| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| 1 HSP概况 | 第10-13页 |
| 1.1 HSP的研究历史及现状 | 第10-11页 |
| 1.2 热休克蛋白的分类与分布 | 第11-13页 |
| 1.2.1 HSP的分类 | 第11-13页 |
| 1.2.1.1 HSP90家族 | 第11页 |
| 1.2.1.2 HSP70家族 | 第11-12页 |
| 1.2.1.3 HSP60家族 | 第12-13页 |
| 1.2.2 热休克蛋白的分布 | 第13页 |
| 2 HSP70研究概况 | 第13-21页 |
| 2.1 hsp70基因特征 | 第13-15页 |
| 2.2 hsp70基因的转录调控 | 第15-18页 |
| 2.2.1 热休克元件 | 第15-16页 |
| 2.2.2 热休克转录因子 | 第16-17页 |
| 2.2.3 hsp基因转录调控过程 | 第17-18页 |
| 2.3 HSP70生物学功能 | 第18-21页 |
| 2.3.1 “分子伴侣”功能 | 第18-19页 |
| 2.3.2 HSP70与耐热性 | 第19-20页 |
| 2.3.3 抗氧化功能 | 第20页 |
| 2.3.4 抗细胞凋亡作用 | 第20-21页 |
| 2.3.5 HSP70与免疫作用 | 第21页 |
| 3 昆虫HSP70研究概况 | 第21-23页 |
| 4 本研究的内容及意义 | 第23-24页 |
| 第二章 小菜蛾hsp70加基因克隆 | 第24-40页 |
| 1 材料与方法 | 第24-30页 |
| 1.1 供试虫源 | 第24页 |
| 1.2 仪器、药品及试剂 | 第24-25页 |
| 1.2.1 主要仪器 | 第24页 |
| 1.2.2 生化试剂 | 第24页 |
| 1.2.3 药品配置 | 第24-25页 |
| 1.3 Px-hsp70基因克隆 | 第25-29页 |
| 1.3.1 设计3'RACE引物 | 第25页 |
| 1.3.2 总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 1.3.3 3'RACE cDNA第一链合成 | 第26-27页 |
| 1.3.4 3'RACE巢式PCR | 第27页 |
| 1.3.5 PCR产物纯化 | 第27-28页 |
| 1.3.6 载体连接及转化 | 第28-29页 |
| 1.3.7 序列分析 | 第29页 |
| 1.4 扩增Px-hsp70基因ORF及序列分析 | 第29-30页 |
| 1.4.1 PCR体系 | 第30页 |
| 1.4.2 序列分析 | 第30页 |
| 2 结果与分析 | 第30-39页 |
| 2.1 hsp70 3' RACE | 第30-31页 |
| 2.2 Px-hsp70 ORF的克隆 | 第31-35页 |
| 2.3 Px-hsp70基因序列分析 | 第35页 |
| 2.4 小菜蛾HSP70的氨基酸组成 | 第35-36页 |
| 2.5 Px-hsp70基因多序列比对及进化树分析 | 第36-39页 |
| 3 讨论与结论 | 第39-40页 |
| 第三章 小菜蛾hsp70基因热激表达分析 | 第40-47页 |
| 1 材料与方法 | 第40-43页 |
| 1.1 材料 | 第40页 |
| 1.2 药品、试剂及仪器 | 第40页 |
| 1.2.1 生化试剂 | 第40页 |
| 1.2.2 主要仪器 | 第40页 |
| 1.3 Px-hsp70 mRNA表达量测定 | 第40-43页 |
| 1.3.1 温度处理 | 第40-41页 |
| 1.3.2 小菜蛾总RNA的提取 | 第41页 |
| 1.3.3 cDNA第一链的合成 | 第41页 |
| 1.3.4 荧光定量引物设计 | 第41-42页 |
| 1.3.5 引物特异性检测 | 第42页 |
| 1.3.5.1 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第42页 |
| 1.3.5.2 融解曲线检测 | 第42页 |
| 1.3.6 制作内参基因与目的基因标准曲线 | 第42-43页 |
| 1.3.7 目的基因表达量的测定 | 第43页 |
| 1.4 数据分析 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-46页 |
| 2.1 荧光定量PCR引物特异性检测 | 第43-44页 |
| 2.1.1 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第43-44页 |
| 2.1.2 融解曲线分析 | 第44页 |
| 2.2 制作内参基因与目的基因标准曲线 | 第44-45页 |
| 2.3 小菜蛾hsp70基因热激后mRNA表达量分析 | 第45-46页 |
| 3 讨论与结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-55页 |
| 致谢 | 第55页 |