| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-14页 |
| 1.1 黄单胞菌概述 | 第8页 |
| 1.2 植物先天免疫反应 | 第8-11页 |
| 1.2.1 PAMPs诱导的植物PTI反应 | 第9页 |
| 1.2.2 效应子诱导的植物ETI反应 | 第9-11页 |
| 1.3 细菌分泌系统及效应蛋白的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.3.1 Ⅲ型分泌系统的组成及调控 | 第12页 |
| 1.3.2 hpa基因的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第13-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-21页 |
| 2.1 实验材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 菌株 | 第14页 |
| 2.1.2 质粒 | 第14页 |
| 2.1.3 植物材料 | 第14页 |
| 2.1.4 试剂 | 第14页 |
| 2.1.5 培养基 | 第14-15页 |
| 2.1.6 实验仪器及器材 | 第15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-21页 |
| 2.2.1 Xcc8004基因组DNA提取 | 第15页 |
| 2.2.2 质粒小量提取 | 第15页 |
| 2.2.3 三亲本接合法敲除Xcc8004菌株的hpaA基因 | 第15-16页 |
| 2.2.4 △hpaA突变体互补菌株的构建 | 第16页 |
| 2.2.5 甘蓝、萝卜、白菜、拟南芥和烟草接种 | 第16页 |
| 2.2.6 His标签融合蛋白的纯化 | 第16-17页 |
| 2.2.7 GST标签融合蛋白的纯化 | 第17页 |
| 2.2.8 GST pull-down实验 | 第17-18页 |
| 2.2.9 蛋白分泌检测 | 第18页 |
| 2.2.10 氯化铯梯度离心大量提取质粒 | 第18页 |
| 2.2.11 原生质体制备及转化 | 第18-19页 |
| 2.2.12 亚细胞定位 | 第19页 |
| 2.2.13 荧光素酶双报告系统分析 | 第19页 |
| 2.2.14 转基因植物的构建 | 第19-20页 |
| 2.2.15 苯胺蓝染色观察胼坻质沉积 | 第20-21页 |
| 3 结果与分析 | 第21-37页 |
| 3.1 hpaA基因缺失突变体的构建 | 第21-22页 |
| 3.2 HpaA_(Xcc8004)对于Xcc8004在甘蓝、萝卜、白菜的全毒性是必须的 | 第22-23页 |
| 3.3 HpaA_(Xcc8004)对于Xcc8004在拟南芥上的全毒性是必须的 | 第23-24页 |
| 3.4 HpaA_(Xcc8004)对于Xcc8004在烟草上引起的超敏反应是必须的 | 第24-25页 |
| 3.5 HpaA_(Xcc8004)影响某些Ⅲ型分泌蛋白的分泌 | 第25-27页 |
| 3.6 HpaA_(Xccs004)与被其影响分泌的蛋白不发生互作 | 第27-28页 |
| 3.7 HpaA_(Xcc8004)能与分子伴侣HpaB发生互作 | 第28-30页 |
| 3.8 HpaA_(Xcc8004)的分泌依赖于Ⅲ型分泌系统 | 第30页 |
| 3.9 HpaA_(Xcc8004)定位于细胞核 | 第30-32页 |
| 3.10 HpaA_(Xcc8004)促进flg22诱导的标签基因FRKl的表达 | 第32-33页 |
| 3.11 HpaA_(Xcc8004)转基因植株的构建 | 第33-34页 |
| 3.12 HpaA_(Xcc8004)转基因植株可以减弱细菌在拟南芥上发黄的表型 | 第34页 |
| 3.13 HpaA_(Xcc8004)转基因植株抑制X_(cc8004)在拟南芥上的生长 | 第34-35页 |
| 3.14 HpaA_(Xcc8004)可增强flg22诱导的植物体内活性氧水平 | 第35-36页 |
| 3.15 HpaA_(Xcc8004)可增强flg22诱导的胼胝质沉积 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 附录 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46页 |
