中文摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
中英文缩略语表 | 第9-11页 |
第一章 前言 | 第11-21页 |
1.1 骨疾病 | 第11-14页 |
1.1.1 骨疾病概述 | 第11页 |
1.1.2 骨细胞的细胞生物学概述 | 第11-12页 |
1.1.3 Wnt/β-Catenin信号通路 | 第12-14页 |
1.2 脂肪干细胞概述 | 第14-18页 |
1.2.1 干细胞概述 | 第14-15页 |
1.2.2 脂肪干细胞概述 | 第15页 |
1.2.3 调控脂肪来源的干细胞增殖和成骨分化的可能机制 | 第15-17页 |
1.2.4 组织工程学中脂肪来源的干细胞的在骨疾病的临床应用 | 第17-18页 |
1.3 千金藤碱 | 第18-20页 |
1.3.1 千金藤碱概述 | 第18页 |
1.3.2 千金藤碱药理作用 | 第18-19页 |
1.3.3 千金藤碱与成骨分化 | 第19-20页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
第二章 试验材料与方法 | 第21-44页 |
2.1 材料与仪器 | 第21-28页 |
2.1.1 主要的仪器和设备 | 第21-23页 |
2.1.2 试剂与耗材 | 第23-25页 |
2.1.3 细胞 | 第25页 |
2.1.4 主要溶液配制 | 第25-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-44页 |
2.2.1 细胞培养 | 第28-31页 |
2.2.2 鉴定脂肪干细胞相关操作 | 第31-32页 |
2.2.3 药物干预及成骨分化作用 | 第32-35页 |
2.2.4 实时荧光定量RT-qPCR法检测相关基因表达 | 第35-38页 |
2.2.5 Western Blotting检测相关蛋白表达 | 第38-42页 |
2.2.6 免疫荧光染色-共聚焦显微镜观察千金藤碱对Wnt/β-Catenin通路的影响 | 第42页 |
2.2.7 流式细胞仪鉴定ASCs表面标志物 | 第42-43页 |
2.2.8 统计学分析 | 第43-44页 |
第三章 实验结果与分析 | 第44-57页 |
3.1 ASCs有典型间充质干细胞的免疫表型和定向分化能力 | 第44-46页 |
3.1.1 ASCs免疫表型的鉴定 | 第44-45页 |
3.1.2 ASCs定向分化能力的检验 | 第45-46页 |
3.2 千金藤碱促进ASCs的增殖及干性维持的作用 | 第46-48页 |
3.2.1 千金藤碱对ASCs毒性的作用 | 第46-47页 |
3.2.2 千金藤碱对ASCs促增殖和活性 | 第47-48页 |
3.3 千金藤碱对人体脂肪来源的干细胞成骨分化的作用 | 第48-53页 |
3.3.1 千金藤碱促进ASCs成骨分化作用的最佳浓度 | 第50-51页 |
3.3.2 千金藤碱促进ASCs成骨分化作用时间的确定 | 第51-52页 |
3.3.3 千金藤碱促进ASCs成骨分化对细胞外基质的影响 | 第52-53页 |
3.4 千金藤碱对ASCs成骨分化是通过Wnt/β-Catenin通路调控的 | 第53-56页 |
3.4.1 Wnt/β-Catenin信号通路在千金藤碱ASCs成骨分化过程被激活 | 第53-55页 |
3.4.2 千金藤碱促进 β-Catenin向ASCs细胞核转移 | 第55-56页 |
3.4.3 ERK是激活磷酸化的GSK-3β的充分条件 | 第56页 |
3.5 结论 | 第56-57页 |
第四章 讨论与展望 | 第57-60页 |
4.1 讨论 | 第57-59页 |
4.2 创新与展望 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-67页 |
在校期间发表论文情况 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |