中文摘要 | 第10-11页 |
英文摘要 | 第11页 |
第一章 前言 | 第12-23页 |
1.1 出芽短梗霉的简介 | 第12-13页 |
1.1.1 出芽短梗霉的分类与地位 | 第12页 |
1.1.2 出芽短梗霉的菌落形态分析 | 第12页 |
1.1.3 出芽短梗霉的耐盐性质分析 | 第12-13页 |
1.2 HAL3蛋白家族在真核生物中的研究进展 | 第13-18页 |
1.2.1 HAL3蛋白在酿酒酵母中的研究进展 | 第13-16页 |
1.2.2 HAL3蛋白在拟南芥中的研究进展 | 第16-17页 |
1.2.3 HAL3蛋白在烟草中的研究进展 | 第17页 |
1.2.4 HAL3蛋白在水稻中的研究进展 | 第17-18页 |
1.3 真核生物耐盐的研究进展 | 第18-21页 |
1.3.1 植物受盐胁迫后的影响 | 第18-19页 |
1.3.2 真核生物耐盐相关基因的简介 | 第19-21页 |
1.4 本课题的目的与意义 | 第21-23页 |
第二章 ApHAL3基因的克隆、序列分析及功能验证 | 第23-35页 |
2.1 材料与方法 | 第23-29页 |
2.1.1 材料 | 第23-24页 |
2.1.2 试验方法 | 第24-29页 |
2.2 结果与分析 | 第29-33页 |
2.2.1 ApHAL3与AtHAL3a、Dfp以及OsHAL3的氨基酸序列同源比对分析 | 第29页 |
2.2.2 ApHAL3 CDS的克隆 | 第29-31页 |
2.2.3 大肠杆菌表达载体的构建与鉴定 | 第31-32页 |
2.2.4 ApHAL3蛋白互补温度敏感和营养缺陷实验结果 | 第32-33页 |
2.3 讨论 | 第33-35页 |
第三章 ApHAL3蛋白PPCDC功能的关键氨基酸位点分析 | 第35-58页 |
3.1 材料与方法 | 第35-40页 |
3.1.1 定点突变的引入 | 第35-38页 |
3.1.2 目的片段的扩增 | 第38-40页 |
3.1.3 突变验证 | 第40页 |
3.1.4 转化子生长速率检测 | 第40页 |
3.2 结果与分析 | 第40-56页 |
3.2.1 基因目的片段的获得 | 第40-45页 |
3.2.2 重组质粒的筛选与鉴定 | 第45-46页 |
3.2.3 序列分析 | 第46-47页 |
3.2.4 表达载体的构建 | 第47-50页 |
3.2.5 ApHAL3蛋白突变位点温度敏感实验结果 | 第50-53页 |
3.2.6 Δdfp转化子的生长速率检测结果 | 第53-56页 |
3.3 结论 | 第56-57页 |
3.4 讨论 | 第57-58页 |
3.4.1 ApHAL3与OsHAL3,AtHAL3a的功能位点可能有所不同 | 第57页 |
3.4.2 Cys~(212)和Met~(220)在ApHAL3蛋白中可能发挥重要作用 | 第57-58页 |
第四章 出芽短梗霉ApHAL3基因在盐诱导下qRT-PCR分析 | 第58-64页 |
4.1 材料与方法 | 第58-59页 |
4.1.1 材料 | 第58页 |
4.1.2 试验方法 | 第58-59页 |
4.2 结果与分析 | 第59-63页 |
4.2.1 qRT-PCR扩增内参基因和目的基因参数分析 | 第59-61页 |
4.2.2 盐胁迫下出芽短梗霉ApHAL3基因的差异表达 | 第61-63页 |
4.3 结论 | 第63页 |
4.4 讨论 | 第63-64页 |
第五章 结论与展望 | 第64-66页 |
5.1 结论 | 第64页 |
5.1.1 出芽短梗霉ApHAL3基因的克隆 | 第64页 |
5.1.2 出芽短梗霉ApHAL3蛋白的功能位点分析 | 第64页 |
5.1.3 出芽短梗霉ApHAL3基因的表达分析 | 第64页 |
5.2 展望 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
附录 | 第72-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
攻读学位论文期间发表文章 | 第83页 |