摘 要 | 第4-5页 |
英文摘要 | 第5页 |
缩略词表 | 第6-8页 |
前 言 | 第8-10页 |
第一部分 实验研究 | 第10-36页 |
实验一猪胸膜肺炎放线杆菌外膜脂蛋白基因的克隆及序列分析 | 第10-22页 |
1 材料与方法 | 第10-15页 |
1.1 实验材料 | 第10-11页 |
1.1.1 菌株 | 第10页 |
1.1.2 载体和菌种 | 第10页 |
1.1.3 其它主要试剂 | 第10页 |
1.1.4 主要仪器设备 | 第10页 |
1.1.5 引物 | 第10-11页 |
1.2 方法 | 第11-15页 |
1.2.1 细菌的培养 | 第11页 |
1.2.2 基因组DNA的提取 | 第11-12页 |
1.2.3 PCR扩增0ML基因 | 第12页 |
1.2.4 0ML基冈的克隆 | 第12-15页 |
1.2.5 核酸序列分析 | 第15页 |
2 结果 | 第15-20页 |
2.1 0ML基冈的PCR扩增 | 第15页 |
2.2 目的片段的克隆与鉴定 | 第15页 |
2.3 QH-l株与HN一7株OML基冈序列比较 | 第15-16页 |
2.4 与其他参考血清型标准株的同源性比较 | 第16-20页 |
3 讨论 | 第20页 |
4 结论 | 第20-22页 |
实验二猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立 | 第22-27页 |
1 材料与方法 | 第22-23页 |
1.1 实验材料 | 第22-23页 |
1.1.1 凶株 | 第22页 |
1.1.2 酶及试剂 | 第22页 |
1.1.3 引物 | 第22页 |
1.1.4 主要仪器设备 | 第22-23页 |
1.2 方法 | 第23页 |
1.2.1 菌株的培养 | 第23页 |
1.2.2 基因DNA的提取 | 第23页 |
1.2.3 PCR扩增 | 第23页 |
1.2.4 特异性检测 | 第23页 |
1.2.5 敏感性检测 | 第23页 |
1.2.6 临床分离株的PCR检测 | 第23页 |
2 结果 | 第23-25页 |
2.1 PCR扩增 | 第23页 |
2.2 PCR的特异性检测 | 第23-24页 |
2.3 PCR的敏感性检测2l | 第24页 |
2.4 临床样品的PCR检测 | 第24-25页 |
3 讨论 | 第25-26页 |
4 结论 | 第26-27页 |
实验三猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型QH一1株OML基因的原核表达 | 第27-36页 |
1 材料与方法 | 第27-32页 |
1.1 实验材料 | 第27-28页 |
1.1.1 菌株 | 第27页 |
1.1.2 载体和菌种 | 第27页 |
1.1.3 酶和试剂 | 第27页 |
1.1.4 引物 | 第27-28页 |
1.1.5 主要仪器设备 | 第28页 |
1.2 方法 | 第28-32页 |
1.2.1 原核表达载体的构建 | 第28-30页 |
1.2.2 阳性重组表达质粒的诱导表达 | 第30页 |
1.2.3 表达产物的检测 | 第30-32页 |
2 结果 | 第32-34页 |
2.1 cAppOML-1基冈的PCR扩增 | 第32页 |
2.2 重组表达质粒pPRocAppOml-1的鉴定 | 第32页 |
2.3 表达产物的检测 | 第32-34页 |
3 讨论 | 第34-35页 |
4 结论 | 第35-36页 |
第二部分 文献综述猪传染性胸膜肺炎的研究进展 | 第36-45页 |
参考文献 | 第45-50页 |
致 谢 | 第50-51页 |
附录 | 第51页 |