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鸡不同来源MSCs的比较及MSCs制备嵌合体中CD4~+CD25~+T细胞变化研究

摘要第4-6页
abstract第6-7页
缩略词表第11-13页
第一章 引言第13-32页
    1.1 间充质干细胞第13-20页
        1.1.1 MSCs的发现、来源及体外培养第13-14页
        1.1.2 MSCs的细胞形态、增殖及表面标记物第14-15页
        1.1.3 MSCs的功能第15-19页
        1.1.4 MSCs应用前景第19-20页
    1.2 嵌合体第20-24页
        1.2.1 嵌合体的分类第20页
        1.2.2 嵌合体中的免疫耐受第20-21页
        1.2.3 禽类嵌合体的制备第21-23页
        1.2.4 禽类嵌合体的应用第23-24页
    1.3 调节性T细胞第24-31页
        1.3.1 调节性T细胞分类第24-25页
        1.3.2 Treg的功能特性及作用机制第25-27页
        1.3.3 Treg与疾病发生第27-29页
        1.3.4 Treg与疾病治疗第29-30页
        1.3.5 家禽的调节性T淋巴细胞第30-31页
    1.4 研究的目的和意义第31-32页
第二章 材料与方法第32-55页
    2.1 实验材料第32-36页
        2.1.1 质粒与菌株第32页
        2.1.2 实验动物与鸡胚第32页
        2.1.3 试剂及耗材第32-33页
        2.1.4 实验仪器第33-34页
        2.1.5 主要试剂配制第34-36页
        2.1.6 实验数据分析相关软件第36页
    2.2 实验方法第36-55页
        2.2.1 MSCs的培养第36-39页
        2.2.2 流式细胞术第39页
        2.2.3 总RNA提取第39-40页
        2.2.4 反转录PCR第40-41页
        2.2.5 荧光实时定量PCR第41-43页
        2.2.6 提取基因组DNA第43-44页
        2.2.7 PCR鉴定第44-45页
        2.2.8 细胞生长曲线第45页
        2.2.9 Transwell实验第45-46页
        2.2.10 药物MTT实验第46-47页
        2.2.11 Western Bloting第47-48页
        2.2.12 MSCs体外诱导分化第48-49页
        2.2.13 ELISA检测第49-50页
        2.2.14 感受态细胞的制备及质粒提取第50-52页
        2.2.15 脂质体转染及慢病毒感染第52-53页
        2.2.16 嵌合体制备及荧光观察第53-54页
        2.2.17 引物合成第54页
        2.2.18 实验数据的分析与图片处理第54-55页
第三章 结果与分析第55-85页
    3.1 白来航鸡MSCs的生物学特性第55-68页
        3.1.1 细胞形态比较第55-56页
        3.1.2 细胞表面标记物比较第56-60页
        3.1.3 细胞体外增殖能力比较第60-61页
        3.1.4 细胞体外迁移能力比较第61-63页
        3.1.5 细胞分化能力比较第63-68页
        3.1.6 免疫原性第68页
    3.2 禽类嵌合体的制备第68-82页
        3.2.1 供体细胞dBM-MSCs的培养及鉴定第69-73页
        3.2.2 制备嵌合体显微注射部位第73-74页
        3.2.3 dBM-MSCs的荧光标记及体内迁移观察第74-80页
        3.2.4 嵌合体鉴定第80-82页
    3.3 嵌合体中CD4~+CD25~+T细胞的表达情况第82-85页
        3.3.1 嵌合体出壳后CD4~+CD25~+T细胞迁移情况第82-84页
        3.3.2 嵌合体中CD4~+CD25~+T细胞及相关细胞因子变化第84-85页
第四章 讨论第85-91页
    4.1 白来航鸡不同来源MSCs的比较第85-88页
    4.2 利用MSCs制备种间嵌合体第88-89页
    4.3 鸡中CD4~+CD25~+T细胞的起源及其在嵌合体中的变化第89-90页
    4.4 鸡胚动物模型第90-91页
第五章 结论与展望第91-92页
    5.1 结论第91页
    5.2 展望第91-92页
参考文献第92-105页
致谢第105-106页
附录第106-109页
个人简历第109页

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