摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 引言 | 第9-19页 |
1 濒危鸟类寄生虫研究意义 | 第9-10页 |
2 非损伤性取样法在濒危鸟类保护研究中的意义 | 第10-11页 |
2.1 非损伤性取样法 | 第10页 |
2.2 粪便在濒危鸟类肠道寄生虫研究中的应用 | 第10-11页 |
3 肠道寄生虫的检测方法 | 第11-13页 |
3.1 形态学鉴定 | 第11-12页 |
3.2 分子生物学技术的应用 | 第12-13页 |
4 ITS序列及其在寄生虫鉴定中的应用 | 第13-14页 |
4.1 ITS序列的结构特点 | 第13页 |
4.2 寄生虫ITS rDNA分子检测研究进展 | 第13-14页 |
5 实时荧光PCR技术及其在寄生虫检测诊断上的应用 | 第14-17页 |
5.1 实时荧光PCR的特点和优点 | 第14-15页 |
5.2 实时荧光PCR在寄生虫检测和鉴定上的应用 | 第15-17页 |
6 本研究的主要内容和意义 | 第17-19页 |
第二章 研究区域概况 | 第19-21页 |
1 研究区域 | 第19-20页 |
2 研究对象 | 第20-21页 |
第三章 材料和仪器 | 第21-23页 |
1 粪便样品采集 | 第21页 |
2 实验器材 | 第21-22页 |
3 主要试剂 | 第22-23页 |
第四章 荧光PCR检测方法的建立 | 第23-38页 |
1 虫卵样本的收集 | 第23-27页 |
1.1 虫卵的漂浮与培养 | 第23页 |
1.2 单虫卵的分离 | 第23-24页 |
1.3 寄生虫镜检结果 | 第24-27页 |
2 毛细线虫虫卵前处理方法 | 第27-31页 |
2.1 液氮/85℃水浴法(冷热交替) | 第27-29页 |
2.2 超声破碎法 | 第29-30页 |
2.3 裂解消化法 | 第30-31页 |
3 PCR产物克隆及测序验证 | 第31-36页 |
3.1 目的基因的回收 | 第31页 |
3.2 构建重组质粒 | 第31-32页 |
3.3 化学法转化 | 第32页 |
3.4 PCR法验证阳性克隆 | 第32-33页 |
3.5 毛细线虫ITS序列测序结果 | 第33-36页 |
4 特异性实验 | 第36页 |
5 RT-PCR分子检测方法的初步应用 | 第36-38页 |
第五章 讨论 | 第38-42页 |
1 白头鹤肠道寄生虫感染特征 | 第38页 |
2 单线虫卵DNA提取方法的比较 | 第38-40页 |
3 虫卵荧光PCR检测方法的优势 | 第40页 |
4 虫卵荧光PCR检测方法的初步应用 | 第40-42页 |
第六章 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第54页 |