| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8页 |
| 缩略词索引 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-25页 |
| 1.1 乳腺癌研究进展 | 第15-19页 |
| 1.1.1 乳腺癌及其流行病学 | 第15-16页 |
| 1.1.2 乳腺癌的分类 | 第16-17页 |
| 1.1.3 乳腺癌的治疗方法 | 第17-19页 |
| 1.2 血管形成在肿瘤发生发展中的作用 | 第19-21页 |
| 1.2.1 血管形成 | 第19页 |
| 1.2.2 肿瘤血管形成 | 第19-21页 |
| 1.3 miR153研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3.1 microRNA | 第21页 |
| 1.3.2 miR153与肿瘤 | 第21-22页 |
| 1.4 ANGPT1研究进展 | 第22-23页 |
| 1.4.1 ANGPT1与血管形成 | 第22-23页 |
| 1.4.2 ANGPT1与肿瘤 | 第23页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第23-25页 |
| 第二章 ANGPT1是miR153的靶基因 | 第25-55页 |
| 2.1 材料和方法 | 第25-49页 |
| 2.1.1 材料 | 第25-37页 |
| 2.1.2 方法 | 第37-49页 |
| 2.2 结果 | 第49-52页 |
| 2.2.1 ANGPT1预测为miR153的靶基因 | 第49页 |
| 2.2.2 ANGPT1蛋白在乳腺癌细胞系中表达 | 第49-50页 |
| 2.2.3 瞬时转染miR153 mimics下调ANGPT1的表达 | 第50-51页 |
| 2.2.4 双荧光素酶报告基因验证miR153靶向ANGPT13 'UTR | 第51-52页 |
| 2.2.5 乳腺癌细胞系中ANGPT1 mRNA与miR153的相关性分析 | 第52页 |
| 2.3 讨论 | 第52-53页 |
| 2.3.1 miR153靶序列突变体的选择 | 第52页 |
| 2.3.2 miR153下调ANGPT1蛋白水平 | 第52-53页 |
| 2.3.3 细胞系的细胞状态检测以及支原体检测 | 第53页 |
| 2.3.4 ANGPT1蛋白在乳腺癌细胞系中普遍表达 | 第53页 |
| 2.3.5 ANGPT1 mRNA以及miR153相关性分析 | 第53页 |
| 2.4 小结 | 第53-55页 |
| 第三章 沉默ANGPT1表达抑制HUVEC细胞的迁移和管腔形成 | 第55-76页 |
| 3.1 材料和方法 | 第55-65页 |
| 3.1.1 材料 | 第55-59页 |
| 3.1.2 方法 | 第59-65页 |
| 3.2 结果 | 第65-73页 |
| 3.2.1 ANGPT1siRNA下调ANGPT1的蛋白表达 | 第65页 |
| 3.2.2 siANGPT1和miR153下调MCF7细胞中的ANGPT1后不影响HUVEC的DNA复制 | 第65-66页 |
| 3.2.3 siANGPT1和miR153抑制HUVEC的迁移 | 第66-68页 |
| 3.2.4 siANGPT1和miR153下调ANGPT1后抑制HUVEC管腔形成 | 第68-71页 |
| 3.2.5 在原代HUVEC细胞miR153下调ANGPT1蛋白水平 | 第71-72页 |
| 3.2.6 miR153抑制原代HUVEC细胞的迁移 | 第72-73页 |
| 3.2.7 miR153抑制原代HUVEC细胞的管腔形成 | 第73页 |
| 3.3 讨论 | 第73-75页 |
| 3.3.1 下调ANGPT1表达策略 | 第73-74页 |
| 3.3.2 HUVEC管腔形成实验方法探究 | 第74页 |
| 3.3.3 EdU检测HUVEC细胞增殖 | 第74页 |
| 3.3.4 miR153在原代HUVEC细胞中的功能实验策略 | 第74-75页 |
| 3.3.5 原代HUVEC转染miR153后划痕和管腔形成实验条件探索 | 第75页 |
| 3.4 小结 | 第75-76页 |
| 第四章 过表达ANGPT1质粒构建 | 第76-95页 |
| 4.1 材料和方法 | 第76-86页 |
| 4.1.1 材料 | 第76-80页 |
| 4.1.2 方法 | 第80-86页 |
| 4.2 结果 | 第86-93页 |
| 4.2.1 PCR扩增ANGPT1 | 第86-87页 |
| 4.2.2 ANGPT1过表达质粒细菌单克隆PCR鉴定 | 第87-88页 |
| 4.2.3 ANGPT1过表达质粒测序结果 | 第88-93页 |
| 4.2.4 过表达质粒在HEK293T细胞中过表达ANGPT1 | 第93页 |
| 4.3 讨论 | 第93-94页 |
| 4.3.1 ANGPT1过表达质粒构建 | 第93-94页 |
| 4.3.2 ANGPT1过表达细胞系选择 | 第94页 |
| 4.4 小结 | 第94-95页 |
| 全文总结 | 第95-96页 |
| 展望 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-104页 |
| 附录 | 第104页 |
