摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
第一章 引言 | 第13-32页 |
1.1 间充质干细胞 | 第13-20页 |
1.1.1 MSCs的发现、来源及体外培养 | 第13-14页 |
1.1.2 MSCs的细胞形态、增殖及表面标记物 | 第14-15页 |
1.1.3 MSCs的功能 | 第15-19页 |
1.1.4 MSCs应用前景 | 第19-20页 |
1.2 嵌合体 | 第20-24页 |
1.2.1 嵌合体的分类 | 第20页 |
1.2.2 嵌合体中的免疫耐受 | 第20-21页 |
1.2.3 禽类嵌合体的制备 | 第21-23页 |
1.2.4 禽类嵌合体的应用 | 第23-24页 |
1.3 调节性T细胞 | 第24-31页 |
1.3.1 调节性T细胞分类 | 第24-25页 |
1.3.2 Treg的功能特性及作用机制 | 第25-27页 |
1.3.3 Treg与疾病发生 | 第27-29页 |
1.3.4 Treg与疾病治疗 | 第29-30页 |
1.3.5 家禽的调节性T淋巴细胞 | 第30-31页 |
1.4 研究的目的和意义 | 第31-32页 |
第二章 材料与方法 | 第32-55页 |
2.1 实验材料 | 第32-36页 |
2.1.1 质粒与菌株 | 第32页 |
2.1.2 实验动物与鸡胚 | 第32页 |
2.1.3 试剂及耗材 | 第32-33页 |
2.1.4 实验仪器 | 第33-34页 |
2.1.5 主要试剂配制 | 第34-36页 |
2.1.6 实验数据分析相关软件 | 第36页 |
2.2 实验方法 | 第36-55页 |
2.2.1 MSCs的培养 | 第36-39页 |
2.2.2 流式细胞术 | 第39页 |
2.2.3 总RNA提取 | 第39-40页 |
2.2.4 反转录PCR | 第40-41页 |
2.2.5 荧光实时定量PCR | 第41-43页 |
2.2.6 提取基因组DNA | 第43-44页 |
2.2.7 PCR鉴定 | 第44-45页 |
2.2.8 细胞生长曲线 | 第45页 |
2.2.9 Transwell实验 | 第45-46页 |
2.2.10 药物MTT实验 | 第46-47页 |
2.2.11 Western Bloting | 第47-48页 |
2.2.12 MSCs体外诱导分化 | 第48-49页 |
2.2.13 ELISA检测 | 第49-50页 |
2.2.14 感受态细胞的制备及质粒提取 | 第50-52页 |
2.2.15 脂质体转染及慢病毒感染 | 第52-53页 |
2.2.16 嵌合体制备及荧光观察 | 第53-54页 |
2.2.17 引物合成 | 第54页 |
2.2.18 实验数据的分析与图片处理 | 第54-55页 |
第三章 结果与分析 | 第55-85页 |
3.1 白来航鸡MSCs的生物学特性 | 第55-68页 |
3.1.1 细胞形态比较 | 第55-56页 |
3.1.2 细胞表面标记物比较 | 第56-60页 |
3.1.3 细胞体外增殖能力比较 | 第60-61页 |
3.1.4 细胞体外迁移能力比较 | 第61-63页 |
3.1.5 细胞分化能力比较 | 第63-68页 |
3.1.6 免疫原性 | 第68页 |
3.2 禽类嵌合体的制备 | 第68-82页 |
3.2.1 供体细胞dBM-MSCs的培养及鉴定 | 第69-73页 |
3.2.2 制备嵌合体显微注射部位 | 第73-74页 |
3.2.3 dBM-MSCs的荧光标记及体内迁移观察 | 第74-80页 |
3.2.4 嵌合体鉴定 | 第80-82页 |
3.3 嵌合体中CD4~+CD25~+T细胞的表达情况 | 第82-85页 |
3.3.1 嵌合体出壳后CD4~+CD25~+T细胞迁移情况 | 第82-84页 |
3.3.2 嵌合体中CD4~+CD25~+T细胞及相关细胞因子变化 | 第84-85页 |
第四章 讨论 | 第85-91页 |
4.1 白来航鸡不同来源MSCs的比较 | 第85-88页 |
4.2 利用MSCs制备种间嵌合体 | 第88-89页 |
4.3 鸡中CD4~+CD25~+T细胞的起源及其在嵌合体中的变化 | 第89-90页 |
4.4 鸡胚动物模型 | 第90-91页 |
第五章 结论与展望 | 第91-92页 |
5.1 结论 | 第91页 |
5.2 展望 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-105页 |
致谢 | 第105-106页 |
附录 | 第106-109页 |
个人简历 | 第109页 |