摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒研究进展 | 第10-30页 |
1 PRRSV的生物学特性 | 第10-11页 |
2. PRRSV基因编码的蛋白 | 第11-15页 |
·非结构蛋白 | 第11-12页 |
·结构蛋白 | 第12-15页 |
3 PRRSV的免疫学特性 | 第15-16页 |
·体液免疫 | 第15页 |
·细胞免疫 | 第15-16页 |
4 疫苗研究 | 第16-18页 |
·PRRSV新型佐剂疫苗 | 第16-17页 |
·载体疫苗 | 第17页 |
·DNA疫苗 | 第17-18页 |
参考文献 | 第18-30页 |
第二章 慢病毒介导的RNA干扰研究进展 | 第30-52页 |
1 RNAI的分子机制 | 第30-33页 |
·小干扰RNA | 第31-32页 |
·微小RNA | 第32-33页 |
2 sIRNA靶序列的设计和制备 | 第33-35页 |
·siRNA靶序列的设计 | 第33页 |
·siRNA靶序列的制备 | 第33-35页 |
3 慢病毒载体 | 第35-38页 |
·基于HIV-1的慢病毒载体 | 第35页 |
·HIV-1的基本结构 | 第35-36页 |
·基于HIV-1的慢病毒载体发展 | 第36-38页 |
4 慢病毒介导的RNAI在抗病毒方面的应用 | 第38-43页 |
·艾滋病病毒 | 第39-41页 |
·肝炎病毒 | 第41页 |
·人乳头瘤病毒 | 第41页 |
·柯萨奇病毒 | 第41-42页 |
·乙型脑炎病毒 | 第42页 |
·朊病毒 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-52页 |
第三章 靶向PRRSV ORF1和ORF7shRNA重组慢病毒的构建及滴度测定 | 第52-66页 |
1 材料与方法 | 第52-59页 |
·材料 | 第52-53页 |
·方法 | 第53-59页 |
2 结果 | 第59-62页 |
·慢病毒载体质粒pHAGE-CMV-MCS-IZsGreen,包装质粒psPAX2,包膜质粒pMD2.G的酶切鉴定 | 第59页 |
·PH1-shRNA表达框的扩增和重组慢病毒载体质粒的构建 | 第59-61页 |
·慢病毒的包装 | 第61页 |
·慢病毒滴度的测定 | 第61-62页 |
·慢病毒感染Marc-145细胞 | 第62页 |
3 讨论 | 第62-66页 |
第四章 靶向PRRSV ORF1 shRNA重组慢病毒的构建及滴度测定 | 第66-76页 |
1 材料与方法 | 第66-70页 |
·材料 | 第66-67页 |
·方法 | 第67-70页 |
2 结果 | 第70-71页 |
·重组慢病毒载体质粒的鉴定 | 第70-71页 |
·慢病毒的包装 | 第71页 |
·慢病毒滴度测定 | 第71页 |
3 讨论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-76页 |
第五章 shRNA~(EGFP)-MARC-145细胞系的建立及其体外抑制PRRSV复制研究 | 第76-88页 |
1 材料与方法 | 第76-80页 |
·材料 | 第76-77页 |
·方法 | 第77-80页 |
2 结果 | 第80-84页 |
·rLV-NP9感染Marc-145细胞 | 第80-81页 |
·流式细胞仪筛选结果 | 第81页 |
·筛选细胞的绿色荧光蛋白表达和细胞形态观察 | 第81-82页 |
·PCR鉴定结果 | 第82页 |
·质粒酶切鉴定并测序 | 第82-83页 |
·细胞病变(CPE)与TCID_(50)测定结果 | 第83-84页 |
·实时PCR结果 | 第84页 |
3 讨论 | 第84-88页 |
全文总结 | 第88-90页 |
致谢 | 第90-92页 |
附录 | 第92页 |