中文摘要 | 第4-5页 |
英文摘要 | 第5页 |
主要符号表 | 第9-10页 |
前言 | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 番茄主要病毒病发生概况 | 第11页 |
1.2 两种主要病毒研究概况 | 第11-15页 |
1.2.1 烟草花叶病毒 | 第11-13页 |
1.2.1.1 烟草花叶病毒分子生物学研究 | 第12页 |
1.2.1.2 烟草花叶病毒基因组研究 | 第12-13页 |
1.2.1.3 烟草花叶病毒分类研究 | 第13页 |
1.2.2 黄瓜花叶病毒 | 第13-15页 |
1.2.2.1 CMV 的基因组研究 | 第14-15页 |
1.2.2.2 CMV 株系划分的研究 | 第15页 |
1.3 植物病毒主要检测方法 | 第15-18页 |
1.3.1 生物学检测法 | 第15页 |
1.3.2 电子显微镜检测技术 | 第15-16页 |
1.3.3 血清学方法 | 第16页 |
1.3.3.1 琼脂双扩散试验 | 第16页 |
1.3.3.2 酶联免疫吸附法(ELISA) | 第16页 |
1.3.4 dsRNA技术 | 第16页 |
1.3.5 基本分子生物学方法 | 第16-18页 |
1.3.5.1 核酸杂交技术 | 第16页 |
1.3.5.2 PCR 技术 | 第16-17页 |
1.3.5.3 基因芯片技术 | 第17-18页 |
第二章 材料和方法 | 第18-26页 |
2.1 材料 | 第18-19页 |
2.1.1 毒源 | 第18页 |
2.1.2 抗血清 | 第18页 |
2.1.3 质粒和载体 | 第18页 |
2.1.4 酶及试剂 | 第18页 |
2.1.5 主要仪器 | 第18页 |
2.1.6 引物 | 第18-19页 |
2.2 方法 | 第19-26页 |
2.2.1 毒源的采集 | 第19页 |
2.2.2 毒源的分离 | 第19页 |
2.2.3 病毒的生物学测定 | 第19页 |
2.2.4 侵染性试验 | 第19页 |
2.2.5 病毒提纯 | 第19-20页 |
2.2.5.1 PTV-1分离物的提纯 | 第19-20页 |
2.2.5.2 PTV-2分离物的提纯 | 第20页 |
2.2.6 dsRNA的提取 | 第20-21页 |
2.2.7 提纯病毒的变性蛋白电泳(SDS-PAGE) | 第21页 |
2.2.8 血清学试验 | 第21页 |
2.2.8.1 琼脂免疫双扩散试验 | 第21页 |
2.2.9 基本分子生物学方法 | 第21-26页 |
2.2.9.1 病毒病原总 RNA 的提取 | 第22页 |
2.2.9.2 PCR检测体系的建立及其优化 | 第22-23页 |
2.2.9.3 DNA片段的回收纯化 | 第23页 |
2.2.9.4 重组质粒的构建 | 第23-24页 |
2.2.9.5 感受态细胞制备及重组质粒的转化 | 第24页 |
2.2.9.6 重组质粒的抽提 | 第24-25页 |
2.2.9.7 重组质粒的 PCR 鉴定及酶切鉴定 | 第25页 |
2.2.9.8 PCR产物序列测定 | 第25页 |
2.2.9.9 PCR 产物DNA 序列同源性比较 | 第25-26页 |
第三章 结果与分析 | 第26-40页 |
3.1 寄主范围及反应 | 第26-29页 |
3.2 侵染性试验 | 第29-31页 |
3.3 dsRNA的大小 | 第31-32页 |
3.4 血清学反应 | 第32-33页 |
3.4.1 琼脂双扩散试验 | 第32-33页 |
3.5 病毒外壳蛋白分析 | 第33页 |
3.6 基因组总 RNA 的提取 | 第33页 |
3.7 PCR检测体系的建立及其优化 | 第33-35页 |
3.8 RT-PCR试验结果 | 第35页 |
3.9 PTV-2重组质粒的酶切鉴定 | 第35-36页 |
3.10 序列测定与比较分析 | 第36-40页 |
3.10.1 PTV-2 CP 基因序列 | 第36-37页 |
3.10.2 PTV-2 CP 基因序列分析 | 第37-40页 |
第四章 结论与讨论 | 第40-41页 |
4.1 从引起条斑坏死的新疆加工番茄中,分离出TMV 和CMV | 第40页 |
4.2 明确了新疆加工番茄黄瓜花叶分离物 PTV-2 为 CMV 亚组Ⅰ | 第40页 |
4.3 关于TMV和CMV复合感染加工番茄的致病机制 | 第40页 |
4.4 关于加工番茄病毒病的防治 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
附录 | 第47-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51-52页 |
导师评语 | 第52页 |