| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 引言 | 第9-16页 |
| 1.1 马铃薯早疫病菌研究概况 | 第9-10页 |
| 1.2 土壤中茄链格孢研究进展 | 第10-11页 |
| 1.3 土壤中病原菌检测技术发展概况 | 第11-13页 |
| 1.3.1 传统检测方法 | 第11页 |
| 1.3.2 分子检测方法 | 第11-13页 |
| 1.4 巢式 PCR 和实时荧光定量 PCR 在植物病原菌检测中的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.4.1 巢式 PCR 在植物病原菌检测中的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.4.2 实时荧光定量 PCR 在植物病原菌检测中的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-24页 |
| 2.1 试验材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 供试菌株 | 第16-17页 |
| 2.1.2 供试培养基 | 第17页 |
| 2.1.3 供试马铃薯品种及土壤样品 | 第17-18页 |
| 2.2 供试试剂及仪器设备 | 第18页 |
| 2.2.1 供试主要试剂 | 第18页 |
| 2.2.2 主要仪器设备 | 第18页 |
| 2.3 供试材料 DNA 的提取方法 | 第18-19页 |
| 2.3.1 马铃薯早疫病菌株及叶片中 DNA 提取 | 第18页 |
| 2.3.2 土壤样品 DNA 的提取 | 第18-19页 |
| 2.4 半巢式 PCR 检测马铃薯早疫病菌方法的建立 | 第19-20页 |
| 2.4.1 特异性引物 ptAsQ-F 的设计及验证 | 第19页 |
| 2.4.2 半巢式 PCR 方法反应条件的优化 | 第19-20页 |
| 2.4.3 半巢式 PCR 灵敏度试验 | 第20页 |
| 2.4.4 土壤中早疫病菌的半巢式 PCR 检测 | 第20页 |
| 2.5 实时荧光定量 PCR 检测马铃薯早疫病菌方法的建立 | 第20-24页 |
| 2.5.1 马铃薯早疫病菌 ITS 序列的克隆 | 第20-22页 |
| 2.5.2 重组质粒的制备 | 第22页 |
| 2.5.3 实时荧光定量 PCR 标准曲线的构建 | 第22-23页 |
| 2.5.4 马铃薯叶片中早疫病菌的定量检测 | 第23页 |
| 2.5.5 土壤样品中马铃薯早疫病菌的定量检测 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-36页 |
| 3.1 半巢式 PCR 检测茄链格孢方法的建立 | 第24-28页 |
| 3.1.1 特异引物的确定及验证 | 第24页 |
| 3.1.2 半巢式 PCR 方法反应条件的优化 | 第24-25页 |
| 3.1.3 半巢式 PCR 灵敏度检测 | 第25-26页 |
| 3.1.4 土壤中早疫病菌的半巢式 PCR 检测 | 第26-28页 |
| 3.2 实时荧光定量 PCR 检测茄链格孢方法的建立 | 第28-36页 |
| 3.2.1 马铃薯早疫病菌 ITS 序列的克隆 | 第28-29页 |
| 3.2.2 质粒拷贝数及 PCR 鉴定结果 | 第29页 |
| 3.2.3 实时荧光定量 PCR 标准曲线的构建 | 第29-32页 |
| 3.2.4 马铃薯叶片中早疫病菌的定量检测 | 第32-33页 |
| 3.2.5 土壤中早疫病菌的定量检测 | 第33-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 4.1 土壤中茄链格孢菌检测分析 | 第36页 |
| 4.2 巢式 PCR 和实时荧光定量 PCR 检测灵敏度分析 | 第36-37页 |
| 4.3 马铃薯叶片中茄链格孢定量检测分析 | 第37-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-46页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第46-47页 |
| 作者简介 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
