第77-78页 |
| 3.3.4 rhIFN β-1b的常规分离纯化 | 第78页 |
| 3.3.5 rhIFN β-1b包涵体的高压复性 | 第78-79页 |
| 3.3.6 高压复性rhIFN β-1b样品的层析纯化 | 第79-80页 |
| 3.3.7 高压复性以及纯化rhIFNβ-1b结果的分析与表征 | 第80-82页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第82-111页 |
| 3.4.1 rhIFN β-1b的发酵表达与包涵体洗涤 | 第82-84页 |
| 3.4.2 传统有机相抽提技术制备rhIFN β-1b | 第84-85页 |
| 3.4.3 rhIFN β-1b包涵体的间接高压复性 | 第85-89页 |
| 3.4.4 rhIFN β-1b包涵体的直接高压复性 | 第89-99页 |
| 3.4.5 高压复性rhIFN β-1b样品的层析纯化 | 第99-111页 |
| 3.5 本章小结 | 第111-115页 |
| 第4章 高压辅助蛋白质的聚乙二醇定点修饰研究 | 第115-143页 |
| 4.1 研究背景 | 第115-116页 |
| 4.2 材料与设备 | 第116页 |
| 4.3 实验方法 | 第116-121页 |
| 4.3.1 高压修饰反应 | 第116-119页 |
| 4.3.2 修饰反应结果的分析表征 | 第119-120页 |
| 4.3.3 修饰样品纯化 | 第120-121页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第121-140页 |
| 4.4.1 高压下rhCNTF游离巯基定点PEG修饰 | 第121-131页 |
| 4.4.2 高压下rhG-CSF定点PEG修饰 | 第131-140页 |
| 4.5 本章小结 | 第140-143页 |
| 第5章 高压用于重链铁蛋白装载抗肿瘤药物阿霉素的研究 | 第143-169页 |
| 5.1 研究背景 | 第143-144页 |
| 5.2 材料与设备 | 第144-145页 |
| 5.3 实验方法 | 第145-151页 |
| 5.3.1 通过高压处理制备HFn装载DOX药物 | 第145-146页 |
| 5.3.2 HFn-DOX纳米颗粒中DOX装载量的计算 | 第146-147页 |
| 5.3.3 结构分析与表征 | 第147-148页 |
| 5.3.4 检测HFn-DOX样品储存时药物的泄露情况 | 第148页 |
| 5.3.5 体内外生物活性检测 | 第148-151页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第151-166页 |
| 5.4.1 HFn-DOX纳米颗粒的制备与表征 | 第151-158页 |
| 5.4.2 HFn-DOX的体外稳定性研究 | 第158-159页 |
| 5.4.3 HFn-DOX的药代动力学性质 | 第159-160页 |
| 5.4.4 HFn-DOX的体内外生物活性检测 | 第160-164页 |
| 5.4.5 高压下HFn装载小分子药物DOX过程的机理分析与讨论 | 第164-166页 |
| 5.5 本章小结 | 第166-169页 |
| 第6章 结论与展望 | 第169-179页 |
| 6.1 本文的研究结果 | 第169-174页 |
| 6.2 创新点总结 | 第174-176页 |
| 6.3 展望 | 第176-179页 |
| 参考文献 | 第179-199页 |
| 附录A 英文缩写对照表 | 第199-201页 |
| 附录B 图目录 | 第201-207页 |
| 附录C 表目录 | 第207-209页 |
| 致谢 | 第209-211页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第211-213页 |
