| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-23页 |
| 1.1 地黄概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 地黄化学成分的研究 | 第13-14页 |
| 1.1.2 地黄的药理作用 | 第14页 |
| 1.2 环烯醚萜苷合成相关酶研究 | 第14-23页 |
| 1.2.1 环烯醚萜苷合成途径 | 第15-17页 |
| 1.2.2 5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶 | 第17页 |
| 1.2.3 香叶基焦磷酸合酶 | 第17-18页 |
| 1.2.4 香叶醇10脱氢酶 | 第18页 |
| 1.2.5 10-羟基香叶醇氧化还原酶 | 第18-19页 |
| 1.3 植物DNA甲基化的研究 | 第19-21页 |
| 1.3.1 DNA甲基化对植物生长发育的调控 | 第19-20页 |
| 1.3.2 甲基化抑制剂在植物中的应用 | 第20-21页 |
| 1.4 本课题研究目的及意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-41页 |
| 2.1 材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.2 引物 | 第23-24页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第24-25页 |
| 2.1.4 实验试剂及药品 | 第25页 |
| 2.1.5 主要试剂配方 | 第25页 |
| 2.2 实验材料的处理和培养 | 第25-26页 |
| 2.3 地黄环烯醚萜苷含量的检测 | 第26-27页 |
| 2.4 地黄环烯醚萜苷生物合成相关基因表达分析 | 第27-30页 |
| 2.4.1 相关基因挖掘 | 第27页 |
| 2.4.2 总RNA提取 | 第27-28页 |
| 2.4.3 总RNA纯度与浓度检测 | 第28页 |
| 2.4.4 反转录及cDNA质量检验 | 第28-29页 |
| 2.4.5 荧光定量PCR反应 | 第29页 |
| 2.4.6 结果统计分析 | 第29-30页 |
| 2.5 地黄 5-磷酸脱氧木酮糖还原异构酶基因的克隆 | 第30-41页 |
| 2.5.1 基因组DNA的提取与检测 | 第30-31页 |
| 2.5.2 DXR基因全长克隆 | 第31-36页 |
| 2.5.3 DXR基因生物信息学分析 | 第36-37页 |
| 2.5.4 hiTAIL-PCR法扩增DXR基因启动子 | 第37-39页 |
| 2.5.5 DXR基因植物表达载体的构建 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-93页 |
| 3.1 地黄环烯醚萜苷的积累 | 第41-43页 |
| 3.1.1 环烯醚萜苷含量线性方程的绘制 | 第41页 |
| 3.1.2 地黄环烯醚萜苷的积累动态 | 第41-43页 |
| 3.1.3 地黄品种对环烯醚萜苷积累的影响 | 第43页 |
| 3.2 地黄环烯醚萜苷合成相关基因的表达 | 第43-59页 |
| 3.2.1 RNA提取 | 第43-44页 |
| 3.2.2 基因的实时荧光定量 | 第44-46页 |
| 3.2.3 DXR基因的表达 | 第46-50页 |
| 3.2.4 GPPS基因的表达 | 第50-53页 |
| 3.2.5 G10H基因的表达 | 第53-56页 |
| 3.2.6 10HGO基因的表达 | 第56-59页 |
| 3.3 产地对地黄环烯醚萜苷合成的影响 | 第59-70页 |
| 3.3.1 产地对环烯醚萜苷积累的影响 | 第59-60页 |
| 3.3.2 产地对DXR基因表达的影响 | 第60-63页 |
| 3.3.3 产地对GPPS基因表达的影响 | 第63-65页 |
| 3.3.4 产地对G10H基因表达的影响 | 第65-68页 |
| 3.3.5 产地对 10HGO基因表达的影响 | 第68-70页 |
| 3.4 5-azaC对地黄环烯醚萜苷合成的影响 | 第70-82页 |
| 3.4.1 5-azaC对地黄环烯醚萜苷积累的影响 | 第70-71页 |
| 3.4.2 5-azaC对DXR基因表达的影响 | 第71-74页 |
| 3.4.3 5-azaC对GPPS基因表达的影响 | 第74-77页 |
| 3.4.4 5-azaC对G10H基因表达的影响 | 第77-79页 |
| 3.4.5 5-azaC对 10HGO基因表达的影响 | 第79-82页 |
| 3.5 DXR基因的克隆 | 第82-93页 |
| 3.5.1 DXR基因全长克隆 | 第82-84页 |
| 3.5.2 DXR基因的生物信息学分析 | 第84-87页 |
| 3.5.3 DXR基因启动子的扩增 | 第87-89页 |
| 3.5.4 DXR基因植物表达载体的构建 | 第89-93页 |
| 4 讨论 | 第93-99页 |
| 4.1 地黄总环烯醚萜苷的积累研究 | 第93-94页 |
| 4.2 地黄环烯醚萜苷合成相关酶基因研究 | 第94-95页 |
| 4.3 产地对地黄环烯醚萜苷合成的影响 | 第95-96页 |
| 4.4 5-azaC对地黄环烯醚萜苷合成的影响 | 第96-98页 |
| 4.5 地黄DXR基因的克隆 | 第98-99页 |
| 5 结论 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-113页 |
| 致谢 | 第113-115页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第115-116页 |
