| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 1 引言 | 第11-27页 |
| 1.1 研究背景 | 第11-12页 |
| 1.1.1 猪的应激及其影响 | 第11页 |
| 1.1.2 猪应激解决的途径 | 第11-12页 |
| 1.2 研究动态 | 第12-25页 |
| 1.2.1 分子遗传学的研究方法 | 第12-13页 |
| 1.2.2 应激的生理机制 | 第13-15页 |
| 1.2.3 促肾上腺皮质激素释放激素及其受体 | 第15-18页 |
| 1.2.4 促肾上腺皮质激素释放激素受体基因 | 第18-19页 |
| 1.2.5 其他相关技术 | 第19-25页 |
| 1.3 研究目的 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-41页 |
| 2.1 试验动物及材料 | 第27页 |
| 2.2 主要仪器设备 | 第27-28页 |
| 2.3 主要试剂药品 | 第28-29页 |
| 2.4 主要分子生物学软件和互联网资源 | 第29-30页 |
| 2.5 主要实验方法 | 第30-41页 |
| 2.5.1 猪组织总RNA 的提取 | 第30-32页 |
| 2.5.2 引物设计与合成 | 第32-33页 |
| 2.5.3 目的基因的克隆和测序 | 第33-36页 |
| 2.5.4 目的基因克隆过程 | 第36-37页 |
| 2.5.5 生物信息学分析 | 第37-38页 |
| 2.5.6 荧光定量PCR 检测CRHR1、CRHR2 基因mRNA 在猪脑组织中的表达.. | 第38-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-66页 |
| 3.1 基因克隆 | 第41-46页 |
| 3.1.1 猪CRHR 基因编码序列的克隆 | 第41-42页 |
| 3.1.2 猪CRHR1、CRHR2 基因核酸序列分析 | 第42-46页 |
| 3.2 功能预测 | 第46-58页 |
| 3.2.1 蛋白质序列的基本性质分析 | 第46-48页 |
| 3.2.2 蛋白质跨膜区域分析 | 第48-49页 |
| 3.2.3 蛋白质信号肽分析和亚细胞定位 | 第49-51页 |
| 3.2.4 基于motif、结构位点、结构功能数据库的蛋白质功能预测 | 第51-54页 |
| 3.2.5 蛋白质超家族分析 | 第54-56页 |
| 3.2.6 蛋白质二级结构预测 | 第56-57页 |
| 3.2.7 蛋白质三级结构预测 | 第57-58页 |
| 3.3 基因表达规律研究 | 第58-66页 |
| 3.3.1 仔猪大脑总RNA 的提取 | 第58-59页 |
| 3.3.2 实时荧光定量PCR 检测CRHR1、CRHR2 基因在猪不同组织的表达 | 第59-66页 |
| 4 讨论 | 第66-72页 |
| 4.1 基因的克隆方法 | 第66页 |
| 4.2 序列分析 | 第66-67页 |
| 4.3 生物信息学的应用 | 第67-68页 |
| 4.4 猪CRHR1 和CRHR2 基因MRNA 表达规律的探讨 | 第68-70页 |
| 4.4.1 利用荧光定量PCR 进行相对定量的条件优化 | 第68-69页 |
| 4.4.2 统计学分析 | 第69-70页 |
| 4.5 本课题进一步研究展望 | 第70-72页 |
| 5 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-81页 |
| 附录 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第85页 |
| 攻读硕士学位期间申请的专利 | 第85页 |
| 攻读硕士学位期间向 GenBank 提交序列 | 第85-87页 |
