| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-23页 |
| 1.1 白术概述 | 第11-12页 |
| 1.1.1 白术的植物学特性 | 第11-12页 |
| 1.1.2 白术的化学成分研究 | 第12页 |
| 1.2 白术的价值 | 第12-14页 |
| 1.2.1 药理作用 | 第12-14页 |
| 1.2.2 商业价值 | 第14页 |
| 1.3 常见病虫害 | 第14-16页 |
| 1.3.1 常见病害 | 第14-15页 |
| 1.3.2 虫害 | 第15-16页 |
| 1.4 白术组织培养与遗传转化研究现状 | 第16-21页 |
| 1.4.1 白术组织培养现状 | 第16-17页 |
| 1.4.2 白术遗传转化现状 | 第17-18页 |
| 1.4.3 影响农杆菌介导遗传转化效率的因素 | 第18-21页 |
| 1.5 细胞凋亡与抗病育种 | 第21-23页 |
| 1.5.1 细胞凋亡 | 第21页 |
| 1.5.2 p35基因与细胞凋亡 | 第21-22页 |
| 1.5.3 iap基因与细胞凋亡 | 第22页 |
| 1.5.4 抑制凋亡基因与抗性育种 | 第22-23页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-33页 |
| 2.1 材料 | 第23-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.3 载体质粒、菌株及灰霉病菌 | 第24-26页 |
| 2.1.4 转化受体材料 | 第26页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 方法 | 第27-33页 |
| 2.2.1 白术再生体系建立 | 第27-28页 |
| 2.2.2 白术农杆菌介导转化体系的建立 | 第28-29页 |
| 2.2.3 iap和p35基因转化白术及检测 | 第29-32页 |
| 2.2.4 数据处理及统计 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-51页 |
| 3.1 白术再生体系的建立 | 第33-40页 |
| 3.1.1 种子表面除菌和无菌苗的获得 | 第33页 |
| 3.1.2 白术不定芽诱导 | 第33-39页 |
| 3.1.3 再生苗生根和移栽 | 第39-40页 |
| 3.2 白术农杆菌介导转化体系的建立 | 第40-48页 |
| 3.2.1 Basta有效筛选浓度的确定 | 第40页 |
| 3.2.2 抑菌剂种类的确定 | 第40-41页 |
| 3.2.3 外植体类型的选择 | 第41-42页 |
| 3.2.4 影响农杆菌介导转化因素的探讨 | 第42页 |
| 3.2.5 GUS染色 | 第42-43页 |
| 3.2.6 pBar-gus转基因植株的获得及鉴定 | 第43-47页 |
| 3.2.7 转基因植株bar基因的表达 | 第47-48页 |
| 3.2.8 Basta喷洒实验 | 第48页 |
| 3.3 iap和p35基因转化白术及检测 | 第48-51页 |
| 3.3.1 转化苗的获得 | 第48-49页 |
| 3.3.2 PCR检测和bar基因表达 | 第49页 |
| 3.3.3 T_0代转基因白术抗灰霉病试验 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-56页 |
| 4.1 白术再生体系的建立 | 第51-53页 |
| 4.1.1 白术各外植体的选取 | 第51页 |
| 4.1.2 不同激素浓度与组合处理对再生的影响 | 第51-52页 |
| 4.1.3 TDZ的高效作用 | 第52-53页 |
| 4.2 农杆菌介导的白术遗传转化 | 第53-54页 |
| 4.2.1 筛选压和筛选时间对遗传转化的影响 | 第53页 |
| 4.2.2 农杆菌转化中各实验条件的影响 | 第53-54页 |
| 4.3 转基因植株的鉴定 | 第54-56页 |
| 5 展望及创新之处 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录Ⅰ质粒提取操作步骤 | 第65-66页 |
| 附录Ⅱ GUS染色液配方及配制方法 | 第66-67页 |
| 附录Ⅲ CTAB法提取白术叶片基因组DNA | 第67-68页 |
| 附录Ⅳ试剂盒提取白术叶片基因组DNA | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |