| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 1. 引言 | 第10-21页 |
| 1.1 研究目的和意义 | 第10-11页 |
| 1.2 国内外相关研究进展 | 第11-20页 |
| 1.2.1 DNA甲基化和组蛋白乙酰化是表观遗传研究热点 | 第11-14页 |
| 1.2.2 胚胎发育关键时期的合子基因组启动 | 第14-16页 |
| 1.2.3 表观遗传与核重编程及胚胎发育的相关性 | 第16-20页 |
| 1.3 研究计划 | 第20-21页 |
| 2. 材料与方法 | 第21-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-24页 |
| 2.1.1 实验动物及细胞 | 第21页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.2.1 细胞培养相关试剂 | 第21-22页 |
| 2.1.2.2 胚胎培养试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.2.3. 免疫组化相关试剂 | 第23页 |
| 2.1.3 实验主要器材及仪器单 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-33页 |
| 2.2.1 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)冻存复苏 | 第24-26页 |
| 2.2.1.1 MEF冻存 | 第24-25页 |
| 2.2.1.2 MEF复苏 | 第25页 |
| 2.2.1.3 MEF传代 | 第25页 |
| 2.2.1.4 MEF调整细胞周期 | 第25-26页 |
| 2.2.1.5 iPS细胞准备 | 第26页 |
| 2.2.2 体内组各时期胚胎的收集 | 第26-27页 |
| 2.2.3 体外培养组各期胚胎的收集 | 第27页 |
| 2.2.4 孤雌激活组各时期胚胎的收集 | 第27页 |
| 2.2.5 TSA处理孤雌激活胚胎和体外培养胚胎 | 第27-28页 |
| 2.2.6 克隆胚胎的注射用针的准备 | 第28页 |
| 2.2.6.1 去核针的制作 | 第28页 |
| 2.2.6.2 注射针的制作 | 第28页 |
| 2.2.7 克隆胚胎的构建 | 第28-29页 |
| 2.2.8 KM-MEF克隆胚2-细胞期胚胎的收集 | 第29页 |
| 2.2.9 KM-iPS克隆胚2-细胞期胚胎的收集 | 第29-30页 |
| 2.2.10 iCR-iPS克隆胚2-细胞期胚胎的收集 | 第30页 |
| 2.2.11 C57-iPS克隆胚2-细胞期胚胎的收集 | 第30页 |
| 2.2.12 间接免疫荧光检测各期各类胚胎H3K9乙酰化模式 | 第30-31页 |
| 2.2.13 间接免疫荧光检测各期各类胚胎H3K27乙酰化模式 | 第31页 |
| 2.2.14 间接免疫荧光检测各期各类胚胎DNA甲基化模式 | 第31-32页 |
| 2.2.15 统计分析 | 第32-33页 |
| 3. 结果与分析 | 第33-46页 |
| 3.1 H3K9乙酰化对小鼠植入前各时期各类胚胎发育能力的影响 | 第33-35页 |
| 3.2 不同来源小鼠2-细胞期胚胎的DNA甲基化和组蛋白乙酰化模式差异 | 第35-41页 |
| 3.2.1 不同培养体系中的不同克隆胚胎的发育率 | 第35-36页 |
| 3.2.2 小鼠2-细胞期体内胚、孤雌激活胚和各种克隆胚胎的DNA甲基化模式 | 第36-38页 |
| 3.2.3 小鼠体内胚、孤雌激活胚和不同克隆胚胎的H3k9乙酰化模式 | 第38-40页 |
| 3.2.4 小鼠体内胚、各种克隆胚胎的H3k27乙酰化模式 | 第40-41页 |
| 3.3 利用TSA改变H3K9乙酰化提高小鼠孤雌胚胎发育能力的研究 | 第41-46页 |
| 3.3.1 TSA处理前后小鼠植入前各时期孤雌胚胎H3K9乙酰化模式的差异 | 第41-43页 |
| 3.3.2 TSA处理前后小鼠植入前各时期体外培养胚胎H3K9乙酰化模式的差异 | 第43-45页 |
| 3.3.3 小鼠孤雌胚与体外培养胚胎在TSA处理前后发育能力的差异 | 第45-46页 |
| 4. 讨论 | 第46-49页 |
| 5. 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-59页 |
| 附录 | 第59-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 硕士期间发表论文 | 第65-66页 |
| 硕士期间参与科研情况 | 第66页 |
