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越冬白头鹤(Grus monacha)肠道寄生线虫分子检测方法的建立

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 引言第9-19页
    1 濒危鸟类寄生虫研究意义第9-10页
    2 非损伤性取样法在濒危鸟类保护研究中的意义第10-11页
        2.1 非损伤性取样法第10页
        2.2 粪便在濒危鸟类肠道寄生虫研究中的应用第10-11页
    3 肠道寄生虫的检测方法第11-13页
        3.1 形态学鉴定第11-12页
        3.2 分子生物学技术的应用第12-13页
    4 ITS序列及其在寄生虫鉴定中的应用第13-14页
        4.1 ITS序列的结构特点第13页
        4.2 寄生虫ITS rDNA分子检测研究进展第13-14页
    5 实时荧光PCR技术及其在寄生虫检测诊断上的应用第14-17页
        5.1 实时荧光PCR的特点和优点第14-15页
        5.2 实时荧光PCR在寄生虫检测和鉴定上的应用第15-17页
    6 本研究的主要内容和意义第17-19页
第二章 研究区域概况第19-21页
    1 研究区域第19-20页
    2 研究对象第20-21页
第三章 材料和仪器第21-23页
    1 粪便样品采集第21页
    2 实验器材第21-22页
    3 主要试剂第22-23页
第四章 荧光PCR检测方法的建立第23-38页
    1 虫卵样本的收集第23-27页
        1.1 虫卵的漂浮与培养第23页
        1.2 单虫卵的分离第23-24页
        1.3 寄生虫镜检结果第24-27页
    2 毛细线虫虫卵前处理方法第27-31页
        2.1 液氮/85℃水浴法(冷热交替)第27-29页
        2.2 超声破碎法第29-30页
        2.3 裂解消化法第30-31页
    3 PCR产物克隆及测序验证第31-36页
        3.1 目的基因的回收第31页
        3.2 构建重组质粒第31-32页
        3.3 化学法转化第32页
        3.4 PCR法验证阳性克隆第32-33页
        3.5 毛细线虫ITS序列测序结果第33-36页
    4 特异性实验第36页
    5 RT-PCR分子检测方法的初步应用第36-38页
第五章 讨论第38-42页
    1 白头鹤肠道寄生虫感染特征第38页
    2 单线虫卵DNA提取方法的比较第38-40页
    3 虫卵荧光PCR检测方法的优势第40页
    4 虫卵荧光PCR检测方法的初步应用第40-42页
第六章 结论第42-43页
参考文献第43-53页
致谢第53-54页
攻读学位期间发表的学术论文目录第54页

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